陳 浩(安徽省滁州溫氏畜牧有限公司,安徽 滁州 239500)
肉雞感染新城疫病毒的診斷
陳 浩
(安徽省滁州溫氏畜牧有限公司,安徽 滁州 239500)
某養(yǎng)雞場飼養(yǎng)的肉仔雞發(fā)生了一起以全身粘膜和漿膜出血,淋巴系統(tǒng)腫脹、出血和壞死為主要特征的傳染病,通過對病死雞的臨床癥狀觀察、病理剖檢、病毒分離、分離毒株血凝試驗、中和試驗、動物回歸試驗,最終確定該雞場發(fā)生了雞新城疫病毒感染。
肉雞;新城疫病毒;診斷
雞新城疫(Newcastle disease,ND)是由雞新城疫病毒(Newcastle disease virus,ND)引起的一種多病型的高度接觸性、急性、烈性傳染?。?],具有傳播速度快、發(fā)病率和死亡率高等特征[2],是規(guī)模養(yǎng)殖場最容易發(fā)生的病毒傳染病之一,我國每年都有發(fā)病報道。新城疫病毒對所有家禽都易感,各種年齡和性別的雞都易感[3]。病雞和帶毒雞可以做為病毒傳播來源,受感染的雞在感染發(fā)病后的口和鼻分泌物中都可排出病毒,病毒感染后康復(fù)的雞也可以傳播病毒[4]。新城疫病毒感染一年四季都能發(fā)生,以春季多發(fā),2016年3月,某規(guī)模肉雞飼養(yǎng)場飼養(yǎng)的肉仔雞發(fā)生了一起疑似新城疫病毒感染病例,經(jīng)臨床診斷和病毒分離鑒定最終確診為由新城疫病毒感染所致。
2016年3月,某規(guī)模肉雞飼養(yǎng)場發(fā)生一起肉仔雞感染發(fā)病的情況,病雞表現(xiàn)食欲下降,精神萎靡,極少走動,翅膀下垂,眼半閉半睜,病雞有咳嗽,呼吸困難,常常張口呼吸,糞便稀薄,呈黃綠色,發(fā)病后2~5 d死亡,病死率達60%左右。
取病死雞剖檢可見全身粘膜和漿膜出血,淋巴系統(tǒng)腫脹、出血和壞死為主要特征。消化道和呼吸道病變明顯,腺胃粘膜水腫,腺胃乳頭出血、潰瘍、壞死;小腸和盲腸有大小不等的出血點,盲腸扁桃體腫大、出血和壞死;氣管出血和壞死;肺有淤血和水腫,腦膜充血和出血。
取病死肉雞的氣管等病變組織按1∶3比例加入滅菌生理鹽水研磨,12 000 r/min離心15 min,取上清液加青鏈霉素和卡那霉素(各2 000單位/mL)作用6 h后,接種10日齡SPF雞胚,0.1 mL/胚。每日照胚觀察雞胚死亡情況,24 h以內(nèi)的死胚棄去,雞胚集中死亡時間在24~72 h,收獲死亡雞胚的尿囊液,進一步做分離株病毒的相關(guān)鑒定。
測定病毒分離時采集的尿囊液對1 %雞紅細胞的凝集性:采集2只公雞的抗凝血,混合后置于15.0 mL離心管中,加滅菌生理鹽水10 mL,1 500 r/min離心10 min,棄去上層液體,再加入滅菌生理鹽水10 mL,1 500 r/min離心10 min,重復(fù)操作2次后棄去上層液體。將下層紅細胞配成1%雞紅細胞懸液。在96孔微量血凝板中一橫排加上25 μL滅菌生理鹽水,第一個孔加上25 μL分離毒尿囊液,做倍比稀釋到橫排的倒數(shù)第二孔,棄去25 μL混懸液,每孔加25 μL1 %雞紅細胞懸液,微量振蕩器震蕩混合,放室溫20 min觀察血凝結(jié)果,分離毒尿囊液的血凝價為29。
將分離毒尿囊液與等量抗新城疫病毒陽性血清作用1 h后,接種SPF雞胚10枚,24 h以內(nèi)的死胚棄去,24~120 h無雞胚死亡,觀察120 h后所有雞胚尿囊液做血凝試驗。結(jié)果顯示,中和后的SPF雞胚尿囊液血凝試驗結(jié)果均為陰性,說明分離毒可以和新城疫陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng),分離毒為新城疫病毒。
將分離毒尿囊液作106倍稀釋后,腿部肌肉注射2月齡SPF雞10只,0.1 mL/只,同時取10只SPF雞注射滅菌生理鹽水作為對照,3 d后攻毒組試驗雞開始發(fā)病,表現(xiàn)精神萎靡、食欲下降、眼半閉半睜、咳嗽、呼吸困難、張口呼吸等癥狀,至攻毒后5 d,10只雞全部死亡,剖檢死亡雞可見典型的消化道和呼吸道病理變化。對照組10只雞全部健康,無不良臨床表現(xiàn)。
根據(jù)養(yǎng)殖場發(fā)病肉雞的臨床癥狀和病理剖檢癥狀,結(jié)合實驗室的病毒分離、血凝試驗、中和試驗、動物回歸試驗結(jié)果,綜合判定該養(yǎng)殖場發(fā)生了新城疫病毒感染,對該養(yǎng)殖場采取病雞隔離飼養(yǎng),飼養(yǎng)場嚴格消毒處理,緊急接種新城疫疫苗加強免疫,疫情得到有效控制。
本研究通過對養(yǎng)殖場發(fā)病肉雞的臨床癥狀和病理剖檢癥狀觀察,結(jié)合實驗室的病毒分離,血凝試驗和中和試驗結(jié)果,綜合判定該養(yǎng)殖場發(fā)生了新城疫病毒感染。病毒分離鑒定是疾病診斷最常規(guī)和可靠的試驗方法,通過對該養(yǎng)殖場采取病雞隔離飼養(yǎng),加強禽舍保溫防寒,加強飼料營養(yǎng),飼養(yǎng)場采取嚴格消毒處理,對全群雞采取緊急接種新城疫疫苗加強免疫,疫情得到有效控制。雞舍一旦出現(xiàn)新城疫強毒感染,就很難凈化疾?。?],所以對于新城疫的綜合防控,應(yīng)采取堅持科學(xué)畜牧制度,堅持自繁自養(yǎng),堅持疫苗免疫接種,防止新城疫強毒發(fā)生。雖然疫苗接種后可能會出現(xiàn)一些雞病情加重,加快死亡,但對未感染和未發(fā)病的雞群有很好的保護,由于雞群普遍接種新城疫疫苗免疫接種,雞苗中存在新城疫的母源抗體,所以雞群首免日齡過小可能會出現(xiàn)免疫失敗,母源抗體對新城疫的免疫有很大影響,母雞接種新城疫疫苗后,可將抗體通過卵黃傳播給雛雞,一般情況下,雛雞在3日齡時抗體滴度最高,之后逐漸下降,有母源抗體的雛雞對病毒有一定抵抗力,這常常導(dǎo)致疫苗接種的干擾作用,母源抗體在7日齡消失,可以進行新城疫的首免;也可以在1日齡時使用滅活疫苗免疫,滅活疫苗受母源抗體的干擾少,或者使用滅活疫苗與活苗同時免疫,活苗對滅活疫苗有一定促進作用,在有條件做血凝試驗的雞場也可以根據(jù)HI試驗結(jié)果免疫,在HI效價為23時接種效果最好。了解雞群的免疫狀況有助于雞群免疫程序的制定和完善,為健康養(yǎng)雞保駕護航。
[1]張玲,何娜,陳智,等.雞新城疫疫苗免疫效果的影響因素分析[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2016,32(2):174.
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[4]趙秀麗.雞新城疫的流行特點及防控措施[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2015,31(7):159-160.
[5]蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001,304-310.
(編輯:張淑鳳)
S858.32
B
1006-799X(2016)13-0043-01