200032　上?！?fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院(李政)；復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院消化科(石虹)

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·綜述·

肝性腦病動(dòng)物模型的研究進(jìn)展

李政石虹

200032上海復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院(李政)；復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院消化科(石虹)

肝性腦病(hepatic encephalopathy, HE)是由肝功能不全和/或門(mén)體靜脈分流(portal systemic shunting, PSS)所引起的大腦功能障礙，其神經(jīng)或心理異常表現(xiàn)程度各異，輕者為亞臨床改變，重者可發(fā)生昏迷[1,2]。HE分為3種類(lèi)型：A型HE為與急性肝功能衰竭相關(guān)的HE；B型HE為單純門(mén)體旁路所引起；C型HE是在慢性肝病患者中發(fā)生的HE，患者通常已進(jìn)展至肝硬化，并建立了較為豐富的門(mén)體側(cè)支循環(huán)[3]?，F(xiàn)就模型建立方法、機(jī)制、優(yōu)缺點(diǎn)和行為學(xué)檢測(cè)等方面對(duì)三型HE的常用動(dòng)物模型作一綜述。

一、A型HE動(dòng)物模型

(一)非肝性動(dòng)物模型

建模方法可采用肝斷流手術(shù)或全肝臟切除術(shù)。肝斷流手術(shù)中，肝臟被完整保留，但流入肝臟的血循環(huán)被轉(zhuǎn)道(門(mén)腔靜脈吻合)和阻斷(肝動(dòng)脈結(jié)扎)；全肝臟切除術(shù)中肝臟被移除，內(nèi)臟血循環(huán)轉(zhuǎn)道[4]。機(jī)制為通過(guò)切除肝臟或擾亂肝臟的血液循環(huán)造成肝功能衰竭。肝切除模型和肝斷流模型大鼠均會(huì)出現(xiàn)星型膠質(zhì)細(xì)胞足突腫脹，肝斷流術(shù)后的大鼠腦水腫、血氨升高、顱內(nèi)壓增高、其腦動(dòng)作電位的表現(xiàn)和急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)患者的表現(xiàn)相似[4]。由于24h死亡率較高，不利于療效的觀(guān)察，從而限制了這些模型的應(yīng)用[5]。

(二)藥物誘導(dǎo)模型

1. 硫代乙酰胺(Thioacetamide, TAA)誘導(dǎo)的鼠模型：TAA誘導(dǎo)的ALF大鼠模型最早由Zimmermann等[6]建立。不同文獻(xiàn)選用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、TAA劑量和給藥時(shí)間有所不同，如Sprague Dawley(SD)大鼠連續(xù)4天300 mg/kg腹腔注射[7]，雌性C57BL/6小鼠連續(xù)2天300 mg/kg腹腔注射[8]，或小鼠連續(xù)3天100 mg/kg腹腔注射[9]等。TAA被肝臟攝取后，經(jīng)肝細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞色素P450混合功能氧化酶代謝為T(mén)AA-硫氧化物，引起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)和肝細(xì)胞損傷，并可直接作用于肝細(xì)胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成酶產(chǎn)生毒性作用，誘導(dǎo)肝代謝紊亂，致肝壞死[5]。TAA制備的HE模型具有良好的可重復(fù)性、易操作、成功率高、與人類(lèi)HE相似度高等優(yōu)點(diǎn)[10]。

2. 四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的鼠模型：將CCl4按1∶4體積比溶于礦物油，按2.5 mL/kg劑量給予BALB/c裸鼠腹腔注射[11]。CCl4經(jīng)肝微粒體細(xì)胞色素P450代謝激活, 生成活性自由基及一系列氧化活性物質(zhì), 與肝細(xì)胞質(zhì)膜或亞細(xì)胞膜脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng), 降解膜磷脂, 破壞細(xì)胞膜完整性, 使其通透性增加, 致肝細(xì)胞壞死[5]。CCl4價(jià)格低廉；但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率低(24和48 h存活率分別為40%和10%)[12]。

3. D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-GalN)誘導(dǎo)的兔子模型：該模型的建立方法為將D-GalN溶于5%濃度的右旋糖溶液，按4.25 mmol/kg的劑量予以雄性新西蘭白兔耳靜脈注射。星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷和功能受抑制是該模型HE的發(fā)生機(jī)制[13]。該模型可以重現(xiàn)星型膠質(zhì)細(xì)胞水腫[13]，但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相對(duì)較貴。

4. 脂多糖和α-鵝膏蕈堿誘導(dǎo)的獼猴模型：將1 μg/kg脂多糖和0.1 mg/kg α-鵝膏蕈堿溶于50 mL的生理鹽水之中，緩慢注射到雌性恒河猴的腹腔中。脂多糖和α-鵝膏蕈堿先引起恒河猴肝細(xì)胞脂肪變性，最后發(fā)展成肝細(xì)胞大片壞死，爆發(fā)性肝功能衰竭。恒河猴模型與人類(lèi)HE有相似的代謝和生理學(xué)特點(diǎn)[14]。但價(jià)格昂貴；迄今為止研究例數(shù)少，缺乏對(duì)比。

5. 氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)誘導(dǎo)的小鼠模型： 雄性C57Bl/6大鼠腹腔注射100 mg/kg AOM。AOM促進(jìn)趨化因子配體2(chemokine ligand 2, CCL2)上調(diào)，CCL2與肝性腦病小膠質(zhì)細(xì)胞的激活和神經(jīng)功能下降相關(guān)[15]。該模型是研究急性肝損傷和肝性腦病的理想模型，具有可逆性、可重復(fù)性、具有治療窗等；但AOM對(duì)人體有生物毒性，實(shí)驗(yàn)中還需注意對(duì)動(dòng)物的體溫控制[16]。

二、B型HE動(dòng)物模型

目前常用的建模方法是端-側(cè)門(mén)腔靜脈吻合術(shù)(porta-caval anastomosis, PCA)：結(jié)扎門(mén)靜脈近端，將門(mén)靜脈和下腔靜脈之間進(jìn)行端-側(cè)吻合[17,18]。門(mén)腔靜脈分流引起腦組織中氨和谷氨酰胺增高，改變晝夜生物節(jié)律，使運(yùn)動(dòng)功能、記憶和學(xué)習(xí)能力減退，反射下降，降低腦的葡萄糖利用率，改變多種神經(jīng)遞質(zhì)功能[5]。改良的選擇性門(mén)腔靜脈端側(cè)吻合術(shù)是將腸系膜上靜脈和下腔靜脈行端-側(cè)吻合。選擇性門(mén)腔靜脈端-側(cè)吻合術(shù)與側(cè)-側(cè)門(mén)腔靜脈吻合使流入肝臟的門(mén)靜脈血流全部終止相比，只減少了其中的50%門(mén)靜脈血流；且術(shù)中靜脈更易暴露被找到，但為了確保血管不被拉伸和卷曲所花費(fèi)的手術(shù)時(shí)間更長(zhǎng)[19]。

三、C型HE動(dòng)物模型

(一)有癥狀的C型HE模型

1. 藥物誘導(dǎo)模型：予以含TAA(初始濃度0.03%)的飲用水喂養(yǎng)Wistar大鼠12周，每周根據(jù)大鼠的體質(zhì)量適當(dāng)增減TAA的濃度[20]；或20周(濃度0.3 g/L或0.5 g/L)[21]。發(fā)病機(jī)制是通過(guò)改變?cè)谧⒁饬陀洃浟χ衅鹱饔玫哪X邊緣系統(tǒng)區(qū)的乙酰膽堿脂酶活性[20]。TAA價(jià)格低廉；但藥物誘導(dǎo)的C型HE模型建模周期較長(zhǎng)，建模過(guò)程中需注意監(jiān)控動(dòng)物體質(zhì)量，適當(dāng)增減藥物劑量。

2. 手術(shù)模型：在麻醉下結(jié)扎成年Wistar大鼠肝膽管匯合處以下和胰管開(kāi)口以上的膽總管處，再將兩結(jié)扎處之間的膽總管切除[22,23]。膽管結(jié)扎(bile duct-ligated, BDL)大鼠大腦皮質(zhì)中GABA神經(jīng)遞質(zhì)的合成改變，表現(xiàn)為自主活動(dòng)的時(shí)空特點(diǎn)和探索性活動(dòng)的改變，和短期識(shí)別記憶力的下降[22]。BDL可誘導(dǎo)可重復(fù)的膽汁性肝硬化大鼠模型，表現(xiàn)為肝功能衰竭、進(jìn)行性黃疸、門(mén)脈高壓、門(mén)體分流、細(xì)菌移位以及免疫系統(tǒng)功能障礙；該模型大鼠雖然血氨升高，但僅表現(xiàn)為低級(jí)別的HE[4]。

3. 藥物和手術(shù)結(jié)合的C型HE模型

(1)BDL并輔以銨鹽喂食的大鼠模型：給予BDL術(shù)后的SD大鼠連續(xù)兩周喂食含質(zhì)量百分比濃度為10%的乙酸銨的食物[24]。大鼠在肝病疾病和炎癥介質(zhì)激活的背景下，氨作為誘發(fā)因素，引起嚴(yán)重的行為損傷。大鼠表現(xiàn)出與肝硬化HE患者相似的神經(jīng)解剖學(xué)和神經(jīng)化學(xué)特點(diǎn)，腦水腫和炎癥激活可以在這種情況下被發(fā)現(xiàn)[25]。

(2)CCl4誘導(dǎo)肝硬化結(jié)合門(mén)靜脈結(jié)扎的大鼠模型：SD 雄性大鼠每周予以含CCl4的飲用水灌胃，初始劑量為20 μL，以后每周根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整劑量，共6周；其后實(shí)施門(mén)靜脈結(jié)扎術(shù)。大鼠有輕度的腦水腫，肝再生結(jié)節(jié)和AlzheimerⅡ型星形細(xì)胞。該模型大鼠比肝硬化模型大鼠門(mén)體分流更明顯；同時(shí)比門(mén)靜脈結(jié)扎大鼠肝功能異常更明顯。能很好地重現(xiàn)肝硬化HE患者的主要癥狀：門(mén)體分流、血氨和腦氨水平增高、輕度腦水腫。缺點(diǎn)在于死亡率較高(67%)[26]。

(二)MHE的模型

1. 藥物誘導(dǎo)模型：SD雄性大鼠予以200 mg/kg TAA隔日腹腔注射，共兩次，MHE發(fā)生率為83.3%[27]；或雄性albino 大鼠予以50 mg/kg TAA腹腔注射，每周兩次，共14 d[28]；或SD大鼠予以200 mg/kg TAA腹腔注射，每周兩次，連續(xù)8周[29]。谷氨酸鹽-一氧化氮-環(huán)鳥(niǎo)酸苷通路中多巴胺受抑制導(dǎo)致MHE大鼠的記憶受損為其發(fā)病機(jī)制[29]。需通過(guò)腦誘發(fā)電位檢查是否建模成功[27]。

2. 手術(shù)模型：采用門(mén)靜脈校準(zhǔn)狹窄術(shù)：雄性Wistar Kyoto大鼠在乙醚麻醉下，予以20號(hào)鈍針頭在門(mén)靜脈旁引導(dǎo)，用3號(hào)絲線(xiàn)結(jié)扎門(mén)靜脈；隨后移除針頭得到一個(gè)校準(zhǔn)狹窄的門(mén)靜脈；通過(guò)門(mén)靜脈校準(zhǔn)狹窄術(shù)大約能減少門(mén)靜脈66%的容積。術(shù)后10 d發(fā)生門(mén)靜脈高壓和高血氨癥，不伴有其他明顯的中樞神經(jīng)系統(tǒng)改變，其分子學(xué)機(jī)制可能與海馬線(xiàn)粒體功能障礙和細(xì)胞凋亡有關(guān)[30]。該模型可以重現(xiàn)MHE高血氨的癥狀，但需精準(zhǔn)地控制門(mén)靜脈的狹窄度，對(duì)于實(shí)驗(yàn)者的手術(shù)技術(shù)要求較高。

四、HE模型行為學(xué)檢測(cè)方法

(一)強(qiáng)制游泳試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)前1天，大鼠在室溫下，被放置在直徑24 cm，高50 cm的圓柱桶內(nèi)，注入30 cm深的水，讓大鼠在其中活動(dòng)10 min，將大鼠從桶中取出，在干凈的籠中干燥后放回飼養(yǎng)籠。24 h后，大鼠被再次放置在圓柱筒內(nèi)，用攝像機(jī)監(jiān)測(cè)大鼠5 min的行為，并計(jì)算大鼠不運(yùn)動(dòng)、游泳或試圖爬出圓筒這三項(xiàng)活動(dòng)每項(xiàng)所用的時(shí)間[21]。

(二)新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)第一天，大鼠被放置在直徑80 cm的圓形場(chǎng)地5 min以適應(yīng)環(huán)境。第二天，在同一場(chǎng)地里放置兩個(gè)相同的物品，讓大鼠自由探索2 min。第三天，將其中一個(gè)物品替換成不一樣的物品，讓大鼠自由探索2 min，記錄其探索兩個(gè)物品的時(shí)間，并計(jì)算探索新物品的時(shí)間與探索兩個(gè)物品時(shí)間的比值，比值下降表示其記憶能力受損[21]。

(三)空間參考記憶的Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)在圓形的水箱中進(jìn)行。大鼠會(huì)經(jīng)過(guò)連續(xù)四天的訓(xùn)練，將它們依次放入水中，給予其120 s時(shí)間尋找平臺(tái)，并在平臺(tái)上停留20 s。第五天，將平臺(tái)移開(kāi)，每只大鼠進(jìn)行四次實(shí)驗(yàn)，每次有90 s的時(shí)間游泳，在原先平臺(tái)處停留的平均時(shí)間記錄為記憶再現(xiàn)指數(shù)[28]。

(四)旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)每只大鼠將進(jìn)行每天5輪連續(xù)5 d的旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)。大鼠被放置在一個(gè)轉(zhuǎn)棒裝置上，轉(zhuǎn)棒的速度從第一天到第五天分別為5、10、15、20和25 rpm。每輪實(shí)驗(yàn)會(huì)進(jìn)行三次，每次間隔10 min，記錄三次實(shí)驗(yàn)中大鼠在轉(zhuǎn)輪上停留的最長(zhǎng)時(shí)間[28]。

(五)步態(tài)實(shí)驗(yàn)大鼠的后爪被涂上墨水，在60 cm×10 cm紙帶上從光亮處走向黑暗處，測(cè)量并記錄左右爪之間的距離[28]。

(六)穿梭箱回避實(shí)驗(yàn)大鼠被放置在一個(gè)雙向的穿梭箱中，內(nèi)有設(shè)備可以產(chǎn)生非條件刺激(unconditioned stimulus, US)和條件刺激(conditioned stimulus, CS,電擊后亮燈)。每只大鼠在連續(xù)五天中接受五輪測(cè)試，每輪測(cè)試前，給大鼠5 min適應(yīng)暗室，隨后進(jìn)行30次試驗(yàn)，每?jī)纱伍g隔(30±5) s。CS中每次電擊前有20 s電燈點(diǎn)亮?xí)r間。US中，相當(dāng)于CS的最后10 s時(shí)會(huì)以0.5 mA電流電擊大鼠10 s或至大鼠移動(dòng)到箱子的另一側(cè)即停止。如果大鼠在CS中受到電擊前即移動(dòng)到箱子另一側(cè)，則此次記錄為回避；如果大鼠受到刺激后做出反應(yīng)，則記錄為逃脫；如果大鼠在刺激中不移至另一側(cè)，則記錄為無(wú)反應(yīng)。分別記錄大鼠回避、逃脫和無(wú)反應(yīng)的次數(shù)[28]。

(七)高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)高架十字迷宮組件由兩條相對(duì)開(kāi)放臂(50 cm長(zhǎng)×10 cm寬)和兩條相對(duì)閉合臂(50 cm長(zhǎng)×10 cm寬×40 cm高)組成。裝置距離地面50 cm高，放置在紅光照明的房間正中。大鼠被放在裝備的中央，面向開(kāi)放臂，自由探索5 min。分別記錄大鼠進(jìn)入封閉臂的次數(shù)與進(jìn)入兩組臂總次數(shù)的比值、于封閉臂處滯留時(shí)間與在兩組臂處滯留總時(shí)間的比值[31]。

(八)動(dòng)物表現(xiàn)的臨床分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)正常行為(0分)，輕度嗜睡(1分)，運(yùn)動(dòng)減少、姿勢(shì)控制困難和疼痛知覺(jué)減弱(2分)，嚴(yán)重的共濟(jì)失調(diào)、無(wú)自發(fā)翻正反射(3分)，無(wú)翻正反射、對(duì)疼痛刺激無(wú)反應(yīng)(4分)[7]。

五、結(jié)語(yǔ)

A型HE模型的建立期望達(dá)到如下標(biāo)準(zhǔn)：可復(fù)制性，并易于觀(guān)察分期；癥狀的進(jìn)展包括腦水腫及其并發(fā)癥(顱內(nèi)高壓及腦疝)；潛在的可逆轉(zhuǎn)性；高血氨/腦氨、谷氨酰胺增加；肝臟、腦組織的病理變化具有特征性；對(duì)實(shí)驗(yàn)人員具有最小的毒性。B和C型HE大鼠模型期望達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)為：門(mén)體分流或慢性肝病伴門(mén)體分流；腦病的癥狀從輕微型HE到昏迷；腦病昏迷階段AlzheimerⅡ型星形細(xì)胞增生；血氨、腦氨和谷氨酰胺濃度升高；存在誘發(fā)因素；對(duì)治療手段有可觀(guān)察的臨床反應(yīng)[4]。根據(jù)研究目的合理選擇并進(jìn)一步完善合適且穩(wěn)定的HE動(dòng)物模型對(duì)于進(jìn)一步闡明HE的發(fā)病機(jī)制和尋求新的治療方法十分重要。

參考文獻(xiàn)

1 Vilstrup H, Amodio P, Bajaj J, et al. Hepatic encephalopathy in chronic liver disease: 2014 Practice Guideline by the American Association for the Study of Liver Diseases and the European Association for the Study of the Liver. Hepatology, 2014, 60:715-735.

2 American Association for the Study of Liver Diseases, European Association for the Study of the Liver. Hepatic encephalopathy in chronic liver disease: 2014 practice guideline by the European Association for the Study of the Liver and the American Association for the Study of Liver Diseases. J Hepatol, 2014, 61:642-659.

3 Ferenci P, Lockwood A, Mullen K, et al. Hepatic encephalopathy-definition, nomenclature, diagnosis, and quantification: final report of the working party at the 11th World Congresses of Gastroenterology, Vienna, 1998. Hepatology, 2002, 35: 716-721.

4 Butterworth RF, Norenberg MD, Felipo V, et al. Experimental models of hepatic encephalopathy: ISHEN guidelines. Liver Int, 2009, 29: 783-788.

5 段志軍，張春樂(lè). 大鼠肝性腦病模型的研究進(jìn)展. 世界華人消化雜志, 2010, 18: 3204-3209.

6 Zimmermann C, Ferenci P, Pifl C, et al. Hepatic encephalopathy in thioacetamide-induced acute liver failure in rats: characterization of an improved model and study of amino acid-ergic neurotransmission. Hepatology, 1989, 9: 594-601.

7 Farjam M, Dehdab P, Abbassnia F, et al. Thioacetamide-induced acute hepatic encephalopathy in rat: behavioral, biochemical and histological changes. Iran Red Crescent Med J, 2012, 14:164-170.

8 Gomides LF, Marques PE, Faleiros BE, et al. Murine model to study brain, behavior and immunity during hepatic encephalopathy. World J Hepatol, 2014, 6: 243-250.

9 Rama Rao KV, Verkman AS, Curtis KM, et al. Aquaporin-4 deletion in mice reduces encephalopathy and brain edema in experimental acute liver failure. Neurobiol Dis, 2014, 63:222-228.

10逄菲，胡瑾華. 肝性腦病的動(dòng)物模型及分子生物學(xué)機(jī)制研究進(jìn)展. 國(guó)際消化病雜志，2014, 34: 84-86.

11Chang HM, Liao YW, Chiang CH, et al. Improvement of carbon tetrachloride-induced acute hepatic failure by transplantation of induced pluripotent stem cells without reprogramming factor c-Myc. Int J Mol Sci, 2012, 13: 3598-3617.

12劉赴平，師玲玲. 四氯化碳造成急性肝損傷大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)輸血雜志, 2012, 25: 446-448.

13Traber PG, Dal Canto M, Ganger DR, et al. Electron microscopic evaluation of brain edema in rabbits with galactosamine-induced fulminant hepatic failure: ultrastructure and integrity of the blood-brain barrier. Hepatology, 1987, 7: 1272-1277.

14Zhou P, Xia J, Guo G, et al. A Macaca mulatta model of fulminant hepatic failure. World J Gastroenterol, 2012, 18: 435-444.

15McMillin M, Frampton G, Thompson M, et al. Neuronal CCL2 is upregulated during hepatic encephalopathy and contributes to microglia activation and neurological decline. J Neuroinflammation, 2014, 11:121.

16Baine AM, Hori T, Chen F, et al. Fulminant liver failure models with subsequent encephalopathy in the mouse. Hepatobiliary Pancreat Dis Int, 2011,10:611-619.

17Shaik IH, Miah MK, Bickel U, et al. Effects of short-term portacaval anastomosis on the peripheral and brain disposition of the blood-brain barrier permeability marker sodium fluorescein in rats. Brain Res, 2013, 1531:84-93.

18Yang X, Bosoi CR, Jiang W, et al. Portacaval anastomosis-induced hyperammonemia does not lead to oxidative stress. Metab Brain Dis, 2010, 25:11-15.

19Klarik Z, Toth E, Kiss F, et al. A modified microsurgical model for end-to-side selective portacaval shunt in the rat. Intraoperative microcirculatory investigations. Acta Cir Bras, 2013, 28:625-631.

20Méndez M, Méndez-López M, López L, et al. Acetylcholinesterase activity in an experimental rat model of Type C hepatic encephalopathy. Acta Histochem, 2011, 113: 358-362.

21Kawai H, Ishibashi T, Kudo N, et al. Behavioral and biochemical characterization of rats treated chronically with thioacetamide: proposal of an animal model for hepatic encephalopathy associated with cirrhosis. J Toxicol Sci, 2012, 37:1165-1175.

22Leke R, Oliveira DL, Forgiarini LF, et al. Impairment of short term memory in rats with hepatic encephalopathy due to bile duct ligation. Metab Brain Dis, 2012, 28: 187-192.

23Leke R, Silveira TR, Escobar TD, et al. Expression of Glutamate Decarboxylase (GAD) mRNA in the brain of bile duct ligated rats serving as a model of hepatic encephalopathy. Neurochem Res, 2014, 39: 605-611.

24Chen JR, Wang BN, Tseng GF, et al. Morphological changes of cortical pyramidal neurons in hepatic encephalopathy. BMC Neurosci, 2014, 15:15.

25Jover R, Rodrigo R, Felipo V, et al. Brain edema and inflammatory activation in bile duct ligated rats with diet-induced hyperammonemia: A model of hepatic encephalopathy in cirrhosis. Hepatology, 2006, 43:1257-1266.

26Miquel M, Bartoli R, Odena G, et al. Rat CCl(4)-induced cirrhosis plus total portal vein ligation: a new model for the study of hyperammonaemia and brain oedema. Liver Int, 2010, 30:979-987.

27賈林，張美華，蘇常青，等. 硫代乙酰氨致大鼠輕微型肝性腦病模型的建立. 世界華人消化雜志, 2004, 12:1207-1208.

28Singh S, Trigun SK. Low grade cirrhosis induces cognitive impairment and motor dysfunction in rats: could be a model for minimal hepatic encephalopathy. Neurosci Lett, 2014, 559:136-140.

29Ding S, Huang W, Ye Y, et al. Elevated intracranial dopamine impairs the glutamate-nitric oxide-cyclic guanosine monophosphate pathway in cortical astrocytes in rats with minimal hepatic encephalopathy. Mol Med Rep, 2014, 10: 1215-1224.

30Bustamante J, Lores-Arnaiz S, Tallis S, et al. Mitochondrial dysfunction as a mediator of hippocampal apoptosis in a model of hepatic encephalopathy. Mol Cell Biochem, 2011, 354:231-240.

31Leke R, de Oliveira DL, Mussulini BH, et al. Impairment of the organization of locomotor and exploratory behaviors in bile duct-ligated rats. PLoS One, 2012, 7:e36322.

(本文編輯：張苗)

(收稿日期：2015-08-31)

通信作者：石虹，Email: shi.hong@zs-hospital.sh.cn

基金項(xiàng)目：國(guó)家基礎(chǔ)科學(xué)人才培養(yǎng)基金項(xiàng)目J1210041 (批準(zhǔn)號(hào)：NSFC grant J1210041)