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        山茱萸資源及活性成分研究進(jìn)展

        2016-03-09 11:11:26相聰坤
        河北醫(yī)藥 2016年12期
        關(guān)鍵詞:山茱萸化學(xué)成分研究進(jìn)展

        相聰坤

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        ·綜述與講座·

        山茱萸資源及活性成分研究進(jìn)展

        相聰坤

        050017石家莊市,河北省中醫(yī)院藥學(xué)部

        【摘要】山茱萸為我國(guó)傳統(tǒng)珍稀藥材和臨床常用名貴中藥,近年來,其在臨床上的應(yīng)用越來越廣,藥材種植基地也越來越多,市場(chǎng)所售山茱萸的質(zhì)量良莠不齊。因此,加強(qiáng)對(duì)山茱萸的藥材質(zhì)量管理,并對(duì)質(zhì)量控制做出研究,就顯得越來越重要。近年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)山茱萸進(jìn)行了多方面的大量研究,并取得了很大的進(jìn)展。本文綜述近三十年來山茱萸的資源分布、化學(xué)成分研究、以及山茱萸的主要藥理活性,為合理綜合開發(fā)利用山茱萸野生及人工栽培資源提供依據(jù)。

        【關(guān)鍵詞】山茱萸;資源分布;化學(xué)成分;研究進(jìn)展

        山茱萸(Fructus corni)為山茱萸科(Cornaceae)植物山茱萸Cornus officinalis Sieb. etZucc.成熟且干燥的果肉,有野生及人工栽培品種。山茱萸始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》,為我國(guó)傳統(tǒng)珍稀藥材和臨床常用名貴中藥,歸肝、腎經(jīng),其味酸、澀、微溫,具有補(bǔ)腎、澀精、固脫之功效?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為山茱萸具有抗癌、抗菌、抗炎、抗氧化、抗病毒、保肝、降脂等生物學(xué)活性。本文綜述山茱萸的資源分布及其化學(xué)成分,以其為山茱萸的進(jìn)一步合理應(yīng)用提供借鑒。

        1資源分布

        1.1世界地理分布山茱萸資源多分布在北亞熱帶和北溫帶之間的暖溫帶地區(qū)的深山區(qū),畏嚴(yán)寒。山茱萸喜疏松濕潤(rùn)肥沃的土壤,生長(zhǎng)適宜溫度10~25℃。在類別方面它總共有14屬約100種,而我國(guó)境內(nèi)有6屬約50種。山茱萸屬(Maerocarpium)有4種分布于歐洲中南部、東亞與北美,我國(guó)有2種。據(jù)日本學(xué)者報(bào)道山茱萸主產(chǎn)中國(guó)、英、美、日本、南朝鮮等國(guó)。山茱萸在我國(guó)分布于長(zhǎng)江南北海拔600~1 400 m的山區(qū),如河南的伏牛山、浙江的天目山、山西的中條山和陜西的秦嶺,其水平分布范圍在北緯30°~40°、東經(jīng)100°~140°,垂直分布范圍在海拔250~1 300 m,但其生長(zhǎng)在海拔高度為600~900 m時(shí),生長(zhǎng)發(fā)育情況最佳。目前國(guó)內(nèi)山茱萸主要產(chǎn)區(qū)是:河南的南陽(yáng)、浙江的杭州,從兩地山茱萸的地理分布和樹齡考察及群落結(jié)構(gòu)的情況分析,豫、浙山茱萸資源歷史悠久,是古代發(fā)掘較晚,而近代發(fā)展較快的集中地區(qū)。近年國(guó)內(nèi)山茱萸種植發(fā)展速度較快,在十五個(gè)省市均卓有成效,全國(guó)種植面積約達(dá)32.7萬(wàn)畝,3 300萬(wàn)株,1983年全國(guó)產(chǎn)量已突破150萬(wàn)kg。

        1.2植被分布山茱萸群落為人工植被,見于溝谷兩側(cè)或耕地四周,河南省西峽老界嶺自然保護(hù)區(qū)山茱萸群落喬木層郁閉度(0.3~0.7,建群種一般高度3~4 m,最高6~8 m,一般胸徑8~11 cm,最大28~31 cm,冠幅平均2 m×2 m,枝下高1 m,伴生植物有胡桃(Juglansregia),柿樹、板栗(Castan rnollissima),茅栗(C.saguinii,栓皮棟、柳樹(Salix spP.),小葉楊(populussimonii)等。灌木層稀疏,常見植物有木香蕾咬Elsholt云astaunt,繡線菊(Spiraea spp.)。華北珍珠梅(Sorbaria kirilowii),山植、連翹、胡枝子(Lespede zabicofor)和美麗胡枝子(Lespedeza formosa)等。草本層蓋度30%~60%,常見植物有莎草、藎草 (Arthraxon hispidus),羊胡子草(Carex rigescens),鴨環(huán)草、黃花龍牙(Patrinia scabiosaefolia),翻白草(Poterntilla discolor)和絹毛細(xì)蔓委陵菜(P. reptans var.sericophylla)等。

        1.3我國(guó)范圍內(nèi)分布我國(guó)范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)山西省陽(yáng)城縣的環(huán)境最適合山茱萸生長(zhǎng)。因該縣位于山西省東南端,地處太岳山脈東支,中條山東北部;在太行山西面,沁河中游西岸;晉城市西南部,北與沁水縣為鄰,南與河南省濟(jì)源市相連,東與晉城市郊區(qū)為界,西南與垣曲縣接壤;地理坐標(biāo)為東經(jīng)112°01′02″~112°37′28″,北緯35°12′30″~35°41′12″。

        被稱為全國(guó)四大山茱萸產(chǎn)區(qū)的地區(qū)分別是:山西省陽(yáng)城縣、陜西、河南、浙江。經(jīng)長(zhǎng)期栽培馴化后,山茱萸的生長(zhǎng)環(huán)境范圍有相當(dāng)大突破。目前,山茱萸生長(zhǎng)地位于海拔高度在1 060 m以下時(shí),不同坡向的地理?xiàng)l件下幾乎都能生長(zhǎng)。在環(huán)境溫度方面,山茱萸植株可以忍耐高達(dá)41.9℃的溫度,同時(shí)能抵抗-20.1℃的短期低溫而不會(huì)受傷害。山西省的陽(yáng)城縣蟒河村中,上溯到清朝的康熙年間就有了記載栽培山茱萸的歷史,距今已經(jīng)有三百余年。近年,由于山茱萸的經(jīng)濟(jì)價(jià)值持續(xù)升高,我國(guó)四川、山東、湖北、河北、甘肅等十多個(gè)省,達(dá)八十多個(gè)縣區(qū)內(nèi),都引種并培育了山茱萸。就山西一個(gè)省而言,僅主產(chǎn)地陽(yáng)城一個(gè)縣內(nèi),近幾年就發(fā)展了兩千多公頃的種植面積,遍及全縣內(nèi)的18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn),共計(jì)三百多萬(wàn)株,全縣年產(chǎn)山茱萸鮮果約400噸。陽(yáng)城縣的桑林鄉(xiāng)蟒河村,以盛產(chǎn)山茱萸而遠(yuǎn)近聞名:該村所產(chǎn)山茱萸果實(shí)不僅色澤鮮紅,且個(gè)大肉厚,乃山茱萸中之上品;蟒河村種植山茱萸樹約5萬(wàn)株,年產(chǎn)鮮果量能達(dá)280噸;全山西省在陽(yáng)城縣引種栽培的有二十多個(gè)地縣[1,2]。

        1.4遺傳學(xué)分析關(guān)錳等[3]利用形態(tài)特征和ISSR標(biāo)記對(duì)35份山茱萸種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析,利用NTSYSpc-2.11F軟件分析遺傳相似系數(shù),UPGMA 方法聚類,構(gòu)建親緣關(guān)系系統(tǒng)圖。結(jié)果表明:35份山茱萸在9個(gè)性狀上差異明顯;分子標(biāo)記中9條引物共得到條擴(kuò)增條帶179條,其中有164條呈現(xiàn)多態(tài)性,占91.6%,遺傳相似系數(shù)變化范圍0.575~0.877。對(duì)其進(jìn)行數(shù)據(jù)化處理后聚類,35份山茱萸材料可劃分為2個(gè)類群6小組,材料的聚類結(jié)果與地理分布、形態(tài)特征有一定的相關(guān)性。

        2化學(xué)成分研究

        山茱萸的化學(xué)成分的研究始于20世紀(jì)30年代,曾發(fā)現(xiàn)山茱萸的果實(shí)中,含有維生素A類物質(zhì),該物質(zhì)含量為0.0075%。后續(xù)的相關(guān)化學(xué)研究表明,山茱萸果肉中主要含有多糖、有機(jī)酸、黃酮、蒽醌、皂苷、甾醇、內(nèi)酯、香豆素、揮發(fā)油、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、脂肪油和微量元素等[4-6]。山茱萸的果肉以及果核中,均含有十幾種氨基酸,此外還富含維生素B2、維生素C等二十余種微量元素和礦物質(zhì)。山茱萸果核中另外還富含如下營(yíng)養(yǎng)素: 20.33%糖、4.61%蛋白質(zhì)、8.56%脂肪、2.23%灰分及51.62%粗纖維,還有21種礦物質(zhì)和微量元素,其中果核內(nèi)磷的含量比果肉還要高[7]。

        2.1果肉中的化學(xué)成分[7,8]

        2.1.1有機(jī)酸及其相應(yīng)有機(jī)酯類:主要含有蘋果酸、酒石酸及沒食子酸。

        2.1.2五環(huán)三萜酸及其對(duì)應(yīng)酯類:主要包含熊果酸、α-羥基熊果酸、齊墩果酸等。

        2.1.3環(huán)烯醚萜類:主要含有馬鞭草苷(verbenalin,即山茱萸苷cornin)、莫諾苷(morroniside)、馬錢子苷(loganin)、獐牙菜苷(sweroside)、7-氧-甲基莫諾苷(7-O-methyl-morroniside,可能為蘋果酸與莫諾苷在提取過程中因加熱生成的人工產(chǎn)物)、脫水莫諾苷元( dehydromorroni-aglycone)、7-脫氫馬錢苷(7-dehy-drologanin)、山茱萸新苷(cornuside,此苷為雙環(huán)的環(huán)烯醚萜苷類化合物,馬錢苷和莫諾苷的兩部分通過醚鍵互相連接)等,從酒制萸肉中分得7-乙氧基莫諾苷(考慮該苷可能是由于乙醇提取過程中或乙醇炮制過程中所產(chǎn)生的次生產(chǎn)物)。

        2.1.4鞣質(zhì)類:主要為特里馬里Ⅰ(tellmagrandinⅠ)、異訶子素(isoterehe-bin)、特里馬里Ⅱ(tellmagrandinⅡ)、水楊梅素D(gemin D)、1,2,6-三-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、2,3-二-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,6-四-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、木來木鞣質(zhì)A(Cornusiin A)、木來木鞣質(zhì)B(cornusiin B)、木來木鞣質(zhì)C(cornusiin C)、木來木鞣質(zhì)D(cornusiin D)、木來木鞣質(zhì)E(cornusiin E)、木來木鞣質(zhì)F(cornusiin F)、木來木鞣質(zhì)G(cornusiin G)、喜樹鞣質(zhì)A(camptothin A)和喜樹鞣質(zhì)B(camptothin B),尚發(fā)現(xiàn)一沒食子酰鹽單萜酰葡萄糖苷(cornu-side)。

        2.1.5其他類成分:主要為β-谷甾醇、5,5’-二甲基糠醛醚(5,5’-di-α-furaldehyde dimethylether)、5-羥甲基糠醛(5-hydroxy-metylfurfural)等。

        2.2山茱萸種子所含化學(xué)成分山茱萸種子除了含大量的鞣質(zhì)(15%~16%)和油脂(7%~8%)外,還含有酚類和有機(jī)酸類。同時(shí),從果核中分離并提純獲得的單體成分包括:蘋果酸、熊果酸、白樺脂酸(be-tulic acid)、沒食子酸、β-谷甾醇、沒食子酸甲酯。種子中的油脂主含的脂肪酸有:油酸、亞油酸、月桂酸、棕櫚酸、硬脂酸、亞麻酸等。新近,發(fā)現(xiàn)了抗氧化的活性成分megallate。

        2.3山茱萸葉中的化學(xué)成分山茱萸葉中所含主要鞣質(zhì)類成分為1,7-二-氧-沒食子酰-D-景天庚酮糖、2,3-二-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、3,4,6-三-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、1,2-二-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,6-三-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,6-四-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,4,6-四-氧-沒食子酰-β-D-葡萄糖、3-氧-沒食子酰-4,6(S)-六羥基聯(lián)苯二甲酰-D-葡萄糖、1-氧-沒食子酰-4,6(S)-六羥基聯(lián)苯二甲酰-α-D-葡萄糖、1-氧-沒食子酰-4,6(S)-六羥基聯(lián)苯二甲酰-β-D-葡萄糖、馬桑素F(conarin F)。

        3主要藥理活性及活性成分

        3.1山茱萸總萜與降血糖韓璟超等[9]的研究報(bào)道,組別設(shè)定分別為正常小鼠、四氧嘧啶糖尿病模型小鼠和鏈脲佐菌素糖尿病模型大鼠,研究主要目的為山茱萸總萜的降血糖作用。該課題結(jié)果顯示:未發(fā)現(xiàn)山茱萸總萜對(duì)于正常小鼠的血糖水平有明顯影響;藥物劑量為100 mg/kg時(shí),對(duì)正常小鼠的糖耐量有所提高;實(shí)驗(yàn)中,所選3個(gè)藥物劑量均對(duì)四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖值有顯著降低效果(P<0.05),并且對(duì)血清胰島素水平有所提高(P<0.05);并對(duì)鏈脲佐菌素糖尿病模型大鼠的血糖值有顯著地降低效果,同時(shí)增加該類大鼠的肝糖原含量;60 mg/kg、30 mg/kg可以顯著降低糖化血清蛋白GSP的含量。

        3.2野生與人工栽培山茱萸的強(qiáng)心、抗心率失常作用王永輝等[10]通過觀察野生和人工栽培的山茱萸在強(qiáng)心、抗心率失常方面的作用并進(jìn)行比較,結(jié)果顯示:野生和人工栽培的山茱萸,對(duì)提高在體心臟心肌收縮力的增加值分別為(3.960±0.582)g和(3.915±0.228)g;注射氯化鈣注射液后,實(shí)驗(yàn)大鼠的病死率分別為10%和20%。說明野生和人工栽培的山茱萸在強(qiáng)心及抗心律失常方面的作用相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。為臨床合理選藥提供了重要依據(jù)。

        3.3多糖與提高免疫功能杜偉鋒等[11]研究山茱萸的生品和制品中,所含多糖對(duì)免疫低下的小鼠免疫功能產(chǎn)生的影響。結(jié)果顯示:山茱萸生品和制品中所含多糖,均可提高免疫低下的小鼠的碳粒廓清指數(shù)K,增加血清HC50值, 提高吞噬指數(shù)α,且明顯改善免疫力低下小鼠的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。研究進(jìn)一步表明:制品多糖的作用,顯著優(yōu)于生品多糖。該項(xiàng)研究,為闡明山茱萸炮制后增效的機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。

        3.4炮制山茱萸與肝保護(hù)作用李俊松等[12]探討了山茱萸炮制前后對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用,結(jié)果表明:山茱萸炮制后中劑量組血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性及肝臟丙二醛(MDA)含量明顯降低,肝臟超氧化物歧化酶(SOD)水平則明顯升高,且與同一劑量生品組比較有顯著性差異。

        3.5山茱萸環(huán)烯醚萜總苷的降糖降脂效果劉洪等[13]觀察了山茱萸環(huán)烯醚萜總苷對(duì)2型糖尿病心臟病變大鼠胰島素抵抗及血脂含量的影響。結(jié)果表明:模型組大鼠體重、血糖、Ins-Ab、IR、CHOL、TG、LDL-C明顯升高(P<0.05),Ins水平顯著降低(P<0.05);光鏡檢查結(jié)果顯示:大鼠心內(nèi)膜或心包膜有輕度炎癥及纖維化,大鼠心肌肥大伴程度不等的間質(zhì)水腫和組織細(xì)胞增生,環(huán)烯醚萜總苷及AG組大鼠的體重、血糖、IR、Ins-Ab、CHOL、TG、LDL-C均明顯降低(P<0.05),心肌肥大程度減輕。

        3.6環(huán)烯醚萜總苷的抗凝血功能張麗等[14]探討了山茱萸中所含環(huán)烯醚萜苷類成分對(duì)血栓形成及凝血功能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各劑量組均能顯著抑制動(dòng)-靜脈旁路實(shí)驗(yàn)大鼠的血栓形成,均能減輕血栓的干重和濕重(P<0.05),并縮短大鼠體外血栓實(shí)驗(yàn)中血栓的長(zhǎng)度(P<0.05),同時(shí)減輕該血栓的干重和濕重(P<0.05)。在延長(zhǎng)TT方面,中、大劑量組和生理鹽水組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);在延長(zhǎng)PT方面,生理鹽水組大鼠與大劑量組大鼠比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);延長(zhǎng)APTT方面,各劑量組與生理鹽水組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

        4山茱萸資源化學(xué)研究概況

        4.1馬錢苷含量不同產(chǎn)地山茱萸果實(shí)中馬錢苷含量在4.08%~26.17%,其中以西北大學(xué)果園的樣品含量最高;不同生長(zhǎng)期中,以11月中旬采集的馬錢苷含量最高。提示不同生長(zhǎng)期和不同產(chǎn)地山茱萸馬錢苷含量差異較大,其中山茱萸最佳采收時(shí)間為每年11月中旬果實(shí)脫落之前[15]。

        4.2水煎煮與甲醇超聲提取法杜偉鋒等[16]分別用水煎煮和甲醇超聲兩種方法提取山茱萸生、制品, 用RP-HPLC法測(cè)定4種成分并進(jìn)行比較。結(jié)果表明:甲醇超聲提取液中,5-羥甲基糠醛、沒食子酸的含量,分別上升了1 200%、250%,馬錢素、莫諾苷的含量分別下降了919%、2 717%。水煎提取液中, 5-羥甲基糠醛、沒食子酸含量,分別上升了250%、222%,同時(shí)馬錢素、莫諾苷的含量分別下降了1 117%、2 415%。

        4.3道地山茱萸成分分析喻衛(wèi)武等[17]探索了傳統(tǒng)道地產(chǎn)區(qū)的山茱萸果實(shí)成分問題,主要研究有效成分間、有效成分變異、有效成分與外在形狀和營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)之間的關(guān)系。為選擇盡可能多地含有有效成分的山茱萸良種提供了有價(jià)值的理論依據(jù)。該研究結(jié)果顯示:(1)道地產(chǎn)區(qū)內(nèi)熊果酸、齊墩果酸、馬錢素變異幅度分別為0.1010%~0.4786%,0.0149%~0.1274%, 0.59%~2.30%,RSD分別為34.33%, 40.48%, 28.50%;(2)有效成分方面,有效成分與外形、營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的關(guān)系為:熊果酸、齊墩果酸的相關(guān)極顯著,相關(guān)系數(shù)為0.19796;熊果酸、齊墩果酸與可溶性固形物呈極顯著負(fù)相關(guān):相關(guān)系數(shù)分別為-0.5544,-0.5118;馬錢素與可溶性固形物呈顯著相關(guān):相關(guān)系數(shù)為 0.2412;熊果酸、齊墩果酸、馬錢素與出皮率呈顯著負(fù)相關(guān):相關(guān)系數(shù)分別為-0.2507,-0.2443,-0.2406;這3種有效成分與縱徑/橫徑的相關(guān)性不明顯。

        5山茱萸藥材質(zhì)量控制

        山茱萸作為我國(guó)臨床常用名貴中藥,其應(yīng)用越來越廣,藥材種植基地也越來越多。種植基地主要分布于我國(guó)的山西、浙江、河南、陜西等省,另外安徽、四川、山東亦有分布。隨著近些年來我國(guó)農(nóng)村種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整,藥材山茱萸的栽培面積正在逐漸擴(kuò)大,不同的生長(zhǎng)環(huán)境及栽培方法上的差別,直接導(dǎo)致了市場(chǎng)所售山茱萸的質(zhì)量良莠不齊。因此,加強(qiáng)對(duì)山茱萸本身的藥材質(zhì)量控制做出研究,就顯得越來越重要。

        多年來山茱萸質(zhì)量控制是以熊果酸為指標(biāo),但熊果酸在植物界為廣布成分,做為山茱萸的指標(biāo)成分尚存在爭(zhēng)議。近年來隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和認(rèn)識(shí)的深刻,通過多指標(biāo)成分進(jìn)行質(zhì)量控制已成為發(fā)展趨勢(shì)和必然需求:如同時(shí)測(cè)定山茱萸不同栽培品種中的水溶性浸出物、醇溶性浸出物的量、熊果酸含量、馬錢苷含量、總多糖、總鞣質(zhì)含量等。建立山茱萸藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的灰色模式識(shí)別法[18-22],必將得到良好應(yīng)用:對(duì)山茱萸的不同產(chǎn)地、不同栽培品種,進(jìn)行客觀綜合評(píng)價(jià)。既能符合中藥藥材成分多成份、多靶點(diǎn)的綜合作用機(jī)制,又具有較強(qiáng)的科學(xué)性和實(shí)踐性。

        另一方面,山茱萸傳統(tǒng)用藥部位為其果肉,而近年來已發(fā)現(xiàn)其果核、葉片中也含有不同程度的有效物質(zhì),越來越受到關(guān)注。因此,合理綜合開發(fā)利用山茱萸野生及人工栽培資源也成為許多學(xué)者關(guān)注的科學(xué)問題之一。

        參考文獻(xiàn)

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        doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.12.038

        【中圖分類號(hào)】R 917

        【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

        【文章編號(hào)】1002-7386(2016)12-1886-04

        (收稿日期:2016-03-02)

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