蘇明蘭 羅志明

水通道蛋白在子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)及子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷徙中的作用

蘇明蘭 羅志明

目的探討水通道蛋白(AQP)在子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)及子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷徙中的作用。方法分析70例子宮內(nèi)膜異位癥患者臨床資料,異位子宮內(nèi)膜作為實(shí)驗(yàn)組和在位內(nèi)膜作為對(duì)照組,RNA干擾后腺細(xì)胞作為干擾實(shí)驗(yàn)組和siRNA陰性對(duì)照作為陰性對(duì)照組。觀察AQP2、5、8表達(dá)及腺細(xì)胞RNA干擾后細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)情況。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)率均低于對(duì)照組(P＜0.05)；干擾實(shí)驗(yàn)組腺細(xì)胞RNA干擾后48、72、96 h細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)均低于陰性對(duì)照組(P＜0.05)。結(jié)論AQP2、5、8蛋白過(guò)表達(dá)和子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程、子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞遷徙過(guò)程均有密切的關(guān)系。

水通道蛋白；子宮內(nèi)膜異位癥；表達(dá)；子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷徙

子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生是逐步發(fā)展的過(guò)程,有效預(yù)防子宮內(nèi)膜異位癥復(fù)發(fā)已成為臨床研究的熱點(diǎn)問(wèn)題,而子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生與子宮異位內(nèi)膜種植有著密切的關(guān)系［1］。目前關(guān)于子宮在位內(nèi)膜和異位內(nèi)膜的粘附、血管形成報(bào)道較多,但是關(guān)于子宮內(nèi)膜異位癥遷徙的研究卻鮮有報(bào)道［2］。本研究通過(guò)對(duì)本院AQP在子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)及子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷徙中的作用進(jìn)行分析,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 分析2009年8月～2014年7月病理科臨床資料,由于子宮內(nèi)膜異位癥采用半根治手術(shù)或者術(shù)中診刮內(nèi)膜,得到符合條件的70例,以異位子宮內(nèi)膜作為實(shí)驗(yàn)組,同一例患者在位內(nèi)膜作為對(duì)照組。在位內(nèi)膜腺細(xì)胞遷徙,將RNA干擾后腺細(xì)胞作為干擾實(shí)驗(yàn)組,將試劑盒中配備的siRNA陰性對(duì)照作為陰性對(duì)照組。

1.2 方法 ①通過(guò)免疫組織化學(xué)法監(jiān)測(cè)AQP2、5、8蛋白表達(dá)情況；②利用RNA干擾技術(shù)沉默自子宮內(nèi)膜癌腺細(xì)胞株Ishikawa中AQPS基,Realtime-PCR檢測(cè)干擾后mRNA水平的抑制情況,免疫印跡檢測(cè)干擾后腺細(xì)胞中AQP5蛋白表達(dá)情況,通過(guò)細(xì)胞穿孔實(shí)驗(yàn)檢查干擾后腺細(xì)胞遷徙能力改變情況。

1.3 觀察指標(biāo) ①觀察兩組AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)情況；②觀察腺細(xì)胞RNA干擾后細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)情況比較 實(shí)驗(yàn)組AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)率均低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 腺細(xì)胞RNA干擾后兩組細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)情況比較 腺細(xì)胞RNA干擾后24 h兩組細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；干擾實(shí)驗(yàn)組腺細(xì)胞RNA干擾后48、72、96 h細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)均低于陰性對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表1 兩組AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)情況比較［n(%)］

表2 腺細(xì)胞RNA干擾后兩組細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)情況比較(±s,ng/ml)

表2 腺細(xì)胞RNA干擾后兩組細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)情況比較(±s,ng/ml)

注：與陰性對(duì)照組比較,aP＜0.05,bP＞0.05

細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)24 h 48 h 72 h 96 h陰性對(duì)照組 70 34.3±4.2 96.2±3.3 140.4±3.6 160.4±5.8干擾實(shí)驗(yàn)組 70 35.6±4.5b 54.5±2.4a 70.5±2.5a 76.6±4.8at1.77 85.50 133.43 93.13P＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05組別 例數(shù)

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥主要是指一些具有生長(zhǎng)功能的子宮內(nèi)膜組織在子宮以外的身體部位出現(xiàn),屬于婦產(chǎn)科常見性疾病,其近年來(lái)的發(fā)生率呈現(xiàn)明顯增高的趨勢(shì)［3］。子宮內(nèi)膜異位癥呈現(xiàn)良性形態(tài)學(xué)臨床表現(xiàn),但是其具有和惡性腫瘤類似的種植能力、侵襲能力和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力［4］。AQP具有促進(jìn)細(xì)胞遷徙的功能,子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程中和子宮內(nèi)膜的遷徙、粘附和新生血管形成具有密切的關(guān)系,以AQP作為切入點(diǎn),干擾其基因的表達(dá)水平,檢驗(yàn)內(nèi)膜細(xì)胞在AQP干擾后遷徙情況的變化,對(duì)于明確AQP在子宮內(nèi)膜異位癥內(nèi)膜遷徙有著重要的意義。細(xì)胞遷徙是機(jī)體重要的生理過(guò)程,其是通過(guò)離子通道進(jìn)行調(diào)控的,涉及的細(xì)胞肌動(dòng)蛋白動(dòng)力、形態(tài)的快速改變,細(xì)胞粘附位點(diǎn)的重新分布。細(xì)胞內(nèi)有一套整體的、嚴(yán)密的機(jī)制,從而對(duì)細(xì)胞遷徙進(jìn)行調(diào)控［5,6］。AQP家族可以促進(jìn)水分子快速被動(dòng)運(yùn)輸,調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡狀態(tài),促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生遷徙,對(duì)脂肪代謝水平進(jìn)行調(diào)節(jié),利于神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)等。

本研究通過(guò)分析70例子宮內(nèi)膜異位癥患者臨床資料,結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)組AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)率均低于對(duì)照組(P＜0.05),提示AQP2、5、8在子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞上有表達(dá),在位內(nèi)膜上的腺上皮細(xì)胞AQP2、5、8陽(yáng)性表達(dá)率高于異位內(nèi)膜,干擾實(shí)驗(yàn)組腺細(xì)胞RNA干擾后48、72、96 h細(xì)胞穿孔計(jì)數(shù)均低于陰性對(duì)照組(P＜0.05),提示AQP5蛋白過(guò)表達(dá)參與了子宮內(nèi)膜細(xì)胞的遷徙過(guò)程,干擾5基因表達(dá)可以對(duì)子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞遷徙形成抑制。

綜上所述,AQP2、5、8蛋白過(guò)表達(dá)和子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程、子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞遷徙過(guò)程均有密切的關(guān)系。

［1］韋成厚,牛剛,沈宏偉,等.水通道蛋白1在子宮內(nèi)膜異位癥患者血清和腹腔液中的表達(dá)及意義.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2012,28(4): 310-312.

［2］廖百花,張秋實(shí),趙愛(ài)萍,等.水通道蛋白1與子宮內(nèi)膜異位癥新生血管形成的關(guān)系.廣東醫(yī)學(xué),2013,34(16):2450-2453.

［3］黃綺丹,黃海定,吳會(huì)東,等.子宮內(nèi)膜異位癥不孕小鼠水通道蛋白表達(dá)及莪棱膠囊的干預(yù)作用.新中醫(yī),2014,46(7):196-199.

［4］韋成厚,周蓓,牛剛.水通道蛋白1在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制的作用.廣東醫(yī)學(xué),2011,32(10):1350-1352.

［5］徐科君,吳瑞瑾.水通道蛋白與子宮內(nèi)膜異位癥.國(guó)際生殖健康/計(jì)劃生育雜志,2009,28(6):368-370.

［6］廖百花.子宮腺肌病病灶中微血管密度及水通道蛋白1的表達(dá).實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2012,28(9):775-777.

Effect by aquaporins in expression of endometriosis and endometrial cell migration

SU Ming-lan,LUO Zhi-ming.Shenzhen Yuandong Maternal and Child Hospital,Shenzhen 518021,China

ObjectiveTo investigate effect by aquaporins (AQP) in expression of endometriosis and endometrial cell migration.MethodsClinical data of 70 endometriosis patients were analyzed.Patients with endometriosis were taken as experimental group,an those with eutopic endometrium as control group.Patients with gland cell after RNA interference were taken as interference experimental group,and those with negative siRNA as negative control group.Observation was made on expression of AQP2,5,8 and gland cell perforation count after RNA interference.ResultsThe experimental group had all lower positive expression rate of AQP2,5,8 than the control group (P＜0.05),and the interference experimental group had all lower cell perforation count in 48,72,96 h after gland cell RNA interference than the negative control group (P＜0.05).ConclusionOverexpression of AQP2,5,8 protein contains close correlation with generating process of endometriosis and endometrial cell migration

Aquaporins; Endometriosis; Expression; Endometrial cell migration

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.13.009

2016-04-28］

水通道蛋白在子宮內(nèi)膜異位癥的表達(dá)及子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷徙中的作用(項(xiàng)目編號(hào)：2012C3105018)

524013 湛江市霞山婦幼保健院(蘇明蘭)；廣東醫(yī)學(xué)院(羅志明)