孟潔，覃學(xué)勇

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬柳州醫(yī)院腎內(nèi)科，廣西 柳州 545007)

胸腺肽α1對維持性血液透析患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及IL-2水平的影響

孟潔，覃學(xué)勇

(南方醫(yī)科大學(xué)附屬柳州醫(yī)院腎內(nèi)科，廣西 柳州 545007)

目的 探討使用胸腺肽α1對糖尿病終末期腎病維持性血液透析(血透)患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、自然殺傷(NK)細(xì)胞及白細(xì)胞介素-2(IL-2)水平的影響。方法選取2011年7月至2015年6月在我院血透中心行規(guī)律維持性血透患者71例，使用隨機(jī)數(shù)表法完全隨機(jī)化分為A組36例和B組35例，A組加用胸腺肽α1皮下注射，每次1.6 mg，每周2次，共用4周；B組不使用胸腺肽α1；C組40例為健康體檢者。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測試驗(yàn)第一天和一個月時A、B兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞水平，同時ELISA法檢測其外周血血清IL-2水平。C組各指標(biāo)則均為第一天檢測。結(jié)果糖尿病終末期腎病維持性血透患者細(xì)胞免疫功能及IL-2水平較正常人顯著降低，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；A組患者治療后的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值及NK細(xì)胞明顯高于治療前[CD3+(%)：(51.51±9.22)vs(72.51±10.22)；CD4+(%)：(26.85±4.21)vs(37.15±6.21)；CD4+/CD8+：(0.70±0.11)vs (1.63±0.23)；NK細(xì)胞(%)：(26.56±6.82)vs(36.21±5.32)]，而CD8+水平明顯低于治療前[(38.24±7.54)%vs(24.26±5.51)%，外周血血清IL-2水平明顯升高[(15.83±1.82)pg/mL vs(46.23±1.16)pg/mL]，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；B組患者治療前后的T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及血清IL-2水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論胸腺肽α1可提高糖尿病終末期腎病維持性血透患者細(xì)胞免疫功能，可能對其感染性疾病的防治有一定臨床意義。

胸腺肽α1；2型糖尿病；血液透析；免疫功能

糖尿病終末期腎病主要治療手段為維持性血透，該類患者由于尿毒癥毒素蓄積、營養(yǎng)不良等原因?qū)е碌拿庖吖δ芪蓙y嚴(yán)重影響了其生存率和生存質(zhì)量[1-2]。維持性血透患者醫(yī)院感染率達(dá)到了驚人的41.15%，明顯高于普通人群[3]。于文慧等[4]研究發(fā)現(xiàn)血液中的尿毒癥毒素積蓄對T淋巴細(xì)胞免疫功能的抑制可能引起了維持性血透患者機(jī)體免疫功能紊亂。胸腺肽α1可明顯提高人體免疫力，目前已廣泛應(yīng)用于腫瘤的治療[5]。本研究觀察使用胸腺肽α1對糖尿病終末期腎病維持性血透患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及IL-2水平的影響，以期對臨床起到一定的借鑒意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年7月至2015年6月在我院血透中心行維持性血透患者71例，病因均為2型糖尿病腎病所致終末期腎功能衰竭(血肌酐≥532 μmol/L)，按隨機(jī)數(shù)表法分為A組和B組，A組36例，男性23例，女性13例，平均年齡(58±13.6)歲；B組35例，男性20例，女性15例，平均年齡(60±14.9)歲；另選擇同期體檢健康志愿者40例為對照組，其中男性21例，女性19例，平均年齡(59±12.3)歲。A、B兩組患者均接受維持性血透治療6個月以上。入選標(biāo)準(zhǔn)：研究期間無嚴(yán)重細(xì)菌、病毒感染，血壓控制穩(wěn)定，既往無血液病、惡性腫瘤、肝病、精神疾病及嚴(yán)重心腦血管疾病史，無手術(shù)、放療、化療病史、未使用其他免疫抑制劑，且無輸血史。三組受檢者的年齡及性別構(gòu)成比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 B組規(guī)律維持性血透，常規(guī)口服鈣離子拮抗劑等降壓藥物控制血壓及注射重組人促紅細(xì)胞生成素，補(bǔ)鈣、降磷等治療；A組在上述治療基礎(chǔ)上加用胸腺肽α1(注射用胸腺法新，成都地奧九泓制藥廠，規(guī)格1.6 mg/支，皮下注射，每周2次，共用4周)。兩組血透患者均透析3次/每周，每次約4 h。

1.2.2 外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞測定 分別在入組后第一天胸腺肽α1治療前、治療結(jié)束后1 d早晨空腹采集全血5 mL，2 000 r/min高速離心5 min后收集上清約1.0 mL，各取0.5 mL分為兩管，流式細(xì)胞術(shù)檢測其T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞水平。

1.2.3 ELISA法檢測外周血血清IL-2水平 取上述各對象留取的1管血清0.5 mL，檢測過程嚴(yán)格按照說明書操作。其中IL-2試劑盒(ELISA)(RapidBio Lab公司，美國)、Multiskan MK3酶標(biāo)儀(Thermo Electron Corporation公司，美國)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，兩組數(shù)據(jù)間的相關(guān)關(guān)系用雙變量相關(guān)分析方法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及血清IL-2水平 結(jié)果提示糖尿病終末期腎病維持性血透患者細(xì)胞免疫功能及IL-2水平較正常人明顯降低(見表1)。A組治療后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、NK細(xì)胞及血清IL-2水平均較治療前顯著升高，而CD8+則較治療前顯著降低(均P＜0.05)，B組兩次檢測各指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見表2)。各觀察對象均未出現(xiàn)明顯胸腺肽α1藥物相關(guān)不良反應(yīng)。

2.2 T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞與血清IL-2水平的相關(guān)性 對A組各指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析顯示，T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、NK細(xì)胞與血清IL-2水平分別呈高度正相關(guān)(CD3+與血清IL-2水平r=0.67，P=0.00；CD4+與血清IL-2水平r=0.58，P= 0.00；CD4+/CD8+比值與血清IL-2水平r=0.59，P=0.00；NK細(xì)胞與血清IL-2水平r=0.68，P=0.00)，而CD8+與血清IL-2水平呈高度負(fù)相關(guān)(r=-0.57，P=0.00)。

表1 維持性血透組和對照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及血清IL-2水平比較(±s)

表1 維持性血透組和對照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及血清IL-2水平比較(±s)

組別維持性血透組(n=71)對照組(n=40) t值P值CD3+(%) 50.51±10.21 71.20±9.12 0.20 0.01 CD4+(%) 25.65±4.27 41.11±5.81 0.16 0.00 CD8+(%) 36.20±6.84 22.37±6.80 2.57 0.01 CD4+/CD8+0.63±0.10 1.34±0.25 0.41 0.01 NK細(xì)胞(%) 26.28±6.52 34.70±6.91 0.43 0.02 IL-2(pg/mL) 16.03±2.85 26.23±1.16 0.22 0.01

表2 胸腺肽α1對血透患者T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及血清IL-2水平的影響(%，±s)

表2 胸腺肽α1對血透患者T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及血清IL-2水平的影響(%，±s)

組別A組(n=36) B組(n=35)時間第一天一個月t值P值第一天一個月t值P值CD3+(%) 51.51±9.22 72.51±10.22 0.14 0.00 51.47±7.42 56.51±8.12 0.26 0.15 CD4+(%) 26.85±4.21 37.15±6.21 0.19 0.01 25.81±5.22 29.35±6.21 0.15 0.18 CD8+(%) 38.24±7.54 24.26±5.51 3.24 0.00 38.51±6.14 36.25±7.31 1.63 0.21 CD4+/CD8+0.70±0.11 1.63±0.23 0.25 0.00 0.69±0.08 1.01±0.11 0.31 0.26 NK細(xì)胞(%) 26.56±6.82 36.21±5.32 2.91 0.01 26.21±5.81 29.83±4.43 2.76 0.35 IL-2(pg/mL) 15.83±1.82 46.23±1.16 0.11 0.00 16.03±1.52 15.93±1.26 1.21 0.23

3 討 論

目前糖尿病終末期腎病是維持性血透的主要原因，解曉琴等[6]研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病病人血液中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值水平下降，CD8+水平升高，由此認(rèn)為其細(xì)胞免疫功能低下，臨床上應(yīng)采取措施提高該類患者免疫功能。而維持性血透患者受多種因素影響也存在免疫缺陷[7]。感染已成為僅次于心血管并發(fā)癥的、我國血透患者第二位死亡原因[8]，因此防治感染對延長此類患者生存率及改善預(yù)后至關(guān)重要，細(xì)胞免疫治療對其意義重大。

T淋巴細(xì)胞及其亞群(CD3+、CD4+及CD8+)能夠直接反映機(jī)體細(xì)胞免疫的狀態(tài)。CD4+/CD8+比值正常情況下介于1.4～2.0之間，當(dāng)其比值＞2.0或＜1.4時則表明細(xì)胞免疫功能紊亂。有研究認(rèn)為慢性腎衰竭患者CD4+/CD8+比值升高對其免疫功能是有益的[9]。而IL-2能夠誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞分化，促進(jìn)NK細(xì)胞分泌γ-干擾素等細(xì)胞因子，并可增強(qiáng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞穿孔素基因的表達(dá)，提高機(jī)體特異性免疫應(yīng)答能力[10]。本研究發(fā)現(xiàn)糖尿病終末期腎病長期維持性血透患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、NK細(xì)胞及血清IL-2水平明顯降低，CD8+水平升高，提示其機(jī)體細(xì)胞免疫功能低下，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6，11]。

作為一種廣泛使用的免疫調(diào)節(jié)劑，胸腺肽α1能誘導(dǎo)CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞分化，增加T淋巴細(xì)胞分泌干擾素、IL-2和IL-3及上調(diào)T細(xì)胞淋巴因子受體的表達(dá)，也能促進(jìn)前NK細(xì)胞的分化成熟、增強(qiáng)其殺傷作用，從而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能[12]。本研究發(fā)現(xiàn)糖尿病終末期腎病維持性血透患者經(jīng)胸腺肽α1治療后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值及NK細(xì)胞水平顯著升高，而CD8+水平則顯著降低，同時IL-2水平明顯升高，且IL-2水平與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值及NK細(xì)胞呈明顯正相關(guān)，與CD8+水平呈高度負(fù)相關(guān)，表明胸腺肽α1提高了糖尿病終末期腎病維持性血透患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能，增強(qiáng)了其機(jī)體抗感染能力。

本研究結(jié)果顯示，通過胸腺肽α1免疫調(diào)節(jié)，糖尿病終末期腎病維持性血透患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能得到顯著改善，鑒于免疫功能對于該類患者臨床意義重大，臨床上可考慮適當(dāng)應(yīng)用胸腺肽α1，以提高此類患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能、增強(qiáng)其抗感染能力，從而改善生存率、提高生活質(zhì)量。

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Impact of thymosin α1on cellular immune function and serum IL-2 of patients with maintained hemodialysis.

MENG Jie,QIN Xue-yong.Department of Nephrology,the Affiliated Liuzhou Hospital of Southern Medical University, Liuzhou 545007,Guangxi,CHINA

ObjectiveTo observe the impact of thymosin α1on cellular immune function and serum IL-2 of patients with maintained hemodialysis.MethodsA total of 71 cases of patients with end-stage renal disease,who underwent maintained hemodialysis in our hospital from July 2011 to June 2015,were randomly divided into group A(36 cases with 1 cycle of treatment of thymosin α1)and group B(35 cases without treatment of thymosin α1),and 40 cases of healthy persons were chosen as the group C.Group A appiled thymosin α1(subcutaneous injection,1.6 mg each time,2 times a week,a total of 4 weeks),while group B didn't.Peripheral blood T lymphocyte subsets and NK cells were detected by flow cytometry at the first day and after one month of treatment.Serum IL-2 was identified by ELISA(enzyme linked immune-sorbent assay).ResultsThe cellular immune function and IL-2 level in patients with maintained hemodialysis were significantly lower than the healthy people(P＜0.05).In group A,Peripheral blood CD3+,CD4+,CD4+/CD8+ratio,NK cells and serum IL-2 of after treatment were significantly higher than before treatment[CD3+(%): (51.51±9.22)vs(72.51±10.22),CD4+(%):(26.85±4.21)vs(37.15±6.21),CD4+/CD8+ratio:(0.70±0.11)vs(1.63±0.23), NK cells(%):(26.56±6.82)vs(36.21±5.32),IL-2(pg/mL):(15.83±1.82)vs(46.23±1.16),P＜0.05],while CD8+of after treatment was significantly lower than before treatment[(38.24±7.54)%vs(24.26±5.51)%,P＜0.05].There were no significant changes in T lymphocyte subsets,NK cells and serum IL-2 in group B(P＞0.05).ConclusionThymosin α1can improve cellular immune function and serum IL-2 level of patients with maintained hemodialysis.So it may has enhance the ability of patient's resistance to infectious diseases.

Thymosin α1;Type 2 diabetes mellitus;Hematodialysis;Immune function

R459.5

A

1003—6350（2016）10—1599—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.10.017

2015-12-07)

孟潔。E-mail：allllyy@163.com