葉小英，范春麗，陸敏，卞潔

(昆山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 昆山 215300)

SYSMEX XN-1000血球儀在腦脊液和胸腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)中的可行性探討

葉小英，范春麗，陸敏，卞潔

(昆山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 昆山 215300)

目的 探討SYSMEX XN-1000血液分析儀(簡稱SYSMEX XN-1000)的體液模式在腦脊液和胸腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)中應(yīng)用的可行性。方法分別采用手工顯微鏡鏡檢法和SYSMEX XN-1000對183例腦脊液和胸腹水標(biāo)本進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)，將所測結(jié)果按A：(0～1 000)×106/L，B：(1 001～5 000)×106/L，C：＞5 000×106/L分為三組，分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果與手工顯微鏡鏡檢法相比，SYSMEX XN-1000所測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。A、B、C三組的相關(guān)系數(shù)分別為0.993、0.984、0.996，A組回歸方程為y=1.007x-1.072，B組回歸方程為y=1.003x+ 19.776，C組回歸方程為y=1.241x-1419.365。結(jié)論SYSMEX XN-1000血液分析儀可用于臨床腦脊液和胸腹水中白細(xì)胞計(jì)數(shù)，其操作簡單易行，結(jié)果穩(wěn)定可靠，但如果儀器進(jìn)行樣品檢測時(shí)報(bào)警，應(yīng)當(dāng)手工鏡檢復(fù)核，以提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

SYSMEX XN-1000血球儀；體液模式；胸水；腹水；腦脊液；白細(xì)胞計(jì)數(shù)

腦脊液和胸腹水中白細(xì)胞計(jì)數(shù)對疾病的診斷和治療具有很大的臨床意義，目前其參考方法仍為手工顯微鏡鏡檢法[1]，但其操作繁瑣費(fèi)時(shí)，技術(shù)熟練程度要求高，不適應(yīng)當(dāng)前日益增多的標(biāo)本檢測，影響了臨床醫(yī)生對患者病情的診斷和分析[2]。近年來我院引進(jìn)的SYSMEX XN-1000血球分析儀具有專門的體液模式(BF模式)，可以進(jìn)行胸腹水和腦脊液的白細(xì)胞分析，筆者利用SYSMEX XN-1000血球分析儀進(jìn)行胸腹水和腦脊液的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，以手工鏡檢法為參考方法，探討其檢測結(jié)果的可行性。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 183例標(biāo)本均來源于2014年5月1日至2014年12月31日在我院住院患者，排除有凝塊標(biāo)本，其中胸水95例，腹水29例，腦脊液59例；年齡16～91歲，平均57.13歲。采集標(biāo)本均以EDTA-K2抗凝，在標(biāo)本送檢后2 h內(nèi)完成測定[3]。

1.2 儀器及試劑 SYSMEX XN-1000血球分析儀及配套試劑均由日本SYSMEX公司提供，Olympus光學(xué)顯微鏡(日本奧林巴斯公司生產(chǎn))，改良牛鮑計(jì)數(shù)板(江蘇鹽城錦輝玻璃儀器廠生產(chǎn))，1%冰醋酸及20μl微量吸管(江蘇泰興市諾金醫(yī)療器械廠生產(chǎn))，EDTA-K2真空抗凝管。

1.3 方法

1.3.1 手工計(jì)數(shù) 所有的標(biāo)本均由高資歷經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]中體液細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作要求進(jìn)行分析，每份標(biāo)本均測定兩次，結(jié)果取平均值[5]。

1.3.2 儀器計(jì)數(shù) 測定前將SYSMEX XN-1000血液分析儀的進(jìn)樣分析模式改為體液模式，待儀器模式調(diào)整完畢后將標(biāo)本充分混勻放入儀器內(nèi)進(jìn)行檢測，每份標(biāo)本測定兩次，結(jié)果取平均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行配對t檢驗(yàn)和線性回歸分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用Kappa檢驗(yàn)進(jìn)行一致性分析。

2 結(jié) 果

183例標(biāo)本分別用手工鏡檢法和儀器法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以手工鏡檢結(jié)果為參考標(biāo)準(zhǔn)，將結(jié)果按A (0～1 000)×106/L、B(1 001～5 000)×106/L、C＞5 000×106/L三個(gè)梯度將標(biāo)本分為三組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果見表1和表2。另按標(biāo)本類型區(qū)分為腦脊液標(biāo)本和漿膜腔標(biāo)本[4]，漿膜腔積液按＜100×106/L區(qū)分滲出液和非滲出液[4]，非滲出液視為異常標(biāo)本，按標(biāo)本類型分組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，漿膜腔標(biāo)本K=0.792，P＜0.001，腦脊液標(biāo)本K=0.567，P＜0.001，結(jié)果顯示不同類型的標(biāo)本用兩種方法的檢查結(jié)果存在一致性，見表3。

表1 SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法結(jié)果相關(guān)性比較

表2 SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法均值和標(biāo)準(zhǔn)差比較

表3 SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法測定不同類型標(biāo)本的一致性比較

3 討 論

手工顯微鏡鏡檢法仍為當(dāng)前腦脊液和胸腹水細(xì)胞計(jì)數(shù)公認(rèn)的參考方法[6]。但由于該法對檢驗(yàn)人員的技術(shù)和熟練程度要求高，操作費(fèi)時(shí)繁瑣，且由于各大醫(yī)院的相關(guān)檢驗(yàn)標(biāo)本量增長迅速，使得其可行性下降[7]。目前已有不少文章報(bào)道了各型號全自動(dòng)血液分析儀在腦脊液和胸腹水細(xì)胞計(jì)數(shù)的應(yīng)用研究，其結(jié)果得到了檢驗(yàn)人員的認(rèn)同。筆者比較了SYSMEX XN-1000儀器法與手工顯微鏡鏡檢法結(jié)果，顯示兩方法相比A、B、C三組結(jié)果P值均大于0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，相關(guān)性良好，同時(shí)檢測了兩方法的一致性比較，證明具有良好的一致性，可以替代手工顯微鏡鏡檢法，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與Fleming等[8]的研究結(jié)果具有一致性。

SYSMEX XN-1000血液分析儀是采用電阻抗法的工作原理，脈沖次數(shù)代表了細(xì)胞數(shù)，次數(shù)越多計(jì)數(shù)的細(xì)胞數(shù)就越多，脈沖幅度表示細(xì)胞體積的大小，幅度越大，細(xì)胞體積越大。它以激光為光源，經(jīng)分色鏡后分為3束光，側(cè)向光主要是檢測核酸和細(xì)胞器的種類和多少，側(cè)向散射光測定細(xì)胞內(nèi)部信息，前向散射光測定細(xì)胞大小信息。基于這些特點(diǎn)，它能準(zhǔn)確的對細(xì)胞進(jìn)行分類和計(jì)數(shù)[9]。SYSMEX XN-1000血液分析儀具有專門的體液（BF）模式，測定細(xì)胞時(shí)使用WDF通道，可計(jì)數(shù)WBC-BF、單個(gè)核細(xì)胞、多個(gè)核細(xì)胞及其百分比。其相對于手工顯微鏡鏡檢法具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：①反應(yīng)速度快，節(jié)省時(shí)間，從將樣本充分混勻后放入儀器中測定到接收測定結(jié)果(包括細(xì)胞總數(shù)及分類)總時(shí)間不超過2 min。②BF模式下WDF通道測定時(shí)所需樣本分析量為199μl，實(shí)際計(jì)數(shù)的白細(xì)胞值為101 810個(gè)，手工鏡檢采用牛鮑計(jì)數(shù)板法，分析量為1μl，如細(xì)胞量多還需將其用冰醋酸稀釋，增加了誤差的產(chǎn)生，儀器法使用的樣本分析量遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于手工顯微鏡鏡檢法，增加了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。③儀器法在對細(xì)胞計(jì)數(shù)的同時(shí)還將細(xì)胞精確分類，節(jié)省了人工染色涂片計(jì)數(shù)分類時(shí)間。④與手工法相比，操作簡單方便，降低了檢驗(yàn)人員對細(xì)胞手工計(jì)數(shù)熟練程度的要求，任何只要能操作SYSMEX XN-1000血液分析儀的人都能準(zhǔn)確的得到結(jié)果。⑤儀器分析的同時(shí)提供細(xì)胞的散點(diǎn)圖，可以排除標(biāo)本中可能的間皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等干擾物質(zhì)，提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性。⑥與手工法相比結(jié)果更穩(wěn)定，重復(fù)性更好，精密度更高。手工法因檢驗(yàn)人員對牛鮑計(jì)數(shù)板使用的熟練程度的不同和對細(xì)胞認(rèn)識的不同，其計(jì)數(shù)結(jié)果可能有很大的差異，精密度和準(zhǔn)確度都不如儀器法。⑦提高了生物安全，降低了工作人員職業(yè)暴露的危險(xiǎn)性。但目前該儀器BF模式只能區(qū)分白細(xì)胞的單個(gè)核和多個(gè)核，可能滿足不了某些疾病的臨床診斷，對于有凝塊標(biāo)本本儀器不能適用，其凝塊有可能會導(dǎo)致儀器通道堵塞。

綜上所述，SYSMEX XN-1000血液分析儀可用于腦脊液和胸腹水的細(xì)胞計(jì)數(shù)，其操作簡單迅速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好，但是仍不能取代顯微鏡鏡檢法，當(dāng)儀器報(bào)警計(jì)數(shù)結(jié)果明顯異常時(shí)應(yīng)手工計(jì)數(shù)復(fù)檢，提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性[10]，實(shí)際工作中應(yīng)兩者相互結(jié)合。

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Feasibility study of white blood cell count in cerebrospinal fluid and hydrothorax and ascites with Sysmex XN-1000 hematology analyzer.

YE Xiao-ying,FAN Chun-li,LU Min,BIAN Jie.Department of Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Kunshan,Kunshan 215300,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo analyze the feasibility of using body fluid module of Sysmex XN-1000 hematology analyzer for white blood cell count in the cerebrospinal fluid(CSF),hydrothorax and ascites.MethodsMicroscope method and Sysmex XN-1000 hematology analyzer were used to analyze 183 samples of CSF,hydrothorax and ascites at the same time.The measured results were divided into three groups:group A:0～1 000×106/L,B:1 001～5 000×106/L, C:＞5 000×106/L.The results were statistically analyzed.ResultsCompared with the results of microscope,the results of Sysmex XN-1000 hematology analyzer showed no statistically significant difference(P＞0.05).The correlation coefficients of group A,B,C were 0.993,0.984,0.996,with the regression equation of y=1.007x-1.072,y=1.003+19.776x,y= 1.241-1 419.365x,respectively.ConclusionThe body fluid module of Sysmex XN-1000 hematology analyzer can be used for white blood cell count in clinical CSF and hydrothorax and ascites,with simple operation and reliable results. When the instrument is alarmed on the sample test,we should use manual microscopy review to improve the veracity and reliability of the results.

Sysmex XN-1000 hematology analyzer;Body fluid module;Hydrothorax;Ascites;Cerebrospinal fluid(CSF);White blood cell count

R446.11+3

A

1003—6350（2016）06—0955—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.06.034

2015-09-16)

葉小英。E-mail：fengling1cn@sina.com