湯建雷，周彥，高云明

(連云港市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科1、檢驗(yàn)科2，江蘇 連云港 222000)

苦參對(duì)抗甲狀腺藥物致Graves病患者白細(xì)胞減少的影響

湯建雷1，周彥2，高云明1

(連云港市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科1、檢驗(yàn)科2，江蘇 連云港 222000)

目的 針對(duì)Graves病(GD)經(jīng)抗甲狀腺藥物(ATD)治療后出現(xiàn)白細(xì)胞減少患者，通過(guò)苦參治療后觀(guān)察療效，并初步探討其可能的作用機(jī)制。方法隨機(jī)選取2014年1月至2015年10月我科收治的ATD致白細(xì)胞減少的GD患者共計(jì)30例作為研究對(duì)象，檢測(cè)記錄患者外周血白細(xì)胞(WBC)、粒細(xì)胞(NE)數(shù)量，及血清白細(xì)胞介素-1 (IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量，隨后患者在繼續(xù)ATD治療同時(shí)聯(lián)合苦參應(yīng)用，10 d后再次檢測(cè)外周血WBC、NE數(shù)量及血清中IL-1、IL-6含量。結(jié)果GD患者ATD治療后外周血WBC、NE數(shù)量、血清IL-1、IL-6含量分別為(3.45±0.25)×109/L、(1.72±0.21)×109/L、(0.29±0.06)ng/mL、(1.40±0.14)ng/mL，聯(lián)合苦參治療后患者外周血WBC、NE數(shù)量、血清IL-1、IL-6含量分別為(4.31±0.38)×109/L、(2.34±0.28)×109/L、(0.40±0.07)ng/mL、(1.67±0.08)ng/mL，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)。血清IL-1、IL-6水平與外周血WBC、NE數(shù)量呈直線(xiàn)正相關(guān)(r=0.595，0.456；0.473，0.467，P＜0.05或0.01)。結(jié)論苦參對(duì)ATD致GD白細(xì)胞減少患者的治療能明顯提升其WBC和NE數(shù)量，究其原因可能是通過(guò)促進(jìn)體內(nèi)免疫細(xì)胞因子IL-1、IL-6的表達(dá)進(jìn)而刺激患者骨髓造血從而達(dá)到治療效果。

苦參；白細(xì)胞減少；Graves病；抗甲狀腺藥物；細(xì)胞因子

甲狀腺功能亢進(jìn)癥簡(jiǎn)稱(chēng)甲亢，是甲狀腺體本身產(chǎn)生甲狀腺激素過(guò)多引起的甲狀腺毒癥，表現(xiàn)為神經(jīng)、消化、循環(huán)等系統(tǒng)興奮增高和代謝亢進(jìn)，以Graves病(GD)多見(jiàn)，臨床出現(xiàn)多種并發(fā)癥和合并癥，其中又以白細(xì)胞(WBC)減少較常見(jiàn)，分為初治即白細(xì)胞減少和抗甲狀腺藥物(ATD)應(yīng)用后出現(xiàn)白細(xì)胞減少兩類(lèi)，ATD常用包括甲巰咪唑(MMI)和丙硫氧嘧啶(PTU)，臨床上針對(duì)GD合并白細(xì)胞減少患者傳統(tǒng)多采用利可君、維生素B4、醋酸潑尼松、粒細(xì)胞刺激因子等藥物[1-3]，而苦參作為傳統(tǒng)中成藥物既往多用于護(hù)肝、抗腫瘤方面，在甲亢合并白細(xì)胞減少患者治療中鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)對(duì)聯(lián)合苦參治療前后患者白細(xì)胞、粒細(xì)胞(NE)及體內(nèi)相關(guān)細(xì)胞因子的變化入手，為該類(lèi)患者治療方法上尋求新的途徑，并為其產(chǎn)生的可能作用機(jī)制提供初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取連云港市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科2014年1月至2015年10月期間收治的ATD致GD白細(xì)胞減少患者30例，所有GD患者的診斷均符合人民衛(wèi)生出版社第八版內(nèi)科學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者年齡18～54歲，平均(36.7±16.4)歲，男性6例，女性24例，既往體健，排除感染、慢性肝病、血液病、風(fēng)濕結(jié)締組織病、接觸致白細(xì)胞減少藥物等病史，研究過(guò)程中除1例有輕微皮膚瘙癢，其余均無(wú)不適反應(yīng)發(fā)生，入選前均與患者充分溝通并取得患者和家屬的積極配合。

1.2 治療方法 上述收治的患者檢查肝功能均正常，根據(jù)患者甲功不需要調(diào)整ATD治療劑量，而后繼續(xù)ATD原劑量治療，同時(shí)聯(lián)合苦參氯化鈉注射液(丹盛，含苦參素0.6 g與氯化鈉0.9 g，主要成份為氧化苦參堿，丹東聯(lián)盛制藥有限公司)100 mL×1瓶，每日一次，共計(jì)10 d。

1.3 標(biāo)本采集及處理方法 將上述入組患者于清晨8時(shí)空腹安靜狀態(tài)抽取外周靜脈血10 mL，其中5 mL利用流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)測(cè)定患者外周血白細(xì)胞(WBC)和粒細(xì)胞(NE)數(shù)量，另外5 mL抗凝后1 500 r/min低溫離心5 min，分離血清無(wú)菌分裝，置于-20℃保存，通過(guò)放射免疫法測(cè)定血清白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量，然后聯(lián)合苦參氯化鈉注射液治療10 d后再次按上述步驟檢測(cè)患者外周血WBC、NE數(shù)量及血清IL-1、IL-6含量。主要儀器設(shè)備與試劑盒包括：外周血WBC和NE采用日本SYSMEX公司生產(chǎn)的XT-4000i型號(hào)血細(xì)胞分析儀。IL-1、IL-6測(cè)定試劑盒由上海超研生物科技有限公司提供，測(cè)量?jī)x器選用由上海五九自動(dòng)化設(shè)備有限公司生產(chǎn)的GC-1200型智能放免γ計(jì)數(shù)器。IL-1：批內(nèi)批間變異系數(shù)＜8%、＜15%；IL-6：批內(nèi)批間變異系數(shù)＜6%、＜10%，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行操作。

1.4 實(shí)驗(yàn)室檢查 Graves?。焊叽x癥候群，彩超提示甲狀腺?gòu)浡[大，甲狀腺功能提示三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)升高，促甲狀腺激素(TSH)下降，促甲狀腺激素受體抗體(TR-Ab)陽(yáng)性。外周血白細(xì)胞＜4.0×109/L[參考值范圍：(4.0～10.0)×109/L]為白細(xì)胞減少癥、粒細(xì)胞＜2.0×109/L[參考值范圍：(2.0～7.0)× 109/L]為粒細(xì)胞減少癥。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組均數(shù)間比較采用Paired-Samples t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 患者經(jīng)聯(lián)合苦參治療前后的血WBC、NE、IL-1、IL-6水平比較 ATD致GD白細(xì)胞減少患者，經(jīng)聯(lián)合苦參治療后患者外周血WBC、NE數(shù)量及血清IL-1、IL-6含量增加，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)，見(jiàn)表1。

表1 30例患者聯(lián)合苦參治療前后的血WBC、NE、IL-1、IL-6水平比較(±s)

表1 30例患者聯(lián)合苦參治療前后的血WBC、NE、IL-1、IL-6水平比較(±s)

分類(lèi)WBC (×109/L) NE (×109/L) IL-1 (ng/mL) IL-6 (ng/mL) ATD治療后ATD+苦參治療后t值P值3.45±0.25 4.31±0.38 1.31 0.015 1.72±0.21 2.34±0.28 1.26 0.021 0.29±0.06 0.40±0.07 1.69 0.001 1.40±0.14 1.67±0.08 2.20 0.001

2.2 經(jīng)苦參治療后患者的血清IL-1、IL-6含量與外周血WBC、NE數(shù)量的相關(guān)性 本研究表明，隨著IL-1、IL-6水平升高，外周血WBC、NE數(shù)量亦升高，呈直線(xiàn)正相關(guān)(P＜0.05或0.01)。其中IL-1水平與WBC、NE數(shù)量相關(guān)性為r=0.595、0.456，P=0.010、0.011；IL-6水平與WBC、NE數(shù)量相關(guān)性為r=0.473、0.467，P= 0.008、0.009。

3 討 論

甲狀腺功能亢進(jìn)癥是血液循環(huán)系統(tǒng)中甲狀腺激素過(guò)多導(dǎo)致的以神經(jīng)、循環(huán)、消化等系統(tǒng)興奮性增高及代謝亢進(jìn)為主要表現(xiàn)的臨床綜合征，其中GD約占85%，治療分為ATD、131I和手術(shù)。目前國(guó)內(nèi)對(duì)GD的治療仍以ATD居多，而該類(lèi)藥物本身有可能引起患者白細(xì)胞減少。本實(shí)驗(yàn)收集的病史資料也表明GD經(jīng)ATD治療后部分患者外周血白細(xì)胞和粒細(xì)胞數(shù)量出現(xiàn)不同程度下降，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]，究其下降原因有報(bào)道可能與患者免疫功能紊亂、抗中性粒細(xì)胞特異性Fcr受體Ⅲb抗體、HLA基因多態(tài)性等因素有關(guān)[5-7]。國(guó)內(nèi)高云明等[8]研究發(fā)現(xiàn)甲亢經(jīng)ATD治療后存在粒細(xì)胞由循環(huán)池向邊緣池聚集現(xiàn)象，為白細(xì)胞減少原因提供新的解釋。

GD為自身免疫性疾病，在其發(fā)病過(guò)程中多種免疫細(xì)胞因子參與，與疾病的發(fā)展轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)[9]。研究表明，白細(xì)胞介素(IL)作為一類(lèi)免疫細(xì)胞因子，參與機(jī)體的多種生理及病理反應(yīng)，其中IL-1能使骨髓細(xì)胞庫(kù)的中性粒細(xì)胞釋放到血液，并使之活化，同時(shí)與集落刺激因子(CSF)協(xié)同可促進(jìn)骨髓造血祖細(xì)胞增殖能力，使之形成巨大的集落；還可誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生多種CSF并表達(dá)相應(yīng)受體，從而促使造血細(xì)胞定向分化，而IL-6亦具有類(lèi)似促進(jìn)骨髓造血功能。Rodriguez等[10]研究表明體內(nèi)IL-6不足對(duì)骨髓前體細(xì)胞的增殖和粒細(xì)胞集落刺激因子的發(fā)育產(chǎn)生重要影響，能導(dǎo)致造血功能的紊亂，這也解釋了GD治療后白細(xì)胞減少可能和體內(nèi)細(xì)胞因子紊亂有關(guān)。

苦參主要成分為氧化苦參堿，因其具有抗病毒、抗肝纖維化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤等多種藥理功效，臨床既往多應(yīng)用于肝功能損傷、腫瘤放化療期間[11-14]，也有學(xué)者將其用于皮膚病治療[15]。艾立清等[16]發(fā)現(xiàn)苦參對(duì)腫瘤患者化療后引起的白細(xì)胞減少具有明顯提升作用，目前作用機(jī)制尚不明確。有研究表明可能是通過(guò)促進(jìn)骨髓中白細(xì)胞釋放及刺激粒巨噬細(xì)胞集落形成(CFU-GM)的增殖、分化達(dá)到升白細(xì)胞和粒細(xì)胞作用[17]，國(guó)內(nèi)外學(xué)者也從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明氧化苦參堿能刺激小鼠和家兔骨髓粒系造血功能，并使CFU-GM明顯增加，從而對(duì)動(dòng)物的白細(xì)胞減少具有提升所用[18-19]。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)ATD致GD白細(xì)胞減少患者聯(lián)合苦參治療后不僅白細(xì)胞和粒細(xì)胞明顯增加，同時(shí)體內(nèi)IL-1、IL-6水平也有所上升，且兩者具有正相關(guān)性，表明患者經(jīng)苦參治療后可能通過(guò)促進(jìn)體內(nèi)IL-1、IL-6的表達(dá)進(jìn)而刺激患者骨髓造血從而達(dá)到提升白細(xì)胞的作用。

苦參作為常用藥物，價(jià)格低廉，希望在未來(lái)的臨床工作中能更多的應(yīng)用到甲亢合并白細(xì)胞減少患者，從而為該類(lèi)患病群體提供更多的藥物選擇機(jī)會(huì)。

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Effects of Sophora flavescens on Graves'disease patients with leucopenia induced by anti-thyroid drug.

TANG Jian-lei1,ZHOU Yan2,GAO Yun-ming1.Department of Endocrinology1,Department of Clinical Laboratory2,the Second People's Hospital of Lianyungang City,Lianyungang 222000,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo observe the therapeutic effect of Sophora flavescens on Graves'disease(GD)patients with leucopenia after treatment of anti-thyroid drug(ATD),and to make a preliminary discussion on the possible mechanism of its formation.MethodsThirty GD patients with leucopenia after ATD treatment from January 2014 to October 2015 in our department were randomly chosen to detect peripheral white blood cell(WBC),neutrophilic granulocyte(NE)counts and blood serum interleukin 1(IL-1),interleukin 6(IL-6)levels.After that,these patients were treated with Sophora flavescens and ATD for ten days,and WBC,NE counts,IL-1,IL-6 levels would be again checked out.ResultsAfter ATD treatment,peripheral WBC,NE counts and blood serum IL-1,IL-6 levels were(3.45±0.25)×109/L, (1.72±0.21)×109/L,(0.29±0.06)ng/mL,(1.40±0.14)ng/mL,respectively.After Sophora flavescens and ATD treatment, above indexes were(4.31±0.38)×109/L,(2.34±0.28)×109/L,(0.40±0.07)ng/mL,(1.67±0.08)ng/mL,respectively.The difference of each index showed statistical significance(P＜0.05 or 0.01).Then,we found there was a positive correlation between IL-1,IL-6 levels and WBC,NE counts(r=0.595,0.456;0.473,0.467,P＜0.05 or 0.01 for all).ConclusionAfter ATD treatment,WBC and NE counts of partial patients decreased,while Sophora flavescens would obviously elevate WBC and NE counts of GD patients with leucopenia.The possible mechanism of its formation is that Sophora flavescens promote IL-1,IL-6 levels of these patients to stimulate the proliferation and differentiation of blood cells in the bone marrow.

Sphora flavescens;Leukopenia;Graves'disease(GD);Anti-thyroid drug(ATD);Cytokine

R582+.1

A

1003—6350（2016)14—2277—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.014

2016-01-05)

高云明。E-mail：gaoyunming@medmail.com.cn