黃彩平，李日紅，鄧惠宜，陳光元，謝家濱，黃平

(深圳市寶安區(qū)松崗人民醫(yī)院婦科，廣東 深圳 518105)

FRD上皮組織特殊染色液在宮頸病變篩查中的應(yīng)用

黃彩平，李日紅，鄧惠宜，陳光元，謝家濱，黃平

(深圳市寶安區(qū)松崗人民醫(yī)院婦科，廣東 深圳 518105)

目的 探討葉酸受體介導(dǎo)的宮頸特殊染色法(FRD)上皮組織特殊染色液在宮頸病變檢查中的臨床價值。方法選取2014年5月至2015年11月就診于松崗人民醫(yī)院婦產(chǎn)科門診行宮頸病變篩查的受檢者100例，均同時給予FRD宮頸特殊染色檢測和液基細(xì)胞學(xué)(TCT)檢測，兩種檢測中任何一項提示陽性則進(jìn)一步行陰道鏡宮頸活檢，并將檢測結(jié)果與病理結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果與病理診斷結(jié)果比較，F(xiàn)RD檢測的敏感性、特異性、陽性預(yù)測率、陰性預(yù)測率、誤診率、漏診率分別為80.72%、84.21%、75.00%、90.14%、26.88%、20.00%，TCT檢測的結(jié)果則分別為83.12%、83.12%、73.47%、87.67%、25.79%、19.28%，兩種檢測方法所得數(shù)據(jù)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論FRD上皮組織特殊染色液檢測和TCT檢測在宮頸病篩查中的臨床價值相當(dāng)，但采用FRD上皮組織特殊染色液檢測具有操作簡單、診斷全面、成本低廉以及結(jié)果快速等優(yōu)點(diǎn)，值得臨床推廣。

葉酸受體介導(dǎo)；宮頸病變；宮頸特殊染色法；臨床價值

宮頸癌的臨床發(fā)病率較高，嚴(yán)重威脅患者的生命，同時其也是目前少數(shù)能夠進(jìn)行早期篩查的惡性腫瘤之一。研究表明，在癌變前病情尚具有可逆轉(zhuǎn)性，予以科學(xué)有效的干預(yù)治療能夠延緩病程或降低宮頸癌的發(fā)生率，改善臨床預(yù)后[1]。因此，本病的早期篩查、診斷與治療對于改善患者的生存質(zhì)量具有重大意義[2]。目前，臨床對于宮頸病變的篩查診斷方法有很多，主要有液基細(xì)胞學(xué)(TCT)、人乳頭瘤病毒(HPV)、宮頸特殊染色法(FRD)染色檢測以及陰道鏡檢查，各項檢查方法各具優(yōu)劣。本研究探討了TCT與FRD染色檢查對宮頸疾病的篩查診斷價值，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年5月至2015年11月在松崗人民醫(yī)院婦產(chǎn)科門診行宮頸病變篩查的受檢者100例。納入標(biāo)準(zhǔn)：均自愿接受FRD特殊染色檢查、TCT檢查以及陰道鏡下宮頸活檢，均具有性生活史。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他病源微生物感染者；已行全子宮切除術(shù)者；既往有子宮手術(shù)或?qū)m頸手術(shù)者；宮頸接觸性出血且出血量大者；處于經(jīng)期患者和急性炎癥者；已確診為CINⅡ級或以上者；處于妊娠期與哺乳期者。所有受檢者年齡21～69歲，平均(45.52±8.36)歲；已婚42例，未婚58例。

1.2 方法 所有患者均接受FRD檢測和TCT檢測，若其中任何一項提示異常，則接受陰道鏡進(jìn)一步檢測，以組織病理學(xué)檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.1 FRD特殊染色 在檢查前的48 h內(nèi)不對受檢者的宮頸、陰道做任何處理(如消毒、消除分泌物、沖洗、上藥、取分泌物等)。開啟一瓶FRD染色液，將大棉簽、小棉簽同時插入FRD染色液瓶中，10 min內(nèi)使用。用大棉簽用力涂抹宮頸五圈，再用棉簽頂部在宮頸口按壓5 s即可取出，立即觀察棉簽顏色變化。再用小棉簽插入宮頸管2.5～3 cm，沿頸管內(nèi)壁旋轉(zhuǎn)5圈逐步下拉棉簽，立即觀察棉簽顏色變化。

1.2.2 TCT檢查 應(yīng)用無菌子宮頸細(xì)胞刷采集宮頸分泌物，將其伸入宮頸管內(nèi)部1 cm左右，按順時針方向輕輕旋轉(zhuǎn)5周，獲取宮頸以及宮頸管細(xì)胞后置入專用保存液中，充分搖勻，密封送至TCT檢查。TCT檢查應(yīng)用全自動細(xì)胞制片機(jī)自動制片，以國際通用TBS分級系統(tǒng)實(shí)施細(xì)胞學(xué)診斷，以保存完好且上皮覆蓋率超過10%視為高質(zhì)量涂片。

1.2.3 陰道鏡宮頸組織病理檢測 對于FRD檢測或TCT檢測任何一項結(jié)果為陽性受檢者進(jìn)行陰道鏡檢查，在受檢者月經(jīng)干凈后3～7 d，由3名具有豐富陰道鏡檢查經(jīng)驗(yàn)主治醫(yī)師進(jìn)行檢查，對可疑部位組織進(jìn)行活檢，并將活檢組織標(biāo)本送至病理檢查，由2名具有豐富臨床經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)師完成病理診斷。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 TCT診斷 根據(jù)國際癌癥協(xié)會(NCI)推薦TBS分類標(biāo)準(zhǔn)以及細(xì)胞異型性程度，將TCT診斷結(jié)果分為：正常組織或良性病變(NILM)、不明確意義的非典型鱗狀細(xì)胞(ASC-US)、不排除高度病變的非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASC-H)、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)、鱗狀細(xì)胞癌(SCC)以及腺癌(AC)[3]。將檢測結(jié)果在ASC-US以上的判斷為陽性，在LSIL及以上判斷為異常。

1.3.2 FRD診斷 觀察棉簽顏色，陰性：棉簽為黃棕色、綠色或茶褐色，提示無異常病變；陽性：藍(lán)色、黑色或黑綠色，提示宮頸異常病變。

1.3.3 陰道鏡宮頸組織病理診斷 將其作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果分為宮頸炎癥和CIN，根據(jù)病變程度分為CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級以及SCC(宮頸癌)，CINⅠ級為陰道鏡檢查異常，即陽性，CINⅡ級及以上判斷為宮頸高度病變。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率(%)表示，組間兩兩比較采用χ2檢驗(yàn)，一致性檢驗(yàn)用Kappa檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 TCT檢測結(jié)果與陰道鏡組織病理學(xué)檢查結(jié)果比較 100例受檢者中，TCT診斷敏感性為80.00%，特異性為83.12%，陽性預(yù)測值為73.47%，陰性預(yù)測值為87.67%，誤診率為26.88%，漏診率為20.00%，Kappa=0.873 2，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 TCT檢測結(jié)果與陰道鏡組織病理學(xué)檢查結(jié)果比較(例)

2.2 FRD檢測結(jié)果與陰道鏡組織病理學(xué)檢查結(jié)果比較 100例受檢者中，F(xiàn)RD檢測陽性81例，陰性29例；以病理結(jié)果為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，F(xiàn)RD診斷敏感性為80.72%，特異性為84.21%，陽性預(yù)測值為75.00%，陰性預(yù)測值為90.14%，誤診率為25.79%，漏診率為19.28%，Kappa=0.8501，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 FRD檢測結(jié)果與陰道鏡組織病理學(xué)檢查結(jié)果比較(例)

2.3 FRD檢測與TCT檢測的診斷結(jié)果比較 兩種檢測的診斷結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.354 6，P＞0.05)，見表3。

表3 FRD與TCT診斷結(jié)果比較(%)

3 討 論

宮頸癌是由良性宮頸疾病經(jīng)長期、持續(xù)發(fā)展而來的一種惡性病變。因存在個體化差異，部分宮頸癌患者在早期無典型癥狀和體征，經(jīng)常規(guī)婦科檢查往往難以發(fā)現(xiàn)和診斷[4]。合理篩查和早期診斷及治療對于減少宮頸癌發(fā)生率和死亡率具有重要意義。TCT檢查主要是利用液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)對涂片雜質(zhì)進(jìn)行去除處理，獲得高質(zhì)量薄片后能夠清晰地顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu)，故容易發(fā)現(xiàn)異常上皮細(xì)胞，對于細(xì)胞學(xué)分類診斷具有重要價值[5]。文獻(xiàn)報道顯示，TCT檢查對于宮頸癌細(xì)胞的檢出率高達(dá)100%，對于部分癌前病變也較易篩查出[6]。但由于經(jīng)濟(jì)因素的限制，在經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)的地區(qū)，細(xì)胞學(xué)檢查難以全面推廣，因此，找到一種操作簡單和易于推廣的診斷方式顯得尤為重要。

臨床研究證實(shí)，細(xì)胞間變是惡性腫瘤的病例特征之一。在細(xì)胞間變時，葉酸受體在細(xì)胞表面有高表達(dá)，而在正常細(xì)胞組織中無表達(dá)或少表達(dá)[7]。FRD上皮組織特殊染色液為一種用于人體組織腫瘤細(xì)胞的活細(xì)胞染色劑，其主要由葉酸衍生物、乙酸以及還原肽亞甲藍(lán)等組成[8]。將其應(yīng)用于宮頸癌檢測，當(dāng)活細(xì)胞染色劑涂抹于宮頸上皮組織后，若宮頸有癌細(xì)胞存在，則葉酸衍生物就會與之結(jié)合，同時攜帶還原肽亞甲藍(lán)，經(jīng)細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入胞質(zhì)[9]。當(dāng)染液中的乙酸進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)內(nèi)后，會改變細(xì)胞質(zhì)原有的pH環(huán)境，使得葉酸受體與還原肽亞甲藍(lán)、葉酸衍生物分離。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)游離的葉酸會被還原為四氫葉酸，并參與一碳的代謝過程[10]。在腫瘤細(xì)胞內(nèi)Fe2+的強(qiáng)烈催化下，還原態(tài)無色亞甲藍(lán)會被迅速氧化，變?yōu)橛猩难趸亖喖姿{(lán)。在生物大分子的不斷進(jìn)入使得細(xì)胞內(nèi)的滲透壓也隨之增高，氧化碳亞甲藍(lán)隨之被擠出細(xì)胞外，并在棉簽上呈現(xiàn)出顏色[11]。在本研究中，將FRD上皮組織特殊染色液用于宮頸疾病篩查，F(xiàn)RD診斷敏感性和特異性分別達(dá)到了80.72%和84.21%，與TCT檢測的80.00%和83.12%無明顯差異。FRD診斷敏感性和特異性高的原因可能是因?yàn)槠湓\斷結(jié)果依據(jù)棉簽顏色判斷，并且分為宮頸管和宮頸口兩個部分診斷，可提高宮頸管內(nèi)病變的檢出率。在誤診率和漏診率上，TCT為26.88%和20.00%，F(xiàn)RD為25.79%和19.28%，這與陳昕等[12]研究結(jié)果基本一致，證實(shí)了FRD在宮頸疾病篩查中的價值。

綜上所述，F(xiàn)RD上皮組織特殊染色液與TCT敏感性和特異性相似，可以作為宮頸篩查中的輔助診斷手段，尤其是在偏遠(yuǎn)地區(qū)醫(yī)療條件不足、細(xì)胞學(xué)檢查質(zhì)量控制不佳、隨診不便的情況下更為適用。

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Application of FRD epithelial tissue special staining solution in screening of cervical lesions.

HUANG Cai-ping,LI Ri-hong,DENG Hui-yi,CHEN Guang-yuan,XIE Jia-bin,HUANG Ping.Department of Obstetrics and Gynecology, Songgang People's Hospital of Baoan District of Shenzhen,Shenzhen 518105,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo explore the clinical value of the folate receptor-mediated tumor diagnosis(FRD)for the special staining of the epithelial tissue of the cervical.MethodsOne hundred patients with screening of cervical lesions,who admitted to Department of Obstetrics and Gynecology of Songgang People's Hospital of Baoan District of Shenzhen from May 2014 to November 2015,were selected as research objects.FRD cervical special staining detection and liquid based cytology test(TCT)detection were performed at the same time.Colposcopy and cervical biopsy was carried out at any abnormality,and the detection results were compared with pathological results.ResultsCompared with the pathologic diagnosis,the sensitivity,specificity,positive predictive rate,negative predictive rate,the rate of misdiagnosis and missed diagnosis rate were respectively 80.72%,84.21%,75.00%,90.14%,26.88%,20.00%of FRD detection,and 83.12%,83.12%,73.47%,87.67%,25.79%,19.28%for TCT.There was no significant difference between two detection methods in these aspects(P＞0.05).ConclusionFRD epithelial tissue special staining solution and TCT in cervical disease screening have almost the same clinical significance.However,FRD epithelial tissue special staining solution detection has the advantages of simple operation,comprehensive diagnosis,low cost and fast results etc.,which is worth for clinical promotion.

Folic acid receptor mediated;Cervical lesions;Cervical special staining method;Clinical value

R711.74

A

1003—6350（2016）14—2260—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.009

2016-03-31)

廣東省深圳市寶安區(qū)2014年度科技計劃項目（編號：2014242）

黃彩平。E-mail：35771405@qq.com