李　琳　李　芳　肖　婷　李　妍　曾　歐　褚　春　劉廠輝　吳　潔　文格波　楊　軍

(南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院，湖南　衡陽(yáng)　421001)

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冠心病患者血清活化T細(xì)胞趨化因子水平變化及與髓過氧化物酶、脂蛋白磷脂酶A2水平和全球急性冠狀動(dòng)脈事件注冊(cè)評(píng)分的相關(guān)性

李琳李芳肖婷李妍曾歐褚春1劉廠輝吳潔文格波楊軍

(南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院，湖南衡陽(yáng)421001)

〔摘要〕目的探討不同類型冠心病(CAD)患者外周血活化T細(xì)胞趨化因子(RANTES)水平的變化及與髓過氧化物酶(MPO)、脂蛋白磷脂酶(Lp-PL)A2和全球急性冠狀動(dòng)脈事件注冊(cè)(GRACE)評(píng)分的相關(guān)性。方法選擇行冠狀動(dòng)脈造影術(shù)的住院患者 150例，其中穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組59 例，無(wú)癥狀心肌缺血(SMI)組28例，急性冠脈綜合征(ACS)組63例，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測(cè)定血清RANTES、MPO和Lp-PLA2水平，并計(jì)算患者GRACE評(píng)分，分析RANTES與MPO和Lp-PLA2水平及GRACE危險(xiǎn)分層的關(guān)系。結(jié)果ACS組外周血RANTES、MPO和Lp-PLA2水平均明顯高于SMI組和SAP組(P<0.05)，SAP組外周血RANTES、MPO和Lp-PLA2水平與SMI組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。RANTES與MPO及 Lp-PLA2均呈正相關(guān)(r=0.743，P=0.000；r=0.640，P=0.000)；MPO與Lp-PLA2也呈正相關(guān)(r=0.606，P=0.000)；而RANTES、MPO和Lp-PLA2與GRACE評(píng)分均無(wú)明顯相關(guān)性。結(jié)論聯(lián)合檢測(cè)外周血RANTES、MPO和Lp-PLA2水平或聯(lián)合GRACE評(píng)分對(duì)CAD的診斷和分層有一定價(jià)值。

〔關(guān)鍵詞〕冠心?。换罨疶細(xì)胞趨化因子；髓過氧化物酶；脂蛋白磷脂酶A2；全球急性冠狀動(dòng)脈事件注冊(cè)評(píng)分

1南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院

第一作者：李琳(1990-)，女，在讀碩士，主要從事冠心病、糖尿病心肌病的研究。

不同危險(xiǎn)分層的冠心病(CAD)臨床預(yù)后和干預(yù)策略差別很大，目前雖然可根據(jù)全球急性冠狀動(dòng)脈事件注冊(cè)(GRACE)評(píng)分和其他危險(xiǎn)分層的評(píng)分工具對(duì)CAD和急性冠脈綜合征(ACS)的臨床預(yù)后進(jìn)行初步判斷，但由于其評(píng)分依據(jù)主要是根據(jù)冠脈血流動(dòng)力學(xué)改變導(dǎo)致的臨床后果，故在預(yù)警時(shí)效性和判斷準(zhǔn)確性上仍有不足。炎性反應(yīng)在ACS不穩(wěn)定斑塊的形成、破裂以及血栓形成過程中都起著舉足輕重的作用〔1〕，炎癥反應(yīng)中趨化因子發(fā)揮著關(guān)鍵作用?；罨疶細(xì)胞趨化因子(RANTES)即CCL5，是趨化因子的一員，參與免疫調(diào)節(jié)及炎癥過程。體內(nèi)多種細(xì)胞如血小板、內(nèi)皮細(xì)胞等均可產(chǎn)生CCL5〔2〕。有研究顯示RANTES可趨化炎性細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)皮下促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和破裂，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)RANTES與CAD的危險(xiǎn)分層及預(yù)后相關(guān)。本文擬探討髓過氧化物酶(MPO)和脂蛋白磷脂酶(Lp-PL)A2水平等多種血清學(xué)指標(biāo)對(duì)CAD診治的臨床意義及其與CAD GRACE評(píng)分的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象連續(xù)入選2014年1月至2015年1月在我院心血管內(nèi)科住院的CAD患者共150例。臨床診斷均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)和中華心血管雜志編輯委員會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)和《急性心肌梗死診斷和治療指南 》的CAD分類診斷標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均有心前區(qū)疼痛，結(jié)合患者病史，心電圖及心肌酶學(xué)檢查結(jié)果分別診斷為無(wú)癥狀心肌缺血(SMI)、穩(wěn)定型心絞痛(SAP)、ACS組。SMI組28例，男13 例，女15 例，平均年齡(62±9)歲；SAP組59 例，其中男34例，女25例，年齡(62±10)歲；ACS組63例(不穩(wěn)定心絞痛33例，急性心肌梗死30例)，男40 例，女23例，平均年齡(62±10)歲。三組患者平均年齡、 身高、 體重指數(shù)、 收縮壓、 舒張壓、 血脂、 白細(xì)胞、 尿酸、 肌酐等相關(guān)危險(xiǎn)因素均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。排除有下列情況之一者：嚴(yán)重肝、 腎功能障礙、 慢性炎癥性疾病、 嚴(yán)重凝血機(jī)制異常、 惡性腫瘤、 近期有其他活動(dòng)性出血病史(如消化性潰瘍等)、 碘過敏實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性、 酮癥酸中毒等糖尿病急性并發(fā)癥、其他器質(zhì)性心臟病(如心肌炎或心力衰竭等)、 近期重大外傷、 自身免疫性疾病、急慢性感染性疾病，嚴(yán)重的全身其他系統(tǒng)疾病，腫瘤、妊娠和哺乳期婦女等。記錄受試者年齡、 體重、 收縮壓、 舒張壓、 血脂等臨床基本資料。

表1　3組患者基本臨床資料對(duì)比±s)

1.2冠脈造影檢查采用標(biāo)準(zhǔn)Judkin法，由經(jīng)驗(yàn)豐富的2位及以上心內(nèi)科介入醫(yī)生完成。每一血管至少3個(gè)以上的多體位投照。以直徑法評(píng)測(cè)冠脈病變狹窄程度，以最嚴(yán)重處直徑狹窄的比例表示狹窄直徑，病變管腔狹窄≥50%為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

1.3檢測(cè)方法

1.3.1標(biāo)本處理所有患者均在入院行冠脈造影術(shù)后取動(dòng)脈血約5 ml，2 h 內(nèi)離心(3 000 r/min，10 min)取得血清，分離上層血清置于-70℃ 冰箱中保存待用。由專業(yè)技術(shù)人員質(zhì)控檢驗(yàn)。

1.3.2血清RANTES、MPO和Lp-PLA2水平的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)各組病人血清RANTES、MPO和Lp-PLA2水平，試劑盒由武漢華美生物工程有限公司提供，品牌為CUSABIO，貨號(hào)分別為CSB-EL004800HU、CSB-EL014757HU、CSB-EL018105HU。

1.4GRACE評(píng)分內(nèi)容包括年齡、心率、收縮壓、肌酐，Killip分級(jí)、是否有已知心臟事件、心肌酶標(biāo)志物、ST段變化，對(duì)患者入院后的臨床資料進(jìn)行評(píng)分，最后將各積分相加，所有患者均在24 h內(nèi)完善GRACE評(píng)分。理論分值范圍2~383分。

2結(jié)果

2.1各組RANTES、MPO和Lp-PLA2水平比較ACS組外周血RANTES、MPO和Lp-PLA2水平均明顯高于SMI組和SAP組(P<0.05)，SAP組外周血RANTES、MPO 和Lp-PLA2水平與SMI組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表2。

表2　各組血清RANTES、MPO和Lp-PLA2水平比較

與SMI組及SAP組比較：1)P<0.05

2.2RANTES水平與MPO及Lp-PLA2水平的相關(guān)性分析雙變量Pearson 直線相關(guān)分析結(jié)果顯示：RANTES與MPO及Lp-PLA2均呈正相關(guān)(r=0.743，P=0.000；r=0.640，P=0.000)，MPO與Lp-PLA2也呈正相關(guān)(r=0.606，P=0.000)。

2.3RANTES、MPO和Lp-PLA2與GRACE評(píng)分均無(wú)相關(guān)性雙變量Pearson 直線相關(guān)分析結(jié)果顯示：血清RANTES、MPO、Lp-PLA2與GRACE評(píng)分均無(wú)相關(guān)性(r=0.092，P=0.223；r=-0.061，P=0.420；r=-0.070，P=0.353)

3討論

目前GRACE評(píng)分被認(rèn)為是最有效的預(yù)測(cè)ACS患者危險(xiǎn)分層及預(yù)后的評(píng)分體系之一。但GRACE評(píng)分在ACS危險(xiǎn)分層中仍有其不足：(1)雖然GRACE評(píng)分與患者預(yù)后密切相關(guān)，但由于其評(píng)分依據(jù)主要依賴于臨床情況，故對(duì)病情的預(yù)警作用有所延遲；(2)GRACE評(píng)分依據(jù)的血清學(xué)指標(biāo)僅有心肌酶學(xué)，故對(duì)心肌梗死之外的ACS預(yù)測(cè)作用有所不足。如何更有效地更早期地預(yù)測(cè)ACS的臨床風(fēng)險(xiǎn)仍是CAD研究的熱點(diǎn)。在ACS不穩(wěn)定斑塊的形成、破裂以及血栓形成過程中，炎癥反應(yīng)都起著舉足輕重的作用〔1~3〕。RANTES是一種由激活的T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和血小板分泌的趨化性細(xì)胞因子CC亞族成員CCL5〔4〕，通過CCR1誘導(dǎo)白細(xì)胞趨化，通過CCR5介導(dǎo)白細(xì)胞的遷移，二者共同作用將導(dǎo)致單核/巨噬細(xì)胞穿過內(nèi)皮，促進(jìn)炎癥反應(yīng)及細(xì)胞炎性因子的表達(dá)，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成。研究顯示，RANTES是一種獨(dú)立預(yù)測(cè)斑塊易損性的危險(xiǎn)因素，與CAD危險(xiǎn)程度呈正相關(guān)，提示RANTES與急性心血管事件及斑塊易損性關(guān)系密切〔5〕。也有研究發(fā)現(xiàn)兔動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊中RANTES水平明顯升高〔6〕，而高水平的RANTES預(yù)示著高風(fēng)險(xiǎn)的斑塊破裂事件〔7〕。本研究結(jié)果顯示ACS患者血清RANTES水平明顯升高。

MPO是一種存在于中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中的促炎癥酶，參與冠脈局部炎癥和粥樣硬化斑塊失穩(wěn)定的調(diào)控〔4，8〕。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)MPO存在于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，可導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定和破裂，并與再狹窄有關(guān)〔9〕。Lp-PLA2也是一個(gè)與炎癥相關(guān)的血清學(xué)標(biāo)志物，可由多種炎癥細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等合成和釋放〔10〕；并且能促使粥樣斑塊失穩(wěn)定，與CAD急性心臟事件發(fā)生密切相關(guān)〔11〕。同時(shí)，美國(guó)臨床內(nèi)分泌醫(yī)師協(xié)會(huì)(AACE)支持把Lp-PLA2作為血管特異性炎癥的風(fēng)險(xiǎn)因子〔12〕。本研究結(jié)果顯示，RANTES、MPO、Lp-PLA2水平與ACS的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可考慮作為CAD危險(xiǎn)分層的有效血清學(xué)指標(biāo)。

本研究還發(fā)現(xiàn)血清RANTES、MPO及Lp-PLA2水平與患者的GRACE評(píng)分并未顯示明顯相關(guān)性。究其原因，一方面可能與本文中觀察病例數(shù)目相對(duì)較少有關(guān)；另一方面也可能與RANTES、MPO、Lp-PLA2等血清炎癥指標(biāo)與GRACE評(píng)分反映的是ACS不同階段和不同層面的變化有關(guān)，也提示GRACE評(píng)分的依據(jù)主要與不穩(wěn)定性斑塊破裂后導(dǎo)致的臨床后果有關(guān)，而在評(píng)估ACS早期變化即斑塊穩(wěn)定性改變?nèi)杂兴窒蕖?/p>

4參考文獻(xiàn)

1Libby P，Lichtmabn A，Hansson GK.Immune effector mechanisms implicated in atherosclerosis：from mice to humans〔J〕.Immunity，2013；38(6)：1092-104.

2Herder C，Illig T，Baumert J，etal.RANTES/CCL5 gene polymorphisms，serum concentrations，and incident type 2 diabetes：results from the MONICA/KORA Augsburg case-cohort study〔J〕.Eur J Endocrinol，2008；158(5)：R1-5.

3趙依帆，潘思京，高真真，等.動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥信號(hào)通路研究進(jìn)展〔J〕.中華老年腦血管病雜志，2014;16(12)：1332-4.

4李桂林，梁尚棟.趨化因子5及其受體CCRS與糖尿病并發(fā)癥〔J〕.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2011;27(10)：1333-7.

5韓朝鑫，王彥富，趙紅燕，等.趨化因子RANTES與冠狀動(dòng)脈斑塊易損性的相關(guān)性研究〔J〕.臨床心血管病雜志，2014;30(4)：319-21.

6彭昱東，程龍獻(xiàn)，曾秋棠，等.兔動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊與血清炎癥因子的相關(guān)性研究〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2010;26(17)：3092-5.

7Virani SS，Nambi V，Hoogeveen R，etal.Relationship between circulating levels of RANTES(regulated on activation，normal T-cell expressed，and secreted)and carotid plaque characteristics：the Atherosclerosis Risk in Communities(ARIC)Carotid MRI Study〔J〕.Eur Heart J，2011;32(4)：459-68.

8王大海，李特，程熠，等.髓過氧化物酶與動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2013;33(7)：1722-4.

9楊元明，陳彈.血清MMP9，MPO，CD40L及CRP對(duì)支架再狹窄及ACS患者預(yù)后及心功能預(yù)測(cè)價(jià)值〔J〕.華南國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志，2014;28(4)：326-8.

10Tousoulis D，Papageorgiou N，Androulakis E，etal.Lp-PLA2-A novel marker of atherosclerosis：to treat or not to treat〔J〕?Int J Cardiol，2013;165(2)：213-6.

11Cai A，Zheng D，Qiu R，etal.Lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA 2)：A novel and promising biomarker for cardiovascular risks assessment〔J〕.Dis Markers，2013；34(5)：323-31.

12Jellinger PS，Smith DA，Mehta AE，etal.American Association of Clinical Endocrinologists′ Guidelines for Management of Dyslipidemia and Prevention of Atherosclerosis：executive summary〔J〕.Endocr Pract，2012；18(2)：269-93.

〔2015-05-26修回〕

(編輯袁左鳴)

Correlation between the serum levels of RANTES with MPO，Lp-PLA2 and GRACE risk score in patients with coronary heart disease

LI Lin,LI Fang,XIAO Ting,etal.

The First Affiliated Hospital of South China University，Hengyang 421001,Hunan, China

【Abstract】ObjectiveTo explore the difference of peripheral serum RANTES levels in different subtype of coronary heart disease(CHD), the correlation between the serum levels of RANTES with MPO, Lp-PLA2 and GRACE risk score in patients with CHD.Methods150 patients were divided into 3 groups undergoing the coronary angiography, stable angina pectoris (SAP) group(n=59),stable myocardial infarction (SMI) group(n=28), acute coronary syndrome(ACS) group (n=63),the serum levels of RANTES, MPO and Lp-PLA2 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA),the patients in research group were given a mark with GRACE risk score, the correlation in level of RANTES in serum with MPO, Lp-PLA2 and GRACE risk score were analyzed.ResultsThe serum levels of RANTES, MPO and Lp-PLA2 in AMI group were significantly higher than those of SAP groups and SMI group (P<0.05). The serum levels of RANTES, MPO and Lp-PLA2 in SAP group and SMI group had no significant difference(P>0.05). RANTES was positively correlated to MPO(r=0.743,P=0.000) and Lp-PLA2 level(r=0.640,P=0.000);MPO was positively correlated to Lp-PLA2 level(r=0.606,P=0.000);RANTES, MPO, Lp-PLA2 did not show significantly correlation with GRACE risk score (r=0.092，P=0.223;r=-0.061，P=0.420;r=-0.070，P=0.353).ConclusionsIt might have a certain value in the diagnosis and stratification of CHD by combinating detected the serum levels of RANTES, MPO, Lp-PLA2 or with the global registry of acute coronary events risk score.

【Key words】Coronary heart disease; Regulated on activation; Normal T-cell expressed and secreted ;Myeloperoxidase;Lipoprotein-associated phospholipase A2; Global registry of acute coronary events risk score

通訊作者：楊軍(1974-)，男，碩士生導(dǎo)師，教授，主任醫(yī)師，主要從事冠心病、糖尿病心肌病的研究。

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81270181，No.81202830)

〔中圖分類號(hào)〕R446.11

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)03-0585-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.03.031