寇學(xué)俊　王　磌　曹萬才　張迅英

(山東省交通醫(yī)院心內(nèi)科，山東　濟(jì)南　250031)

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血管緊張素Ⅱ-2型受體基因多態(tài)性與老年原發(fā)性高血壓患者動(dòng)態(tài)血壓參數(shù)的相關(guān)性

寇學(xué)俊王磌曹萬才張迅英

(山東省交通醫(yī)院心內(nèi)科，山東濟(jì)南250031)

〔摘要〕目的研究血管緊張素Ⅱ-2型受體(AT2R)基因A1675G多態(tài)性與老年原發(fā)性高血壓(EH)患者動(dòng)態(tài)血壓參數(shù)的相關(guān)性。方法應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)90例老年EH患者和83例正常老年人的AT2R A1675G多態(tài)性，同時(shí)對(duì)老年EH患者作24 h動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)(24 h ABPM)。結(jié)果老年EH組AT2R A1675G基因G等位基因頻率比正常血壓家系組低(P<0.05)。AG、GG基因型EH患者24 h及白天、夜間的收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)和白天平均動(dòng)脈壓(MAP)水平顯著低于基因型AA組(P<0.05)。結(jié)論AT2R基因A1675G多態(tài)性與老年EH患者動(dòng)態(tài)血壓參數(shù)具有相關(guān)性。

〔關(guān)鍵詞〕原發(fā)性高血壓；血管緊張素Ⅱ-2型受體；基因多態(tài)性

血管緊張素Ⅱ-2型受體(AT2R)是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)的重要組成部分，通過與血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)結(jié)合介導(dǎo)一系列心血管作用。最新研究顯示血管緊張素Ⅱ-2型受體(AT2R)具有拮抗AT1R的功能〔1〕，如AT2R可介導(dǎo)血管舒張、降低血壓等〔2〕，可能是一種潛在的心臟、血管保護(hù)性受體，但AT2R與老年原發(fā)性高血壓(EH)的關(guān)系目前尚無定論，因此本研究探討AT2R基因多態(tài)性與老年EH的關(guān)系。

1材料與方法

1.1研究對(duì)象2012年選取濰坊市老年EH組和老年正常血壓(NT)組。依照2009年《中國(guó)高血壓防治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)：在未服用抗高血壓藥物情況下收縮壓(SBP)≥140 mmHg 和(或)舒張壓(DBP)≥90 mmHg，并排除繼發(fā)性高血壓、肝腎疾患、糖尿病、妊娠性高血壓及其他心腦血管疾病。NT組SBP≤140 mmHg 及DBP≤90 mmHg，經(jīng)病史、體檢、心電圖及生化指標(biāo)排除心腦血管疾病、糖尿病及肝腎疾患。兩組間年齡、體重指數(shù)(BMI)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FPG)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。EH組SBP與NT組比較差異顯著(P<0.05)；EH組舒張壓與NT組比較差異顯著(P<0.05)。見表1。

表1　兩組一般臨床資料±s)

與NT組比較：1)P<0.05

第一作者：寇學(xué)俊(1985-)，男，醫(yī)師，碩士，主要從事高血壓的發(fā)病機(jī)制及治療方式研究。

1.2方法

1.2.1主要試劑全血基因組DNA提取試劑盒購(gòu)自濟(jì)南科瑞生物公司，PCR反應(yīng)體系購(gòu)自山東賽恩斯科技有限公司。

1.2.2基因檢測(cè)用EDTA抗凝外周靜脈血5 ml，采用低滲溶血-鹽析法用DNA專用提取試劑盒抽提白細(xì)胞基因組DNA。PCR引物：上游序列ATTACGTCCCAGCGTCTGAG，下游序列ATAAATCAGCTTGCTTAGTGCC。PCR產(chǎn)物經(jīng)12 %聚丙烯酰胺凝膠電泳，溴乙啶(EB)染色，紫外燈下觀察結(jié)果。AA型：野生型(2個(gè)片段組成：390 bp，162 bp)；AG型：雜合突變型(3個(gè)片段組成：390 bp，270 bp，162 bp)；GG型：純和突變型(2個(gè)片段組成：390 bp，270 bp)。對(duì)AT2R基因A1675G SNP進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序采用sanger雙脫氧鏈終止法，利用上海華大基因有限公司3730測(cè)序儀和配套Bigdye測(cè)序試劑盒完成。

1.2.324 h動(dòng)態(tài)血壓(24 h ABPM)監(jiān)測(cè)采用美國(guó)Suntech公司無創(chuàng)式動(dòng)態(tài)血壓儀。ABPM袖帶固定于右上肢，白天(6AM~10PM)每30 min、夜間(10PM~6AM)每45 min自動(dòng)測(cè)試一次，記錄時(shí)間不少于23 h，得到至少42組數(shù)據(jù)。輸入計(jì)算機(jī)，由Suntech軟件處理數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)白天、夜間、24 h SBP、24 h DBP及平均動(dòng)脈壓(MAP)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1AT2R基因多態(tài)性AT2R A1675G基因可分為：AA型(野生型)、AG型(雜合突變型)、GG型(純和突變型)。見圖1，圖2。

2.2兩組AT2R A1675G基因基因型及等位基因分布比較EH組AA型、AG型和GG型頻率與NT組比較差異顯著(P< 0.05)；EH組等位基因A、G頻率與老年NT組比較差異顯著(P<0.05)。見表2。

2.3AT2R A1675G基因多態(tài)性與老年EH患者動(dòng)態(tài)血壓水平的關(guān)系白天、夜間及24 h SBP，白天、夜間及24 h MAP，白天的DBP在3種基因型間比較，差異顯著(P均<0.05)；將AG與GG合并為一組與AA組進(jìn)行比較，白天、夜間及24 h SBP，白天、夜間及24 h MAP，白天的DBP在AG+GG組明顯低于AA組(P< 0.05)。見表3。

圖1　擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)12%聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果

圖2　各基因型測(cè)序結(jié)果

組別n基因型〔n(%)〕AAAGGG等位基因頻率(%)AGEH組8748(55.1)16(18.4)23(26.4)64.435.6NT組8323(27.7)18(21.7)42(50.6)38.661.4χ2/P值14.39/<0.05 11.34/<0.05

表3　不同基因型老年EH患者動(dòng)態(tài)血壓水平比較±s,mmHg)

與AA基因型比較：1)P<0.05；將AG與GG合并為一組與AA組進(jìn)行比較：2)P<0.05

3討論

高血壓是導(dǎo)致老年人腦卒中、冠心病、充血性心力衰竭、腎衰竭、主動(dòng)脈夾層等疾病的發(fā)病率和致死率增高的主要危險(xiǎn)因素，嚴(yán)重影響老年人的健康和生活質(zhì)量〔3〕。RAAS在高血壓發(fā)病中起重要的作用，AngⅡ是RAAS的主要效應(yīng)物質(zhì)，AngⅡ的大多數(shù)功能與AT1R有關(guān)〔4〕，如血管舒縮、水鹽代謝、心肌和血管壁纖維化、內(nèi)皮素釋放等〔5〕。近年來研究發(fā)現(xiàn)，AT2R與AT1R存在拮抗性交互作用〔6〕，AT2R可與G1蛋白相耦聯(lián)抑制細(xì)胞增殖，使血管擴(kuò)張，其在心肌肥厚、心肌梗死、心肌病、心力衰竭等病理狀態(tài)下表達(dá)增加〔7，8〕。

本研究結(jié)果說明G等位基因具有保護(hù)作用，能夠防止高血壓的發(fā)生，這與國(guó)外有關(guān)報(bào)道相一致〔9〕，提示AT2R基因A1675G與山東省濰坊地區(qū)老年EH有相關(guān)性。對(duì)老年EH組行24 h ABPM，結(jié)果提示G等位基因?qū)ρ獕核降挠绊?，特別是與老年EH收縮壓的降低有關(guān)。

RAS的活性隨年齡的增長(zhǎng)而呈下降趨勢(shì),老年EH多屬收縮性高血壓。AT2R通過緩激肽/NO依賴機(jī)制介導(dǎo)擴(kuò)張血管及抑制心肌纖維化的功能〔10〕。而攜帶AT2R 1675G等位基因的個(gè)體可表達(dá)較多的AT2R蛋白質(zhì)，從而在老年EH中起到保護(hù)作用〔11〕。本研究?jī)H分析了1個(gè)多態(tài)位點(diǎn)與動(dòng)態(tài)血壓的關(guān)系，并且未排除低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等因素對(duì)動(dòng)態(tài)血壓的影響造成的，因此有待于進(jìn)行多基因突變位點(diǎn)聯(lián)合分析AT2R基因位點(diǎn)多態(tài)性與老年EH患者動(dòng)態(tài)血壓的相關(guān)性。

4參考文獻(xiàn)

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〔2013-09-01修回〕

(編輯安冉冉/曹夢(mèng)園)

〔中圖分類號(hào)〕R541

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)03-0575-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.03.026

·心、腦血管及代謝性疾病·