莫鎮(zhèn)濤， 葉仕超， 申承廷

(遵義醫(yī)學(xué)院 珠海校區(qū)， 廣東 珠海 519041)

珠海生產(chǎn)太子參質(zhì)量的初步評價

莫鎮(zhèn)濤， 葉仕超， 申承廷

(遵義醫(yī)學(xué)院 珠海校區(qū)， 廣東 珠海 519041)

為初步評價太子參在珠海生產(chǎn)的可能性，測定了珠海生產(chǎn)太子參的總灰分含量、水溶性浸出物和環(huán)肽B含量。結(jié)果表明：珠海太子參藥材薄層色譜鑒別與標(biāo)準藥材一致，水分含量為8.4%、總灰分為2.3%、水溶性浸出物為45.6%，符合標(biāo)準規(guī)定；太子參中環(huán)肽B的含量為0.0167%，且與其他產(chǎn)地太子參藥材差異不大。結(jié)論：珠海生產(chǎn)太子參符合《中華人民共和國藥典》2010年版的相關(guān)要求，太子參在珠海種植具有一定的發(fā)展空間。

太子參； 質(zhì)量評價； 薄層色譜； 水溶性浸出物； 珠海

太子參也叫孩兒參，為石竹科植物孩兒參的干燥塊根[1],具有益氣健脾、生津潤肺的療效，與人參比較，其補氣力度平和，具有扶正但不戀邪的優(yōu)點，特別適合氣陰兩虛體質(zhì)的人使用。南方地區(qū)氣候濕熱時間較長，容易耗傷氣陰，太子參的需要量大，市售價格較高，10 g價格在3元以上。因此推廣太子參種植能帶來較大的社會經(jīng)濟效益。太子參喜愛溫和、濕潤、涼爽的氣候，生長于疏松肥沃、腐殖質(zhì)豐富的砂壤田土，或略帶傾斜的向北山坡旱地[2]。珠海屬于亞熱帶季風(fēng)海洋性氣候，具有冬無嚴寒，夏無酷熱，溫暖濕潤的氣候特點,具有較為適宜太子參生長的條件。珠海市丘陵面積占市陸地面積的58.68%，具有較多腐殖質(zhì)豐富的旱坡地，目前未見珠海種植太子參的報道。因此，筆者將貴州太子參種苗引種到珠海栽種，按《中華人民共和國藥典》2010年版中太子參相關(guān)指標(biāo)進行檢測，初步評價太子參在珠海生產(chǎn)的可能性。

1 材料與方法

1.1 材料

儀器：LC-20AD型高效液相色譜儀(日本島津)，Multivapor P-6型平行蒸發(fā)儀(瑞士步琦有限公司BUCHI)，SRJX型馬弗爐(上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司)，TS-2000A型搖床(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)，JOYN-6240A型超聲波清洗器(上海喬躍電子有限公司)，420型三用水箱(常州澳華儀器有限公司)，Sartorius BSA124S電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)，XMTD-8222型烘箱(上海精宏實驗設(shè)備有限公司)。

試藥：太子參種源來自貴州，取常規(guī)方法種植于珠海的太子參備用。太子參藥材分別來自貴州、江蘇和福建，生產(chǎn)企業(yè)和批號分別是：藥圣堂制藥有限公司，批號140301；蘇州市天靈中藥飲片有限公司，批號130325；康美藥業(yè)股份有限公司，批號140503301；太子參對照藥材來自中國食品藥品檢定研究院，批號121004。甲醇(分析純)購于天津市富宇精細化工有限公司，正丁醇(分析純)購于汕頭市光華化工廠，冰醋酸(分析純)購于天津市大茂化學(xué)試劑廠，乙腈(HPLC級)購于美國天地有限公司(TEDIA)，純凈水購于華潤怡寶飲料(中國)有限公司，水合茚三酮(分析純)購于天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心，95%乙醇(分析純)購于天津市大茂化學(xué)試劑廠。

1.2 薄層色譜(TLC)鑒別

分別取珠海、江蘇、貴州、福建組太子參藥材適量于烘箱60℃烘3 h，取出后打粉，過二號篩。分別用電子天平稱取藥材粉末1 g，按《中華人民共和國藥典》2010年版附錄VIB的TLC法進行鑒別。

1.3 水分、總灰分及水溶性浸出物測定

1.3.1 水分 取各組樣品粉末2 g，每種樣品制兩份，精密稱定，按《中華人民共和國藥典》2010年版附錄IX H第一法(烘干法)進行測定。

1.3.2 總灰分 稱取各樣品粉末2 g，每種樣品制2份，精密稱定，按《中華人民共和國藥典》2010年版附錄IX K中的總灰分測定法進行測定。

1.3.3 水溶性浸出物 取各樣品粉末4 g，每種樣品制2份，精密稱定，按《中華人民共和國藥典》2010年版附錄IX K中的冷浸法進行測定。

1.4 環(huán)肽B含量的測定

1.4.1 供試品溶液的制備 分別稱取各組樣品粉末(過4號篩)2 g，精密稱定，用移液管精密加入甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理(功率240 W，頻率40 KHz)45 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾紙濾過，用移液管精密量取續(xù)濾液25 mL，置平行蒸發(fā)儀中，濃縮至干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

1.4.2 標(biāo)準品貯備液的制備 精密稱定太子參環(huán)肽B標(biāo)準品8.8 mg，用甲醇定容至10 mL量瓶中作為標(biāo)準品貯備液。

1.4.3 色譜條件[3]色譜柱為GL sciences Inc的Inertsil ods-sp(4.6 mm×150 mm，5 μm)，以水為流動相A，乙腈為流動相B；梯度洗脫條件：0～10 min，A相90%～75%，B相10%～25%；10～30 min，A相75%～60%，B相25%～40%；30～35 min，A相60%～55%，B相40%～45%；流速0.9 mL/min，柱溫30℃，檢測波長203 nm，進樣量20 μL。

1.4.4 標(biāo)準曲線的繪制 分別用移液管精密吸取標(biāo)準品貯備液0.1 mL、0.4 mL、0.8 mL、1.6 mL和3.2 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，分別過0.22 μm微孔濾膜，精密吸取20 μL，按上述色譜條件作HPLC分析。在標(biāo)準曲線的繪制結(jié)果中，以標(biāo)準品的峰面積積分值(y)與相應(yīng)的濃度(x)進行線性回歸。

1.4.5 方法學(xué)考察

1) 精密度試驗：用移液管精密吸取標(biāo)準品貯備液0.4 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，過0.22 μm微孔濾膜，按上述色譜條件，重復(fù)進樣6次，每次20 μL，記錄峰面積。

2) 穩(wěn)定性試驗：取珠海組太子參樣品溶液，分別于0、2 h、4 h、8 h、16 h及24 h進行測定，進樣20 μL，記錄峰面積。

3) 重復(fù)性試驗：取珠海組太子參樣品粉末5份，按1.4的方法進行樣品制備，進樣20 μL，記錄峰面積。

加樣回收率試驗：分別量取1 mL已知含量的珠海組太子參樣品溶液5份，加入相同含量的標(biāo)準品溶液，混勻，過0.22 μm微孔濾膜，按上述色譜條件進行測定，記錄峰面積。

1.4.6 樣品測定 吸取各供試品溶液，進樣20 μL，記錄峰面積，根據(jù)相應(yīng)線性關(guān)系計算各樣品中環(huán)肽B的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 薄層色譜(TLC)鑒別

從圖1看出，種植于珠海的太子參和其他省份的樣品，與對照藥材在相應(yīng)的位置上顯現(xiàn)出相同斑點，表明珠海的太子參薄層色譜鑒別與標(biāo)準藥材一致。

圖1 不同產(chǎn)地太子參的薄層色譜

2.2 水分、總灰分和水溶性浸出物含量

根據(jù)《中國藥典》2010年版相關(guān)規(guī)定，太子參藥材水分不得超過14%，水溶性浸出物不得少于25.0%，總灰分不得超過4.0%。表1的測定結(jié)果表明：珠海及其他各省供試藥材均能滿足藥典對太子參水分規(guī)定的標(biāo)準、太子參總灰分標(biāo)準和水溶性浸出物標(biāo)準。其中，珠海種植的太子參的水溶性浸出物最高，達45.6%，遠遠超過藥典規(guī)定的25%。

表1 不同產(chǎn)地太子參藥材的水分、總灰分和水溶性浸出物含量

Table 1 Contents of moisture, total ash and water soluble extracts in P.heterophylla from different producing areas %

注：A為太子參環(huán)肽B標(biāo)準品，B為珠海產(chǎn)太子參，1 為太子參環(huán)肽B峰。

Note: A, heterophyllin B standards; B,P.heterophyllafrom Zhuhai; 1, Heterophyllin B peak ofP.heterophylla.

圖2 太子參的HPLC圖譜

Fig.2 HPLC spectrogram ofP.heterophylla

2.3 不同產(chǎn)地太子參中環(huán)肽B的含量

2.3.1 樣品的分離度及方法學(xué)考察 從圖2看出，樣品的分離度良好，太子參環(huán)肽B的保留時間約為27.5 min。以標(biāo)準品的峰面積積分值(y)與相應(yīng)的濃度(x)進行線性回歸，得回歸方程為y=75877x+59316(r=0.999 3)，進樣濃度在8.8～281.6 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。精密度試驗RSD=0.72%，儀器的精密度良好。穩(wěn)定性試驗RSD=1.87%，樣品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定。重復(fù)性試驗RSD=1.42%，說明試驗方法重復(fù)性良好。加樣回收率均值為98.79%，RSD=1.01%(表2)。

2.3.2 環(huán)肽B的含量 根據(jù)相應(yīng)線性關(guān)系計算各樣品中環(huán)肽B的含量(表3)，珠海組太子參中環(huán)肽B含量約為0.0167%，略低于其他產(chǎn)地太子參的含量。

表2 珠海生產(chǎn)太子參中環(huán)肽B的加樣回收率

注：環(huán)肽B的平均回收率為RSD=1.01%。

Note:The average recovery of cyclic peptide B is 1.01%.

表3 不同產(chǎn)地太子參中環(huán)肽B的含量

Table 3 Heterophyllin B content in P.heterophylla from different producing areas %

3 結(jié)論與討論

薄層色譜鑒別結(jié)果顯示，珠海生產(chǎn)及其他各產(chǎn)地的太子參與標(biāo)準藥材斑點一致，說明珠海生產(chǎn)及其他各產(chǎn)地太子參均含有與標(biāo)準藥材一致的物質(zhì)，根據(jù)斑點顯色的大小、清晰程度，初步表明其所含成分相差不大。中藥材的水分含量多少直接影響藥材的質(zhì)量[4]，中藥材含水量過高，會出現(xiàn)蟲害、霉變、潮解等變質(zhì)問題，所以中藥材水分的測定也成為判斷藥材質(zhì)量合格的標(biāo)準之一，根據(jù)不同產(chǎn)地太子參藥材水分的測定結(jié)果，珠海自種太子參藥材(水分為8.4%)及其他各產(chǎn)地太子參藥材水分含量均符合《藥典》2010年版規(guī)定。中藥材的總灰分反映藥材的雜質(zhì)含量[5]，所以總灰分的測定也成為藥材質(zhì)量合格的重要因素之一。測定結(jié)果表明，珠海生產(chǎn)太子參藥材(總灰分為2.3%)及各產(chǎn)地太子參藥材的總灰分均符合《藥典》2010年版要求。太子參水提物含有多糖和多種人體必需氨基酸等成分[6,7]?，F(xiàn)代藥理研究表明，太子參多糖具有抗應(yīng)激、抗疲勞、降血糖、降血脂、抗氧化等作用[8-10]。因此，太子參水溶性浸出物也是反映太子參品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。珠海生產(chǎn)太子參藥材的水溶性浸出物經(jīng)檢查為45.6%，遠遠高于《藥典》2010年版水溶性浸出物不得少于25%的規(guī)定，其他產(chǎn)地太子參藥材也符合標(biāo)準。珠海組太子參藥材與其他產(chǎn)地藥材水分、總灰分、水溶性浸出物含量雖存在一定差異，但差異不大。珠海太子參的環(huán)肽B含量為0.0167%，略低于《藥典》2010年版0.02%的規(guī)定。但是由于環(huán)肽B與太子參質(zhì)量的相關(guān)性還有待肯定，在《藥典》2010年版的第一增補本中取消了太子參環(huán)肽B作為其藥材質(zhì)量評價的指標(biāo)。

Preliminary Evaluation of Quality ofPseudostellariaheterophyllaGrown in Zhuhai

MO Zhentao, YE Shichao, SHEN Chengting

(ZhuhaiCampusofZunyiMedicalCollege,Zhuhai,Guangdong519041,China)

To evaluate the possibility of producingP.heterophyllain Zhuhai, total ash content, water-soluble extracts and heterophyllin B content ofP.heterophyllawere determined. Results: The component ofP.heterophyllagrown in Zhuhai was in accordance with standard medicinal materials in TLC identification. Contents of moisture, total ash and water soluble extracts were respectively 8.4%, 2.3% and 45.6%,which met the standards requirements. Content of heterophyllin B was 0.0167%, which was of little difference withP.heterophyllain other producing areas. Conclusion: The quality ofP.heterophyllacan meet the standard requirements of Chinese Phannacopoeia 2010.P.heterophyllaplanted in Zhuhai has certain development space.

Pseudostellariaheterophylla； quality evaluation； TLC； water soluble extracts； Zhuhai

2015-06-09； 2015-12-27修回

貴州省聯(lián)合基金重點項目[黔科合J字LKZ(2013)04]；遵義醫(yī)學(xué)院博士啟動基金(F-590)

莫鎮(zhèn)濤(1983-)，男，副教授，博士，從事中藥新藥開發(fā)研究。E-mail：mozhentao1@163.com

1001-3601(2016)01-0036-0137-03

S567

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