左　軍，宋曉冬，徐建華

(吉林省長(zhǎng)春市一汽總醫(yī)院/吉林大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林長(zhǎng)春 130011)

?

·經(jīng)驗(yàn)交流·

Vitros5600檢測(cè)血漿肌鈣蛋白I 穩(wěn)定性及假陽(yáng)性的原因分析

左軍，宋曉冬，徐建華

(吉林省長(zhǎng)春市一汽總醫(yī)院/吉林大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林長(zhǎng)春 130011)

摘要:目的探討Vitros5600檢測(cè)肌鈣蛋白I(CTNI)中存在的假陽(yáng)性及不穩(wěn)定因素。方法選取今年5月份出現(xiàn)重復(fù)性差，假陽(yáng)性的20份標(biāo)本進(jìn)行比較分析。結(jié)果20份標(biāo)本中，有些標(biāo)本首次檢測(cè)結(jié)果偏高，有的甚至達(dá)到危急值，而當(dāng)再次復(fù)檢后結(jié)果正常或略高，與第一次檢測(cè)結(jié)果相差甚遠(yuǎn)。結(jié)論Vitros5600檢測(cè)CTNI重復(fù)性差、假陽(yáng)性及不穩(wěn)定性結(jié)果是多方面因素所致，為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可信度，必須從標(biāo)本采集到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

關(guān)鍵詞:肌鈣蛋白I；不穩(wěn)定性；假陽(yáng)性

由于心肌肌鈣蛋白(CTN)特異地分布于心肌組織，作為心肌損傷的高敏感和特異性標(biāo)志物，CTN對(duì)于檢測(cè)急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者心肌缺血及危險(xiǎn)分級(jí)具有重要意義。目前檢測(cè)CTN的方法很多，如電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法(ECLIA) 、酶聯(lián)熒光分析法等[1]。Vitros5600進(jìn)行血漿CTNI定量檢測(cè)已被廣泛應(yīng)用，它采用的是intelliccheck技術(shù)(化學(xué)發(fā)光法)應(yīng)用特異性免疫檢測(cè)單克隆抗體[2-3]。其敏感度很高，線性范圍在0.003～66.700 μg/L，檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性顯得尤為重要。本文主要探討關(guān)于使用Vitros5600檢測(cè)CTNI時(shí)，發(fā)現(xiàn)的不穩(wěn)定及其假陽(yáng)性的一些問(wèn)題，以示在報(bào)告結(jié)果時(shí)應(yīng)該加以注意，防止誤報(bào)。

1材料與方法

1.1儀器與試劑美國(guó)強(qiáng)生Vitros5600生化免疫分析儀及檢測(cè)試劑、定標(biāo)液、質(zhì)控品。

1.2檢測(cè)方法在經(jīng)過(guò)儀器調(diào)試定標(biāo)完成之后，進(jìn)行質(zhì)控檢測(cè)，質(zhì)控在控后進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)。采集患者新鮮無(wú)溶血、乳糜、黃疸的全血4 mL，離心，用血清進(jìn)行直接檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Excel2007軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2結(jié)果

在本院使用Vitros5600 2年期間檢測(cè)患者CTNI，選取今年5月份出現(xiàn)重復(fù)性差，假陽(yáng)性的20份標(biāo)本進(jìn)行比較分析，研究發(fā)現(xiàn)有些標(biāo)本首次檢測(cè)結(jié)果偏高，有的甚至達(dá)到危急值，而再次復(fù)檢后結(jié)果正?；蚵愿?，與第一次檢測(cè)結(jié)果相差甚遠(yuǎn)，見(jiàn)表1。

表1　　20份重復(fù)檢測(cè)2次標(biāo)本及同時(shí)定值質(zhì)控品反測(cè)結(jié)果

3討論

本研究結(jié)果顯示，在使用Vitros5600檢測(cè)患者血清CTNI一段時(shí)間后，某一階段頻繁出現(xiàn)重復(fù)性差、穩(wěn)定性差及假陽(yáng)性，而質(zhì)控和批量檢測(cè)對(duì)比竟然沒(méi)有明顯變化。其中，在今年5～6月份檢測(cè)的1 200份標(biāo)本中假性升高總數(shù)為50例，占4.12%，最為明顯。而真正由心肌梗死問(wèn)題和其他心臟疾病方面原因引起的升高患者僅占35%，其余患者經(jīng)過(guò)二次復(fù)檢證實(shí)為正常結(jié)果。為什么會(huì)出現(xiàn)首次檢測(cè)結(jié)果與再次復(fù)檢存在較大差異呢？筆者考慮是不是由于試劑批號(hào)不同所引起的差異，然而，采用不同批號(hào)的試劑進(jìn)行比對(duì)也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯差異。對(duì)此也用健康患者血清進(jìn)行了比對(duì)，也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)很大的差異，連續(xù)進(jìn)行標(biāo)本的重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果顯示穩(wěn)定。之后筆者考慮是不是由于儀器設(shè)備本身的因素，例如光源、檢測(cè)模塊、吸樣針、吸樣量等多方面因素造成的，更換相關(guān)儀器部件，再進(jìn)行檢測(cè)，也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)具體引起這種現(xiàn)象的主要因素。

從標(biāo)本采集開(kāi)始，仔細(xì)研究是不是由于采血量、離心力及離心時(shí)間不夠，或者由于纖維蛋白凝塊，或者有極微小的凝塊所致。筆者對(duì)每一份標(biāo)本離心后采用手工方式徹底分離血清以達(dá)到減少微凝到最低程度的目的。此外，同樣選取無(wú)溶血、無(wú)乳糜、無(wú)黃疸的標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)也考慮到藥物方面的影響，以及臨床護(hù)士采集標(biāo)本時(shí)的一些影響因素，經(jīng)過(guò)分離血清用測(cè)試小杯將血清分離進(jìn)行測(cè)試，但還是或多或少，不定期地出現(xiàn)2次檢測(cè)結(jié)果不符及假陽(yáng)性的現(xiàn)象。

之后筆者考慮過(guò)多的分離步驟也許會(huì)影響結(jié)果的重復(fù)性及穩(wěn)定性，采用增加標(biāo)本采集量的方法，每份標(biāo)本采血量不少于4 mL，離心時(shí)間不少于8 min，離心速度不低于4 000 r/min，待血清完全分離好后直接上機(jī)檢測(cè)。經(jīng)過(guò)這些嘗試后雖然出現(xiàn)假陽(yáng)性頻率略低，但還是存在一定的假陽(yáng)性率。

經(jīng)過(guò)和廠家技術(shù)人員共同分析，以及從他們那兒吸取經(jīng)驗(yàn)，考慮到室內(nèi)環(huán)境的塵埃是不是也會(huì)影響到結(jié)果的穩(wěn)定性。因此，本院檢驗(yàn)科定期清潔空調(diào)，并且在機(jī)房?jī)?nèi)加裝空氣凈化器以減少對(duì)檢測(cè)時(shí)的影響。綜合上訴各種原因，筆者認(rèn)為造成這種重復(fù)性差、假陽(yáng)性及不穩(wěn)定性結(jié)果是多方面因素所致。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可信度，必須從標(biāo)本采集到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。對(duì)于這種靈敏度高的檢測(cè)項(xiàng)目必須注意結(jié)果的監(jiān)測(cè)，一方面在平時(shí)要做好儀器設(shè)備的保養(yǎng)維護(hù)，另一方面對(duì)于不同批號(hào)的試劑應(yīng)做對(duì)比，堅(jiān)持做好室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)評(píng)。

參考文獻(xiàn)

[1]張志榮，李強(qiáng).老年膿毒癥患者血漿BNP和肌鈣蛋白I檢測(cè)的臨床價(jià)值[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2015，9(19):19-21.

[2]張振輝，陶麗麗，陳偉燕，等.肌鈣蛋白-I、B型利鈉肽、血乳酸對(duì)膿毒癥心功能障礙患者嚴(yán)重程度及預(yù)后評(píng)估的價(jià)值[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2014，33(9):1424-1426.

[3]李振華，董磊，王國(guó)興，等.腦利鈉肽、肌鈣蛋白T和I監(jiān)測(cè)對(duì)重癥膿毒癥和膿毒癥休克預(yù)后的意義[J].中華急診醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 21(9):1016-1021.

(收稿日期：2015-10-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.063

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1673-4130(2016)03-0419-02