陳 慧

( 江西省上饒市立醫(yī)院， 江西 上饒 334000)

HPLC法測定頭孢呋辛酯中高分子聚合物含量

陳 慧

( 江西省上饒市立醫(yī)院， 江西 上饒 334000)

目的 考察高效液相測定法用于頭孢呋辛酯中高分子聚合物測定的可行性。方法 色譜柱：聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物的填充色譜柱，檢測波長：280 nm，進樣量：20 μL；流動相：0.032 mol/L LiBr溶液;流量為0.30 mL·min-1。結(jié)果 頭孢呋辛酯色譜條件經(jīng)方法學考察均符合要求，在0.005 4～1.532 2 mg·mL-1范圍內(nèi),溶液質(zhì)量濃度與聚合物峰面積呈線性相關(guān)，回歸方程為：y=64 217x-41 214(r=0.999 6)。結(jié)論 頭孢呋辛酯中高分子聚合物濃度可用高效液相色譜的方法測定，所采用的方法準確可靠，可考慮用于頭孢呋辛酯及其類似物的高分子聚合物測定。

頭孢呋辛酯；高分子聚合物；高效液相

β-內(nèi)酰胺類抗生素是目前使用最為廣泛的抗感染藥物，其常見的不良反應(yīng)是過敏反應(yīng)，多年來的研究已證明引發(fā)該過敏反應(yīng)的過敏原不是抗生素本身，而是其中的高分子雜質(zhì)，有時甚至會引發(fā)毒性反應(yīng)，嚴重危害患者的生命安全，因此國內(nèi)外對 β-內(nèi)酰胺類抗生素的高分子雜質(zhì)的控制非常重視[1]。此次實驗采用聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物填充柱來分離高分子聚合物，并采用高效液相色譜法進行檢測，相關(guān)結(jié)果報道如下。

1 材 料

1.1 儀器與試藥

島津 LC-20A 型高效液相色譜儀；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、四氫呋喃、無水溴化鋰均由國藥集團化學試劑有限公司提供，均為色譜醇； 頭孢呋辛酯對照品(中國食品藥品檢定研究院)；頭孢呋辛酯膠囊(海南日中天制藥有限公司，批號為：140513、140621、140918)。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法學驗證

2.1.1 色譜條件 色譜柱為：聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物的填充色譜柱，檢測波長：280 nm，進樣量：20 μL；流動相：0.032 mol/L LiBr溶液(稱取2.77 g LiBr加DMF溶解并稀釋至1 000 mL即得)；流量為0.30 mL·min-1，25 ℃下進行檢測。

2.1.2 溶液的制備

(1)供試品溶液的制備。 精密稱取適量混勻的頭孢呋辛酯膠囊內(nèi)容物，加入流動相溶解并稀釋為含頭孢呋辛約1.0 mg·mL-1的樣品溶液。

(2)對照溶液的制備。 精密量取1 mL供試品溶液，置于100 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻即得。

(3)對照品溶液的制備。 精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，用流動相溶解并稀釋成0.01 mg·mL-1溶液。

2.1.3 系統(tǒng)適用性試驗

(1)空白溶劑的篩選。 選取流動相時，不會出現(xiàn)任何雜質(zhì)峰，對測定不會造成影響，因此在制作供試品時選擇的空白溶劑為流動相。

(2)塔板數(shù)、拖尾因子、分離度。經(jīng)圖譜分析顯示，理論塔板數(shù)為7 821，拖尾因子為1.01，且各峰間的分離度良好。

(3)方法學考察。參考藥典行重復(fù)性、精密度考察，RSD分別為1.1%、0.8%，符合標準規(guī)定。

(4)線性關(guān)系考察。參考藥典行線性關(guān)系考察，得線性方程為:y=64 217x-41 214(r=0.999 6)。結(jié)果表明，頭孢呋辛酯質(zhì)量濃度在0.005 4～1.532 2 mg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

(5)穩(wěn)定性試驗。 參考藥典于0、0.5、1、2、3、4 h進行精密度考察，對照品溶液峰面積的RSD為1.8%(小于2.0%)，符合標準規(guī)定。供試品溶液在常溫下2 h后各個時間點其高分子聚合物雜質(zhì)的含量都在明顯地增加，說明供試品溶液在常溫下不穩(wěn)定，須臨用新制，最好是低溫放置。

2.1.4 供試品溶液的質(zhì)量濃度與聚合物測定結(jié)果的相關(guān)性考察 參考藥典不同質(zhì)量濃度供試品稀釋后的溶液，以質(zhì)量濃度x(mg/mL)為橫坐標，以峰面積y為縱坐標，進行線性回歸。得到回歸方程為：y=619 277x-5 129.3，相關(guān)性r=0.999 6。結(jié)果表明，溶液質(zhì)量濃度和聚合物峰面積間的相關(guān)性較好。

2.2 樣品中頭孢呋辛聚合物的檢查

在同一色譜條件下分別對頭孢呋辛酯對照品溶液與3批頭孢呋辛酯膠囊供試品溶液及其相應(yīng)的對照溶液，采用峰面積歸一化法和自身對照法(不加校正因子)，對供試品內(nèi)含有的聚合物總量進行測定。

3 結(jié) 果

見表1。

表1 頭孢呋辛酯膠囊樣品中高分子聚合物含量測定結(jié)果 單位:%

4 討 論

頭孢呋辛酯(C16H16N4O8S)屬于脂溶性化合物，在水性溶劑中溶解度極低，經(jīng)前期文獻調(diào)研，本文考慮用DMF及LiBr，并發(fā)現(xiàn)流動相做溶劑時，不產(chǎn)生干擾；色譜柱選擇時，我們結(jié)合文獻[2]，考慮選擇聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物填充柱，經(jīng)方法學考察可知，本次實驗所選方法準確性高、精密度好、重現(xiàn)性和相關(guān)性均符合相關(guān)要求，且比較自身對照法和面積歸一化法，發(fā)現(xiàn)兩組結(jié)果基本一致，提示二者均可用于其含量計算中。需要注意的是高分子聚合物，會隨著時間延長而含量增加，故實驗過程最好現(xiàn)配現(xiàn)測，以保證結(jié)果準確。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[M].北京:化學工業(yè)出版社,2010：191.

[2]王玲, 胡朝新, 陸紅彬,等. 高效液相色譜法測定頭孢呋辛酯中高分子聚合物[J]. 藥學與臨床研究, 2012, 20(5):467-469.

Determination of Cefuroxime Ester Polymer by HPLC

CHEN Hui

(Shangrao Hospital,Jiangxi Province，Jiangxi Shangrao 334000，China)

Objective To investigate the feasibility of HPLC assay for the cefuroxime ester polymer. Methods Column: styrene-divinylbenzene copolymer packed columns, the detection wavelength: 280 nm, injection volume: 20 μL; mobile phase: 0.032 mol/L LiBr solution; flow rate of 0.30 mL·min-1. Results Cefuroxime ester chromatographic conditions through methodological study are in line with the requirements in the 0.005 4～1.532 2 mg·mL-1range, the concentration of the polymer peak area was linear correlation, regression equation:y=64 217x-41 214(r=0.999 6). Conclusion Cefuroxime ester polymer concentration can be measured using the HPLC method, the measuring method method is reliable and can be considered for the determination of cefuroxime ester polymer and the like.

cefuroxime ester; polymers; HPLC

1006-446X(2016)03-0022-03

2015 - 10 - 19

R 917

A