白 軍，劉淑紅

（1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程分院，陜西 楊凌 712100；2.楊凌金海生物技術(shù)有限公司，陜西 楊凌 712100）

H 9亞型禽流感疫苗研究進(jìn)展

白 軍1，劉淑紅2

（1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程分院，陜西 楊凌 712100；2.楊凌金海生物技術(shù)有限公司，陜西 楊凌 712100）

主要介紹了H9亞型禽流感病毒的病原學(xué)特點(diǎn)、流行病學(xué)，總結(jié)了近些年國內(nèi)外H9亞型禽流感疫苗的研究概況，以期為H9亞型禽流感疫苗的研究及H9亞型禽流感的防控提供理論依據(jù)。

H9亞型禽流感病毒；流行病學(xué)；禽流感疫苗

1 禽流感病毒的病原學(xué)特點(diǎn)

禽流感病毒分類上屬正黏病毒科，流感病毒屬，核酸類型是單鏈負(fù)股RNA。流感病毒囊膜表面上有2種糖蛋白纖突，分別是血凝素和神經(jīng)氨酸酶。根據(jù)這2種纖突的不同，可將禽流感病毒分為16 個(gè) HA（H1～H16）亞型和 9 個(gè) NA（N1～N9）亞型［1］。H5和H7亞型由于致病性比較強(qiáng)，可引起禽類的大批死亡，同時(shí)可以感染人類，并導(dǎo)致人的死亡，所以稱為高致病性禽流感。H9亞型為低致病性禽流感，感染后不會導(dǎo)致群體大批死亡，但是感染率比較高，會導(dǎo)致產(chǎn)蛋率大幅度下降，給養(yǎng)殖業(yè)也會帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí)，流感病毒變異速度極快，H9亞型禽流感極有可能由原來的低致病性禽流感進(jìn)化為致病能力更強(qiáng)的毒株［2］。陳陸的研究發(fā)現(xiàn)，H9N2還具有免疫逃避的特點(diǎn)，這些特點(diǎn)決定H9亞型禽流感往往會導(dǎo)致免疫失?。?］。

2 H9亞型禽流感的流行病學(xué)特點(diǎn)

1994年，廣東省某雞場分離到H9亞型禽流感病毒。自此以后，全國各地區(qū)均陸續(xù)報(bào)道從發(fā)病的雞體內(nèi)分離到H9亞型禽流感病毒。截至目前，H9亞型禽流感病毒在我國普遍流行，大部分的省份都報(bào)道有該病的發(fā)生。該病發(fā)生后，其特點(diǎn)是感染率高、流行范圍廣、傳播速度快、死亡率低、經(jīng)濟(jì)損失大。如果疫苗使用得當(dāng)，可將該病在一定范圍內(nèi)得到控制。但是，由于疫苗質(zhì)量、機(jī)體自身及其他因素的影響，該病的發(fā)生逐步呈現(xiàn)非典型性，一旦發(fā)病就會導(dǎo)致極大的經(jīng)濟(jì)損失。

H9亞型禽流感的流行有一定的季節(jié)性，張丹俊認(rèn)為在冬春季節(jié)禽流感發(fā)病率較高［4］；2010—2011年，岳旭龍調(diào)查了在河南省部分地區(qū)H9亞型禽流感的流行概況，結(jié)果顯示：在秋冬季節(jié)更替時(shí)，H9亞型禽流感病毒的陽性率暴增，1月時(shí)達(dá)到峰值［5］；趙坤坤認(rèn)為在冬季1、2月及夏季6、7月，H9亞型低致病性禽流感病毒的檢出率均較低［6］。這些調(diào)查結(jié)果顯示，H9亞型禽流感病毒多流行于天氣較冷的冬季。

鳥類也能感染禽流感病毒，所有已知亞型的禽流感病毒均可以從野鳥體內(nèi)分離到，所以人們認(rèn)為野鳥是禽流感病毒天然的儲存庫。北美和歐洲的一些國家和地區(qū)對野鳥進(jìn)行了禽流感檢測，發(fā)現(xiàn)野鳥無明顯癥狀，但卻是最可怕的病毒攜帶者［7］。當(dāng)野鳥遷徙時(shí)，禽流感病毒就可以在國與國之間，甚至大陸與大陸之間進(jìn)行傳播，這也是該病極難控制的原因之一。

近年來，不斷有報(bào)道人感染了H9亞型禽流感病毒。在福建省、上海市浦東等地區(qū)，一份針對與禽類有接觸史的職業(yè)暴露人群的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，這些人群中H9亞型禽流感病毒抗體陽性的比例分別為 4.12%和 5.1%［8］。

3 H9亞型禽流感疫苗的研究進(jìn)展

H9亞型禽流感致病力不強(qiáng)，很多人都在嘗試多種治療禽流感的方法，但是效果都不理想。所以，預(yù)防H9亞型禽流感發(fā)生與流行的最有效手段還是綜合性防控措施，最主要的就是疫苗接種。但是禽流感病毒變異速度快，血清型較多，給疫苗的研制帶來了巨大的困難。目前研制的疫苗主要有全病毒滅活疫苗、亞單位疫苗、重組載體疫苗、核酸疫苗等等。

現(xiàn)階段應(yīng)用最廣的、最常見的是全病毒滅活疫苗。一般是用甲醛滅活后，加入佐劑制成。滅活苗使用安全、工藝簡單、儲備較容易，還可以做成聯(lián)苗及多價(jià)苗，已經(jīng)被多個(gè)國家用來防控禽流感。景小冬分別將3株H9亞型禽流感病毒毒株用甲醛滅活后制成油乳劑滅活苗，免疫21 d后分別給試驗(yàn)雞攻擊近些年分離到的H9亞型禽流感病毒，試驗(yàn)雞均能獲得較好的保護(hù)，說明疫苗效果較好［9］。

重組載體疫苗就是將病毒重組入載體，載體在禽體內(nèi)復(fù)制的同時(shí)也表達(dá)病毒的保護(hù)性抗原，該疫苗有廣闊的市場和應(yīng)用前景。程堅(jiān)利用重組雞痘病毒進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明該疫苗能顯著抑制試驗(yàn)雞從泄殖腔排毒［10］；陳素娟成功構(gòu)建出可以同時(shí)抵抗H5、H9兩種亞型禽流感病毒的基因工程活載體疫苗，結(jié)果顯示，經(jīng)過滴鼻、點(diǎn)眼途徑免疫SPF雞后，該重組病毒能顯著抑制H9亞型禽流感病毒從氣管和泄殖腔排毒［11］。該疫苗具有免疫劑量小、安全、不需佐劑、成本低的特點(diǎn)，但是只適合用于首免。

亞單位疫苗為一種全新的疫苗種類，目前研發(fā)及生產(chǎn)成本較高，但是由于其安全、無毒，具有巨大的潛力。Pushko等提取流感病毒的HA、NA和M1基因，制成亞單位疫苗，免疫小鼠后發(fā)現(xiàn)該疫苗能有效抑制流感病毒在小鼠上呼吸道和肺部的復(fù)制［12］。

核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗。H9亞型禽流感DNA疫苗的研制亦取得了突破。劉麗萍將制備的H9N2亞型禽流感病毒DNA疫苗免疫1日齡試驗(yàn)雞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)雞無任何癥狀，疫苗安全性較好，用強(qiáng)毒攻擊試驗(yàn)雞群后，疫苗對試驗(yàn)雞亦具有較好的保護(hù)效果［13］。Pertmer證實(shí)核酸疫苗不受母源抗體的影響［14］。

臨床中可發(fā)生多個(gè)亞型禽流感病毒的混合感染，為了預(yù)防混合感染性禽流感，同時(shí)防止禽流感變異速度過快帶來的免疫失敗，許多人試圖研制出具有交叉保護(hù)的“通用疫苗”。而M2蛋白的發(fā)現(xiàn)為此鋪平了道路［15］。該蛋白是保守蛋白，利用該蛋白可以誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生中和抗體。ERNST等制備出M2eA表位疫苗，黏膜免疫后，再用H1N1、H9N2、H6N2等同源病毒進(jìn)行攻擊，均有較好的保護(hù)率［16］。通用疫苗具有抗禽流感多血清型的特點(diǎn)，應(yīng)用前景廣闊。

［1］FOUCHIER R A M，MUNSTER V，WALLENSTEN A，et al.Characterization of a novel influenza A virus hemagglutinin subtype（H16）obtained from black-headed gulls［J］.J Virol，2005，79（5）：2814-2822.

［2］鐘功勛，李雁冰，平繼輝，等.H9N2亞型禽流感病毒血凝素和神經(jīng)氨酸酶基因的遺傳分析［J］.中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2007，29（12）：946-949.

［3］陳陸，劉守川，趙軍，等.不同H9N2亞型禽流感病毒分離株致病力研究 ［J］. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，44（24）：5100-5107.

［4］張丹俊.禽流感研究的新變化與防控［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（22）：5874-5876.

［5］岳旭龍，陳禮朋，李雙亮，等.2010—2011年河南省部分地區(qū)H9亞型禽流感、新城疫和雞傳染性支氣管炎的流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（8）：72-76.

［6］趙坤坤，仲書官，趙國，等.2009—2012年華東地區(qū)家禽低致病性禽流感病毒的流行病學(xué)調(diào)查與分析［J］.中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2012，32（3）：345-349.

［7］SUAREZ D L.Evolution of avian influenza viruses［J］.Vet Microbiol，2003，74：15-27.

［8］楊式芹，張彩云，謝劍鋒，等.福建省2004—2008年職業(yè)暴露人群H9亞型禽流感病毒抗體血清流行病學(xué)調(diào)查［J］.中國人獸共患病學(xué)報(bào)，2010，26（12）：1145-1147.

［9］景小冬，章振華，李林，等.H9亞型禽流感病毒流行毒株交叉免疫攻毒保護(hù)試驗(yàn) ［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2010，37（6）：134-137.

［10］程堅(jiān)，劉秀梵，彭大新，等.共表達(dá)H9亞型禽流行性感冒病毒血凝素基因和雞Ⅱ型干擾素基因的重組雞痘病毒及其免疫效力［J］.病毒學(xué)報(bào)，2003，19（1）：52-58.

［11］陳素娟，石火英，孫蕾，等.共表達(dá)H5和H9亞型禽流行性感冒病毒血凝素基因的重組禽痘病毒及其免疫效力［J］.病毒學(xué)報(bào)，2005，21（4）：284-288.

［12］PUSHKO P， TUMPEY T M， BU F，et al.Influenza virus-like par-ticles comprised of the HA，NA，and M1 proteins of H9N2 in-fluenza virus induce protective immune responses in BALB/cmice［J］.Vaccine，2005，23（50）：5751-5759.

［13］劉麗平，焦新安，張小榮.減毒沙門菌運(yùn)送的H9N2亞型禽流感病毒DNA疫苗的研制及其免疫試驗(yàn)［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2007，28（9）：1-6.

［14］PERTMER T M，ORAN A E，MOSER J M，et al.DNA vaccines for influenza virus:differentialeffects of maternal antibody on immune responses to hemagglutinin and nucleoprotein［J］.J Virol，2000，74：7787-7793.

［15］THONKER B.A one-size-fits-all flu vaccine ［J］.Science，2006，312（21）：380-382.

［16］ERNST W A，KIM H J，TUMPEY T M，et al.Protection against H1，H5，H6 and H9 influenza A infection with liposomalmatrix 2 epitope vaccines ［J］.Vaccine，2006，24（24）：5158-5168.

S859.797；S852.5

A文章順序編號1672-5190（2016）11-0102-02

2016－10－15

白軍（1981—），男，講師，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防控方面的教學(xué)及科研工作。

（責(zé)任編輯：趙景娣）