姜旭東

（山東省煙臺市牟平區(qū)畜牧獸醫(yī)工作站，山東 煙臺 264100）

牛副結(jié)核病的流行和診療措施

姜旭東

（山東省煙臺市牟平區(qū)畜牧獸醫(yī)工作站，山東 煙臺 264100）

副結(jié)核病，又叫副結(jié)核性腸炎，是由分支桿菌屬中的副結(jié)核分支桿菌引起的反芻動物（主要是牛）的一種慢性消耗性傳染病。牛副結(jié)核病以頑固性腹瀉、進(jìn)行性消瘦、腸黏膜增厚并形成皺襞為特征。

本病1895年首次被發(fā)現(xiàn)，1906年人工感染犢牛成功，1961年獲得本菌的培養(yǎng)物。目前本病已廣泛流行于世界各國，特別是奶牛飼養(yǎng)量較大的一些國家均有發(fā)生。據(jù)報道，自1972年以來，我國一些地區(qū)的奶牛牧場、種公牛場等均有本病發(fā)生，嚴(yán)重危害養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，且有日漸增多的趨勢。

1 流行特點(diǎn)

本病的病原體是副結(jié)核桿菌。本菌主要存在于病畜體內(nèi)腸系膜淋巴結(jié)和腸黏膜。從公牛的性腺也曾發(fā)現(xiàn)過牛副結(jié)核桿菌。當(dāng)母?；几苯Y(jié)核病時，子宮感染率達(dá)50%以上；有人從有臨床癥狀的牛的胎兒組織（肝、脾、腎、小腸）分離到了副結(jié)核桿菌，從而證實(shí)了本病可通過母牛子宮傳染給犢牛。由于病原菌對外界的抵抗力較強(qiáng)，因此可以存活數(shù)月。副結(jié)核桿菌主要導(dǎo)致奶牛發(fā)病，其中犢牛最易感，除牛外其他動物也可罹患。本病的主要傳染源是病?；驇Ь鷦游?。病原菌污染飲水、草料等，通過消化道而侵入健康牛體內(nèi)。病牛可從糞便排出大量病原菌。一部分病例病菌經(jīng)血流或牛乳、尿液排出體外。試驗(yàn)證明，皮下或靜脈接種也可使?fàn)倥８腥尽?/p>

雖然幼齡牛對本病最為易感，但潛伏期甚長，可達(dá)半年到1年，甚至更長。一般在2～5歲時才表現(xiàn)出臨床癥狀，特別是在母牛開始懷孕、分娩以及泌乳時，易于出現(xiàn)臨床癥狀。高產(chǎn)奶牛的癥狀較低產(chǎn)牛為嚴(yán)重；公牛和閹牛比母牛發(fā)病少。飼料中缺乏無機(jī)鹽、礦物質(zhì)，可促進(jìn)本病的發(fā)展。此外，品種不同對本病的易感性也有明顯的差異。

2 臨床癥狀

本病的潛伏期較長，一般為6個月、1年以上或更長些，在2～5歲時才表現(xiàn)臨床癥狀。體溫常無變化。食欲起初正常，精神良好，逐漸食欲減退，漸進(jìn)消瘦，眼窩下陷，精神萎靡，經(jīng)常倒臥。泌乳量逐漸減少，最后停止。副結(jié)核桿菌到達(dá)腸道后，侵入腸黏膜和黏膜下層，在其中繁殖，引起腸道的損害，最初在小腸，以后逐漸蔓延到大腸。腸黏膜及黏膜下層產(chǎn)生大量上皮樣細(xì)胞逐漸變厚，形成皺襞。同時腸黏膜腺體受到壓迫而導(dǎo)致萎縮，影響消化、吸收等正?；顒?。早期癥狀為間斷性腹瀉，以后逐漸變?yōu)榻?jīng)常性的反復(fù)出現(xiàn)的頑固性拉稀。排泄物稀薄、惡臭、有氣泡，混有黏液和血液凝塊。當(dāng)排便呈水樣時，可出現(xiàn)皮膚粗糙，被毛粗亂，下頜及垂皮可見水腫等癥狀。腹瀉有時可暫時停止，排泄物恢復(fù)常態(tài)，體重有所增加，但再度發(fā)生嚴(yán)重腹瀉而不止時，一般經(jīng)3～4個月因機(jī)體過度衰竭而亡。感染本病的牛群每年死亡率可達(dá)10%以上。對病牛血象研究表明，患本病后血紅蛋白減少，血鈣和血鎂下降。若有牛在數(shù)月至1年以上呈慢性下痢或呈反復(fù)而頑固性下痢，機(jī)體漸進(jìn)性消瘦時，則應(yīng)首先懷疑本病。

3 病理學(xué)診斷

3.1 病理剖檢變化尸體外觀表現(xiàn)營養(yǎng)不良、極度消瘦。主要病變部位在消化道和腸系膜淋巴結(jié)上。消化道的損害常限于空腸、回腸和結(jié)腸前段，回腸損害尤為明顯。腸腔內(nèi)容物甚少。有時腸外表無大變化，但淋巴結(jié)腫大，腸壁常增厚，漿膜下淋巴管和腸系膜淋巴管常腫大，呈索狀。漿膜和腸系膜都有顯著水腫。黏膜色黃白或灰黃色，皺褶突起處常呈充血狀態(tài)，黏膜上面緊附有黏液，稠而混濁，但無結(jié)節(jié)和壞死，也無潰瘍。腸黏膜常增厚3～20倍，并產(chǎn)生硬而彎曲的皺襞。腸系膜淋巴結(jié)腫大而變軟，切面濕潤，上有黃白色病灶，但無干酪樣病變。

3.2 病理組織學(xué)變化腸黏膜固有層和腸黏膜下層有大量的淋巴細(xì)胞和上皮樣細(xì)胞增生。小腸病變輕時，增生的主要是淋巴細(xì)胞，有少量的上皮樣細(xì)胞，主要出現(xiàn)在黏膜固有層。嚴(yán)重病例，增生更為廣泛，除黏膜固有層以外，在黏膜下層也有厚厚的一層增生的細(xì)胞，其中以上皮樣細(xì)胞占大多數(shù)，僅在黏膜肌層有薄薄的一層淋巴細(xì)胞。上皮樣細(xì)胞排列非常緊密，偶爾可見巨噬細(xì)胞。此外，在黏膜肌層和漿膜層血管的外圍，也有數(shù)量不等的淋巴細(xì)胞和上皮樣細(xì)胞浸潤。

腸絨毛變粗呈棒狀，或消失。腸腺受壓萎縮、變性或消失。在黏膜下層，水腫十分明顯。黏膜肌層同樣水腫，實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)疏松，由于水腫液的積聚呈現(xiàn)大量空隙。大腸變化和小腸基本相仿。病情較輕者，小腸黏膜固有層出現(xiàn)較明顯的增生反應(yīng)。增生細(xì)胞以淋巴細(xì)胞為主。大腸的黏膜固有層增生反應(yīng)不及小腸明顯，并以漿細(xì)胞增生占優(yōu)勢。重癥病例，腸黏膜固有層增生反應(yīng)不如黏膜下層明顯，增生細(xì)胞以上皮樣細(xì)胞為主。腸壁上的淋巴濾泡，仍保持固有結(jié)構(gòu)，細(xì)胞成分仍以淋巴細(xì)胞為主，中間混有極少數(shù)吞噬病菌的上皮樣細(xì)胞。腸系膜淋巴結(jié)、淋巴竇內(nèi)上皮樣細(xì)胞大量增生，有時出現(xiàn)少量巨噬細(xì)胞。在淋巴結(jié)輸入淋巴管一側(cè)的皮質(zhì)竇和髓質(zhì)竇內(nèi)上皮樣細(xì)胞較多，并吞噬有病原菌。還可見到壞死和鈣化病灶。其他器官特別是肝臟中常有由巨噬細(xì)胞構(gòu)成的小肉芽腫，有時有巨噬細(xì)胞。

4 病原學(xué)診斷

4.1 病料采集和處理取病腸段或回盲瓣、病腸淋巴結(jié)，將腸段剪開，用自來水沖洗，再用刀刮取黏膜約10～20g。腸淋巴結(jié)可先除去周邊脂肪，切取10～20g并剪碎。刮取和剪碎的組織放入消毒的帶銅紗網(wǎng)的乳缽中研磨，邊磨邊加0.5%胰酶水溶液40mL，使成混懸液，用1mo1/L NaOH溶液調(diào)pH為9.0，放在燒杯中，在磁力攪拌器上于室溫下攪拌1h進(jìn)行消化。然后以5000轉(zhuǎn)/min離心30min，去上清，沉淀物加20mL生理鹽水，再加等量10%草酸和0.02%孔雀綠水溶液，置37℃水浴中30min，不時搖振。再離心（5000轉(zhuǎn)/min）30min，去上清，取沉淀物供分離培養(yǎng)及制成抹片，待抗酸性染色后鏡檢用。取糞便樣品（選帶黏膜及血塊的）2g，加生理鹽水40mL，搖振使之充分散開。取糞水4.5mL加7.5%氯化十六烷基吡啶0.5mL，使藥液濃度為0.75%，4℃下過夜。取出棄上清，不用離心，取沉淀物供培養(yǎng)和鏡檢用。

4.2 細(xì)菌學(xué)檢查對可疑病牛于生前取直腸刮取物（于肛門內(nèi)30cm左右處）或取經(jīng)上述方法處理的糞便以及病料的沉淀物制成涂片標(biāo)本，經(jīng)抗酸性染色后在顯微鏡下進(jìn)行檢查。鏡下可見到成叢、成團(tuán)排列的特征抗酸性菌具有診斷意義。

4.3 分離培養(yǎng)本菌初代培養(yǎng)較為困難。在含有蛋白質(zhì)的4%甘油及10%結(jié)核分支桿菌素或已死的結(jié)核分支桿菌、草分支桿菌浸液等培養(yǎng)基有利于初代培養(yǎng)生長。初代分離培養(yǎng)時，可采用改良Dubos氏培養(yǎng)基。菌種傳代可用Wastou Reid（W.R）培養(yǎng)基和改良Herro1d培養(yǎng)基。分離培養(yǎng)時，將處理過的病料接種于改良的Dubos培養(yǎng)基上，每份病料接種3～5管，接種后，先將試管斜放于37℃恒溫箱內(nèi)數(shù)日，然后再立起來進(jìn)行培養(yǎng)。每周觀察發(fā)育情況1～2次。初代分離培養(yǎng)于培養(yǎng)后5～6周可長出細(xì)小灰白色菌落。鉤取菌落做涂片鏡檢，可見成叢、成團(tuán)排列的抗酸性染色陽性（紅色）短桿菌。

4.4 分離菌的鑒別可將初代分離的培養(yǎng)物，接種于含有草分支桿菌素的改良Dubos培養(yǎng)基一管，另設(shè)不含草分支桿菌素的一管為對照，培養(yǎng)3～4周，如前者生長，后者不生長時，則初步認(rèn)為是副結(jié)核分支桿菌（少數(shù)菌株也有例外，即在后者也能輕度生長）。為進(jìn)一步鑒別，可試做生長溫度鑒別試驗(yàn)，即在W.R馬鈴薯培養(yǎng)基上副結(jié)核分支桿菌于43～44℃下可生長，而牛分支桿菌及結(jié)核分支桿菌不生長；在谷氨酸鈉葡萄糖瓊脂上副結(jié)核分支桿菌不生長，但在牛體內(nèi)有時可分出的胞內(nèi)分支桿菌可以生長。

5 預(yù)防措施

堅(jiān)持自繁自養(yǎng)。若必須引進(jìn)外場牛，則引入前應(yīng)作必要的流行病學(xué)調(diào)查及牛體檢查，確認(rèn)健康后再混群飼養(yǎng)。注意合理搭配日糧，尤其是在犢牛及育成牛階段，更應(yīng)合理飼喂，保證牛只健康，提高抗病力。一旦牛場中出現(xiàn)消瘦、頑固性腹瀉病牛，應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。確診的陽性牛，應(yīng)撲殺。對病牛的廄舍、用具、墊草及糞尿殘留物應(yīng)進(jìn)行徹底消毒，防止病原體的擴(kuò)散。

6 治療方法

本病尚無特效治療藥物，一般采用對癥療法。若腹瀉嚴(yán)重，可補(bǔ)充葡萄糖生理鹽水，2000～3000mL/次，靜脈注射。止瀉可內(nèi)服鞣酸、次硝酸鉍等，可使病牛有好轉(zhuǎn)趨向。為防治中毒，可用5%碳酸氫鈉液500～1000mL或40%烏洛托品50～100mL，靜注。病牛應(yīng)單獨(dú)飼養(yǎng)，給以優(yōu)質(zhì)干草，并適當(dāng)增加骨粉，以改善體況，緩解腹瀉。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．05.039