覃彥平 柯柳華 蔣義生 馬興璇

(1 廣西柳州市紅十字會(huì)醫(yī)院，柳州市 545001，E-mail：1227143070@qq.com；2 廣西柳州市中醫(yī)院，柳州市 545006)

臨床創(chuàng)新

HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者血清HBsAg與HBV-DNA的相關(guān)性及其與HBeAg、ALT水平的關(guān)系▲

覃彥平1柯柳華2蔣義生1馬興璇2

(1 廣西柳州市紅十字會(huì)醫(yī)院，柳州市 545001，E-mail：1227143070@qq.com；2 廣西柳州市中醫(yī)院，柳州市 545006)

目的 探討HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBsAg與HBV-DNA水平的相關(guān)性，以及兩者與HBeAg、ALT的關(guān)系。方法 收集確診為HBeAg陽(yáng)性的CHB患者血清標(biāo)本131例(治療前53例，治療后78例)，測(cè)定HBV-DNA、HBsAg、ALT、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb水平。結(jié)果 (1)治療前或治療后的HBeAg 陽(yáng)性CHB患者中，HBsAg高水平組的HBV-DNA陽(yáng)性率、HBV-DNA水平均高于低水平組(P<0.05)，患者血清HBsAg與HBV-DNA呈正相關(guān)(P<0.05)。(2)治療前及治療后的患者中，HBeAg高水平組的HBsAg水平均高于HBeAg低水平組(P<0.05)；在治療后的患者中，HBeAg高水平組的HBV-DNA水平高于HBeAg低水平組(P<0.05)。(3)在治療后的患者中，ALT異常組的HBV-DNA水平高于ALT正常組(P<0.05)。結(jié)論 對(duì)于HBeAg 陽(yáng)性CHB患者，其HBV-DNA水平隨HBsAg水平升高而升高，HBeAg高水平者的HBsAg水平均高于HBeAg低水平者，且治療后ALT異常者HBV-DNA水平高于ALT正常者，因此在無(wú)法開展HBV-DNA檢測(cè)的地區(qū)，可檢測(cè)HBsAg、HBeAg、ALT等指標(biāo)對(duì)CHB進(jìn)行篩查及監(jiān)控。

慢性乙型肝炎；乙型肝炎病毒表面抗原；乙型肝炎病毒-DNA；乙型肝炎病毒e抗原

廣西為慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)高發(fā)區(qū)，CHB嚴(yán)重威脅人類健康，給社會(huì)帶來(lái)較大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)?，F(xiàn)階段對(duì)于HBV主要有2種檢測(cè)方法：HBsAg檢測(cè)為CHB初診及大規(guī)模流行病學(xué)篩查的常規(guī)方法；HBV-DNA檢測(cè)可反映HBV載量，了解病毒的復(fù)制情況。在CHB患者中HBeAg陽(yáng)性提示HBV復(fù)制活躍，傳染性大[1]。本研究通過(guò)對(duì)131例HBeAg陽(yáng)性CHB患者的檢測(cè)資料進(jìn)行分析，以了解HBeAg陽(yáng)性CHB患者的HBV-DNA水平及HBsAg的相關(guān)性，以及兩者與HBeAg、ALT水平的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇柳州市中醫(yī)院2013年7月至2014年5月確診為HBeAg陽(yáng)性的CHB患者131例，年齡0.8～69.0歲，平均30.5歲，其中男70例，女61例，均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)》[2]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并除外其他慢性肝病者。抽取患者空腹靜脈血，其中53例為治療前進(jìn)行檢測(cè)，余78例為治療后檢測(cè)。

1.2 主要儀器與試劑 ABI7000型熒光定量PCR儀(美國(guó)ABI公司生產(chǎn))，HBV-DNA熒光定量PCR試劑(達(dá)安基因科技有限公司生產(chǎn))，Abbott Architect i2000SR化學(xué)發(fā)光分析儀全自動(dòng)免疫分析儀(美國(guó)Abbott公司)，SYM-BIO時(shí)間分辨熒光分析儀(蘇州新波生物科技有限公司)，7600-020全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司)；HBsAg檢測(cè)試劑為美國(guó)Abbott公司提供的配套試劑，HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb檢測(cè)試劑為蘇州新波生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，ALT檢測(cè)試劑為科華生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

1.3 方法 (1)采用實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(real-time PCR，RT-PCR)測(cè)定HBV-DNA，采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定HBsAg，采用酶法測(cè)定ALT，采用時(shí)間分辨免疫熒光分析法測(cè)定HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb，均按照試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行操作。血清標(biāo)志物HBV-M模式A為：HBsAg+，HBsAb-，HBeAg+，HBeAb-，HBcAb+；血清標(biāo)志物HBV-M模式B為：HBsAg+，HBsAb+，HBeAg+，HBeAb-，HBcAb+；C模式為HBsAg+，HBsAb-，HBeAg+，HBeAb+，HBcAb+。(2)根據(jù)HBeAg水平分為HBeAg高水平組(HBeAg≥76.5 PEIU/ml)和HBeAg低水平組(HBeAg<76.5 PEIU/ml)；根據(jù)HBsAg水平分為HBsAg高水平組(HBsAg≥5.0×103IU/ml)和HBsAg低水平組(HBsAg<5.0×103IU/ml)；根據(jù)ALT水平分為ALT異常組(ALT>40 IU/L)和ALT正常組(ALT≤40 IU/L)。(3)分析HBeAg陽(yáng)性CHB患者的HBV-DNA水平及HBsAg的相關(guān)性，比較不同HBeAg、ALT水平分組中的HBV-DNA的檢出陽(yáng)性率、HBV-DNA及HBsAg水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用中位數(shù)表示，比較采用秩和檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料的比較采用卡方檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HBV-DNA與HBsAg總體水平相關(guān)性分析 131例HBeAg陽(yáng)性CHB患者的HBsAg為0.31×102～1.25×105IU/ml，中位數(shù)為2.22×104IU/ml；HBV-DNA為1.0×102～2.58×108Copy/ml，中位數(shù)為1.49×107Copy/ml。治療前及治療后患者中，HBsAg高水平組的HBV-DNA陽(yáng)性率、HBV-DNA水平均高于低水平組(P<0.05)，見表1。相關(guān)性分析顯示，在治療前及治療后的患者中，HBV-DNA與HBsAg水平呈正相關(guān)(治療前：r=0.503，P<0.001；治療后：r=0.604，P<0.001)。

表1 不同HBsAg水平患者的HBV-DNA陽(yáng)性率、HBV-DNA水平比較

2.2 不同血清標(biāo)志物HBV-M模式、HBeAg及ALT水平與HBsAg、HBV-DNA的關(guān)系 (1)在131例患者中共檢出HBV-DNA陽(yáng)性患者125例，HBV-DNA陰性患者6例。(2)治療前或治療后HBeAg陽(yáng)性CHB患者中，A模型組與B、C模型組的HBV-DNA陽(yáng)性率、HBV-DNA水平及HBsAg水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)治療前患者中，HBeAg高水平組的HBsAg水平高于HBeAg低水平組(P<0.05)；在治療后的患者中，HBeAg高水平組的HBV-DNA水平及HBsAg水平均高于HBeAg低水平組(P<0.05)。(4)在治療后的患者中，ALT異常組的HBV-DNA水平高于ALT正常組(P<0.05)。見表2。

3 討 論

3.1 HBsAg及HBV-DNA在CHB中的意義 HBsAg在血清以小球狀顆粒、管形顆粒和Dane顆粒3種方式存在，前2種均為空心包膜，無(wú)核酸及傳染性，而Dane顆粒是完整的HBV顆粒，內(nèi)有核酸及高度的傳染性。HBV-DNA是乙肝病毒復(fù)制的模板，只存在于Dane顆粒中，因此HBsAg會(huì)伴隨著HBV-DNA而存在。為更好地對(duì)CHB進(jìn)行預(yù)防及監(jiān)控，確切了解HBsAg及HBV-DNA在CHB中的作用尤為重要。

3.2 HBeAg陽(yáng)性CHB患者的HBV-DNA水平及HBsAg的相關(guān)性 有研究表明HBV-DNA濃度與HBeAg及HBsAg均相關(guān)[3]；曾磊等[4]的研究結(jié)果顯示HBsAg定量水平較高者的HBV-DNA拷貝數(shù)較高。本研究結(jié)果亦顯示，HBsAg高水平患者(HBsAg≥5.0×103IU/ml)，不論治療前后，HBV-DNA陽(yáng)性檢出率及HBV-DNA水平均高于HBsAg低水平患者(P<0.05)。而相關(guān)性分析結(jié)果進(jìn)一步表明，HBeAg陽(yáng)性CHB患者的血清HBV-DNA水平與HBsAg水平呈正相關(guān)性，提示HBV-DNA的載量隨HBsAg水平的升高而升高。因此，可根據(jù)這個(gè)規(guī)律，對(duì)HBsAg高水平的HBeAg陽(yáng)性CHB患者，可結(jié)合臨床表現(xiàn)推斷其HBV-DNA的載量是否處于高水平。

3.3 HBeAg陽(yáng)性CHB患者的HBeAg、ALT水平與HBV-DNA、HBsAg的關(guān)系 (1)有研究者認(rèn)為乙肝“大三陽(yáng)”(即HBV-M模式A)患者的HBV-DNA陽(yáng)性檢出率較其他HBV-M模式高[5-6]，但在本研究中，HBV-M模式A組與HBV-M模式B、C組的HBV-DNA陽(yáng)性率、HBV-DNA及HBsAg比較無(wú)明顯差異(P>0.05)，原因可能是本研究收集的HBV-M模式B、C患者樣本量明顯少于模式A。(2)HBeAg陽(yáng)性的CHB患者病毒復(fù)制活躍，HBsAg自發(fā)清除率低[1]，有研究者認(rèn)為患者體內(nèi)HBV處于不停地復(fù)制狀態(tài)，患者具有高的HBsAg水平及HBV-DNA載荷量[7]。本研究結(jié)果也顯示，不論治療前或是治療后的患者，HBeAg高水平組的HBsAg水平高于HBeAg低水平組(P<0.05)；但治療前的HBeAg高、低水平組HBV-DNA水平無(wú)明顯差異(P>0.05)，而治療后的HBeAg高水平組HBV-DNA水平較高(P<0.05)。這可能因?yàn)橹委熐盎颊唧w內(nèi)病毒均復(fù)制活躍，但治療后2組的病毒復(fù)制受到抑制的程度不同。這提示CHB患者的HBeAg處于高水平時(shí)，其HBsAg水平也相應(yīng)升高，治療后病毒復(fù)制受到抑制的程度也較小。(3)ALT主要存在于肝細(xì)胞質(zhì)中，肝臟受損時(shí)其濃度可迅速變化，其水平可反映肝損傷程度，臨床上常作為評(píng)估乙肝病情、療效和轉(zhuǎn)歸的重要指標(biāo)。ALT 水平是替比夫定治療48 周時(shí)e抗原血清學(xué)轉(zhuǎn)換的重要預(yù)測(cè)因素[8]。有研究報(bào)道ALT值的變化與HBsAg及HBV-DNA無(wú)關(guān)[9]，也有研究者認(rèn)為HBsAg陽(yáng)性者中不同性別間的ALT異常率與HBV-DNA復(fù)制率有差異；HBeAg陽(yáng)性且ALT異常時(shí)，HBV-DNA復(fù)制率高[10]。本研究發(fā)現(xiàn)在治療后的患者中，ALT異常組的HBV-DNA水平高于ALT正常組(P<0.05)，這提示對(duì)于HBeAg陽(yáng)性CHB患者，ALT與HBV-DNA水平同步升高。

綜上所述，對(duì)于HBeAg陽(yáng)性CHB患者，其血清總體HBV-DNA與HBsAg水平正相關(guān)，HBeAg高水平者的HBsAg水平均高于HBeAg低水平者，且治療后ALT異常者HBV-DNA水平高于ALT正常組，因此可結(jié)合臨床表現(xiàn)根據(jù)HBsAg、HBeAg及ALT評(píng)估HBV-DNA的載量是否處于高水平。這提示可以考慮在因經(jīng)濟(jì)因素?zé)o法開展HBV-DNA檢測(cè)的地區(qū)，可檢測(cè)HBsAg、HBeAg及ALT等指標(biāo)對(duì)CHB進(jìn)行篩查、預(yù)防及監(jiān)控，以減少多重檢查，并減輕CHB患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

[1] 鄭 專,董學(xué)軍.e抗原陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA與HBsAg、HBeAg的相關(guān)性分析[J].放射免疫學(xué)雜志,2012,25(3):284-286.

[2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì),中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)[J].中華流行病學(xué)雜志,2011,32(4):405-415.

[3] 謝而付,黃佩珺,陳 丹,等.慢性HBV感染患者血清中HBV-DNA與HBsAg、HBeAg的關(guān)系[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2010,26(19):3 627-3 629.

[4] 曾 磊,丁愛嬌,江凌曉,等.廣州市慢性乙型肝炎患者表面抗原水平分析[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2014,34(7):974-977.

[5] 莫甲光.HBV-DNA測(cè)定與乙肝五項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定的相關(guān)性研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2012,10(16):120-121.

[6] 蔣郁青,謝志賢,許宏濤,等.HBV-DNA與兩對(duì)半在乙型肝炎診治中的意義[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志,2014,28(4):289-290.

[7] 賀 巖,羅 梅,孫艷艷.HBV DNA載量與HBsAg、HBeAg和ALT水平的相關(guān)性[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(19):2 400-2 401.

[8] 俞立飛,梁偉峰,章松平,等.基線HBsAg 和ALT 水平是替比夫定治療HBeAg 陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者e抗原血清學(xué)轉(zhuǎn)換的重要預(yù)測(cè)因素[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2014,26(2):184-187.

[9] Gupta E,Kumar A,Choudhary A,et al.Serum hepatitis B surface antigen levels correlate with high serum HBV DNA levels in patients with chronic hepatitis B:a cross-sectional study[J].Indian J Med Microbiol,2012,30(2):150-154.

[10]樊紅艷,張 峰,彭俊華,等.組合乙肝標(biāo)志物聯(lián)合ALT對(duì)判斷肝損害和HBV-DNA復(fù)制狀態(tài)789例調(diào)查分析[J].臨床軍醫(yī)雜志,2009,37(1):97-99.

廣西柳州市科技局項(xiàng)目(2014JC0202)

覃彥平(1971～)，女，碩士，副主任技師，研究方向：臨床檢驗(yàn)。

R 446.6；R 512.62

A

0253-4304(2016)01-0113-03

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.01.35

2015-07-28

2015-10-14)