周長榮 劉磊 溫小軍

(貴州醫(yī)科大學生物教研室，貴州 貴陽 550025)

珊瑚姜精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊的毒殺活性

周長榮 劉磊 溫小軍△

(貴州醫(yī)科大學生物教研室，貴州 貴陽 550025)

珊瑚姜； 植物精油； 白紋伊蚊； 致倦庫蚊； 毒殺活性

蚊蟲騷擾人們的正常生活，傳播瘧疾、登革熱、絲蟲病及乙型腦炎等疾病[1]，給人類的健康帶來威脅。研究發(fā)現(xiàn)，植物精油對蚊幼蟲具有良好的毒殺活性[2-4]，并且植物精油具有高效、安全、靶向專一和易于降解等優(yōu)點。研究植物精油對蚊的毒殺活性具有廣闊的應用前景。W.Choochote等[5]的研究表明郁金根狀莖的己烷提取物及揮發(fā)油對埃及伊蚊的幼蟲具有毒殺效果；P.Veenal等[6]發(fā)現(xiàn)生姜精油及迷迭香精油對史帝芬塞瘧蚊、埃及伊蚊及熱帶家蚊(的蚊卵都具有顯著的殺滅效果；而珊瑚姜精油對蚊蟲的活性從未見報道。本實驗研究了珊瑚姜精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊s幼蟲和蛹的毒殺作用，為以后植物源殺幼劑的研究提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 植物精油 珊瑚姜塊莖購自花鳥市場，經(jīng)貴州醫(yī)科大學藥學院龍慶德教授鑒定，確認為珊瑚姜。并過40目篩，采用水蒸汽蒸餾法提取精油：將150 g的珊瑚姜粉末置于2 000 mL的圓底燒瓶中，加入1 500 mL的蒸餾水，過夜浸泡；蒸餾6 h，精油收集于棕色試劑瓶內，經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，保存于4 ℃冰箱中備用。

1.2 供試蚊蟲 實驗用蟲均為貴州醫(yī)科大學生物教研室蚊房訓養(yǎng)的白紋伊蚊和致倦庫蚊的IV齡幼蟲和蛹。馴養(yǎng)溫度：(26±2)℃，濕度：(65±5)%，光照周期14L∶10D。實驗挑選大小一致、健壯的IV齡幼蟲和蛹進行。

1.3 珊瑚姜精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊幼蟲和蛹的毒殺活性 參照WHO[7]的方法，進行優(yōu)化測試。以1 g精油∶20 mL的無水乙醇的比例對珊瑚姜精油進行溶解，然后用去氯水制備成1 000 mg/L的精油母液。分別將幼蟲及蛹各30頭接入200 mL的塑料杯中，再將不同濃度的精油溶液各100 mL分別注入塑料杯中進行毒殺實驗。實驗過程在幼蟲所需的正常生長環(huán)境條件下進行，實驗過程中不進行喂食。以相同濃度的乙醇溶液作為溶劑對照組，此外，同時做空白對照組。實驗進行24 h后觀察幼蟲情況：用吸管刺激幼蟲，幼蟲不游動或不能游到水面(沒有顯著的潛水反應)，即視為個體已經(jīng)死亡。各個珊瑚姜精油濃度重復3次實驗，統(tǒng)計死亡率為3次的平均值，校正死亡率按Abbott公式計算：

校正死亡率=處理組死亡率-對照死亡率/1-對照死亡率×100%

1.4 統(tǒng)計學方法 參照文獻[8]通過SPSS 17.0軟件對不同精油濃度條件下的致死率進行處理，分別得出兩種蚊蟲IV齡幼蟲和蛹的LC50，回歸方程，95%置信區(qū)間(95% CI)，卡方值。

2 結 果

毒殺實驗中，將幼蟲或蛹放入珊瑚姜精油稀釋液后，幼蟲開始運動加快后漸漸沉入瓶底死亡。兩種蚊的幼蟲后蟲體稍彎，頭尾呈灰黑色，兩種蚊的蛹身體松弛，尾部直伸，體長增加，而致倦庫蚊身色變黃。乙醇對照組和空白對照無個體死亡。珊瑚姜精油對白蚊伊蚊和致倦庫蚊幼蟲和蛹的毒殺結果表明(表2)：珊瑚姜精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊IV齡幼蟲24 h的LC50分別為77.994和66.574 mg/L;對蛹24 h的LC50分別是299.164和204.857 mg/L。由此可見，珊瑚姜精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊IV齡幼蟲的毒殺效果比其對蛹的毒殺效果顯著而且珊瑚姜精油對IV齡幼蟲LC50的濃度值遠低于對蛹的LC50濃度值；珊瑚姜精油對致倦庫蚊的幼蟲和蛹的毒殺活性比對白紋伊蚊的強，即珊瑚姜精油的對致倦庫蚊的毒殺LC50比白紋伊蚊的毒殺LC50低。

表2 珊瑚姜精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊IV齡幼蟲和蛹的毒殺活性

注：*死亡率與濃度之間的線性關系在0.05水平上有統(tǒng)計意義(P﹤0.05)。

3 討 論

珊瑚姜精油對兩種蚊的幼蟲和蛹具有明顯毒殺活性，但對兩種蚊蟲的毒殺活性存在差異，即致倦庫蚊幼蟲和蛹比白紋伊蚊幼蟲和蛹敏感，因此在實驗過程中供試蚊蟲的種類對毒殺結果有很大的影響，同時也表明植物精油的殺蟲活性有一定的特異性。

WHO對植物殺蟲劑對蚊幼蟲殺蟲活性還沒有制定相應的標準，根據(jù)S.S.Cheng等[9]對殺蟲活性分類標準來看，殺蟲活性判斷標準為：LC50>100 mg/L為無活性，LC50<100 mg/L為有活性，LC50<50 mg/L為具有較高活性。珊瑚姜對白蚊伊蚊和致倦庫蚊的IV齡幼蟲24 h LC50分別為77.994/66.574 μg/mL，均低于100 mg/L，表明珊瑚姜精油對兩種幼蟲均有毒殺活性。關于植物精油對蚊幼蟲和蛹的毒殺活性一直是蚊蟲防治研究中的熱點，研究[10-12]發(fā)現(xiàn)，嶺南花椒果實精油對白紋伊蚊IV齡幼蟲24 h的LC50值為163.42 μg/mL；竹葉花椒果實精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊的24 h的LC50值分別為258.497/121.884 μg/mL；山蒼子精油對白蚊伊蚊24h的LC50為82.48 μg/mL；與以上植物精油相比，珊瑚姜精油精油對白紋伊蚊和致倦庫蚊幼蟲具有更強的毒殺活性，因此該精油在蚊幼蟲的生物防治方面具有更好的利用價值，更具開發(fā)成高效環(huán)保的植物源蚊蟲殺幼劑的潛力。

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