陳璇，任澤明，童曄玲，戴關(guān)海，楊鋒

浙江省中醫(yī)藥研究院基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究所，浙江 杭州 310007

◆實(shí)驗(yàn)研究◆

蜂膠配伍姜黃抗高尿酸血癥實(shí)驗(yàn)研究

陳璇，任澤明，童曄玲，戴關(guān)海，楊鋒

浙江省中醫(yī)藥研究院基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究所，浙江 杭州 310007

目的：觀察蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠血清尿酸（SUA）及黃嘌呤氧化酶（XOD）活性的影響。方法：實(shí)驗(yàn)設(shè)蜂膠配伍姜黃低、中、高劑量組，別嘌醇組、模型對(duì)照組、溶劑對(duì)照組和正常對(duì)照組，觀察小鼠體重的變化及SUA水平、肝臟XOD的活性。結(jié)果：與模型對(duì)照組比較，蜂膠配伍姜黃高、中、低劑量組小鼠SUA水平和肝臟XOD活性呈現(xiàn)劑量依賴性下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：蜂膠配伍姜黃具有降低高尿酸血癥模型小鼠SUA水平及抑制XOD活性的作用。

抗高尿酸血癥；蜂膠；姜黃；配伍

高尿酸血癥是由于黃嘌呤氧化酶(XOD)活性出現(xiàn)異常導(dǎo)致嘌呤代謝紊亂，從而使尿酸生成過(guò)多或腎臟排泄障礙所致的代謝性疾病，其嚴(yán)重后果可導(dǎo)致痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和尿酸性腎損害[1]。隨著人們生活水平的提高及飲食結(jié)構(gòu)的改變，社會(huì)節(jié)奏的加快和運(yùn)動(dòng)時(shí)間的減少，高尿酸血癥患病率呈上升趨勢(shì)[2]。研究發(fā)現(xiàn)，高尿酸血癥與心腦血管疾病、糖尿病、血脂紊亂、肥胖癥等疾病密切相關(guān)[3]。目前，中醫(yī)藥治療高尿酸血癥越來(lái)越受到重視。由于中藥材的成分較復(fù)雜，且各種中藥材相互之間的復(fù)配效果很難預(yù)見(jiàn)，因此，需要不斷地探索具有良好抗高尿酸血癥作用的中藥及其復(fù)方。本研究對(duì)蜂膠配伍姜黃抗小鼠高尿酸血癥作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 蜂膠(購(gòu)自浙江福賜德生物科技有限公司，批號(hào)：141110)，姜黃提取物(購(gòu)自寧波中藥制藥有限公司，批號(hào)：20141102)。以山茶油為溶劑將蜂膠和姜黃提取物配制成各劑量供試，即分別稱取供試樣品10.0 g、60.0 g和120.0 g加山茶油至60 mL，配制成濃度為0.17g/mL、1.00 g/mL和2.00 g/mL樣品，作為供試液。另設(shè)姜黃提取物對(duì)照組1.00 g/mL，灌胃容積均為0.1 mL/10 g體重。

1.1.2 別嘌醇片 每片0.1 g，江蘇方強(qiáng)制藥廠有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號(hào)：201110302。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和檢測(cè)條件 ICR種小鼠，雌雄各半，體重18～22 g，由上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，許可證：SCXK(滬)2008-0016。動(dòng)物飼料由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：GB14924-2001。檢測(cè)環(huán)境條件，溫度范圍20～23℃，相對(duì)濕度范圍40%～70%。小鼠試驗(yàn)前在動(dòng)物房環(huán)境中適應(yīng)性飼養(yǎng)5天。

1.3 主要儀器與試劑 電子天平、721分光光度計(jì)、恒溫水浴箱、手術(shù)器械等。酵母浸出汁，上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：131008。鹽酸乙胺丁醇片，杭州民生藥業(yè)有限公司，批號(hào)：T11G515。尿酸檢測(cè)試劑盒，寧波賽克生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20140412。黃嘌呤氧化酶(XOD)測(cè)試盒，南京建成生物工程研究所生產(chǎn)，批號(hào)：20140419。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 分組 實(shí)驗(yàn)小鼠共80只，適應(yīng)性飼養(yǎng)5天后，隨機(jī)分成8組，每組10只，雌雄各半，設(shè)蜂膠配伍姜黃低劑量組[0.17 g/(kg·d)]、蜂膠配伍姜黃中劑量組[1.00 g/(kg·d)]、蜂膠配伍姜黃高劑量組[2.00 g/(kg·d)體重]、姜黃提取物組[1.00 g/ (kg·d)]、陽(yáng)性對(duì)照組(別嘌醇組)、模型對(duì)照組、溶劑對(duì)照組(山茶油)，同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組。蜂膠配伍姜黃低、中、高3個(gè)劑量組，相當(dāng)于人推薦量的5、30和60倍(人推薦量為[2.0 g/60 (kg·d)]。別嘌醇組灌胃別嘌醇片[0.3 g/(kg·d)]體重，相當(dāng)于人推薦量的30倍(人推薦最高量為0.01g/60(kg·d)。各組灌胃相應(yīng)受試物共21天，其中第8天起實(shí)驗(yàn)組小鼠分別灌胃30 g/ (kg·d)酵母浸出汁和0.25 g/(kg·d)乙胺丁醇，連續(xù)14天，造成高尿酸血癥小鼠模型，造模期間各組同時(shí)繼續(xù)灌胃相應(yīng)受試物，并按常規(guī)飼養(yǎng)，每周稱1次體重。

1.4.2 指標(biāo)測(cè)定方法 末次給藥后，小鼠空腹24 h，摘眼球取血，放置1 h，2000 r/min離心10 min，收集血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清尿酸(SUA)含量。脫頸椎處死小鼠，取肝臟組織，勻漿，3500 r/min離心10 min，取上清液，按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定XOD。

1.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)均以()表示，多組均數(shù)比較采用F檢驗(yàn)，其中2組間比較，計(jì)量資料采用LSD-t檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)加做Dunnett T3檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠體重的影響 見(jiàn)表1。整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期中，蜂膠配伍姜黃各組及其它受試物各組小鼠體重與模型對(duì)照組、溶劑對(duì)照組、正常對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至中期，別嘌醇組小鼠體重與其他各組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而到實(shí)驗(yàn)?zāi)┢?，別嘌醇組小鼠體重與正常對(duì)照組比較，體重下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示別嘌醇對(duì)小鼠體重有影響。

表1 蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠體重的影響()g

表1 蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠體重的影響()g

與正常對(duì)照組比較，①P＜0.05

組別蜂膠配伍姜黃高劑量組蜂膠配伍姜黃中劑量組蜂膠配伍姜黃低劑量組姜黃提取物組別嘌醇組模型對(duì)照組溶劑對(duì)照組正常對(duì)照組開(kāi)始2 5 . 0 ± 1 . 6 2 5 . 2 ± 1 . 4 2 4 . 8 ± 1 . 7 2 5 . 1 ± 1 . 8 2 4 . 9 ± 1 . 6 2 5 . 1 ± 1 . 7 2 4 . 9 ± 1 . 5 2 5 . 3 ± 1 . 8中期2 7 . 5 ± 2 . 0 2 8 . 7 ± 2 . 3 2 7 . 8 ± 2 . 5 2 7 . 4 ± 2 . 9 2 6 . 5 ± 2 . 6 2 8 . 4 ± 2 . 4 2 8 . 6 ± 2 . 7 2 8 . 3 ± 2 . 0結(jié)束2 8 . 5 ± 2 . 7 2 9 . 0 ± 2 . 9 2 8 . 8 ± 2 . 5 3 0 . 0 ± 2 . 4 2 6 . 7 ± 2 . 9①2 9 . 5 ± 2 . 7 2 9 . 8 ± 2 . 8 3 0 . 0 ± 2 . 3體重( g )

2.2 蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠SUA、XOD含量的影響 見(jiàn)表2。蜂膠配伍姜黃高劑量組、蜂膠配伍姜黃中劑量組、蜂膠配伍姜黃低劑量組與模型對(duì)照組比較，SUA含量下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而姜黃提取物組SUA含量與模型對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。提示蜂膠配伍姜黃具有降低小鼠血液高尿酸血癥的作用。模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，小鼠肝XOD活性增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。蜂膠配伍姜黃高、中、低劑量組，別嘌呤醇組的XOD活性與模型對(duì)照組比較，均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。姜黃提取物組亦可使小鼠肝XOD活性降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。提示大劑量灌胃酵母浸出汁和乙胺丁醇使小鼠體內(nèi)尿酸上升，肝臟XOD活性增加，而蜂膠配伍姜黃及別嘌醇均具有抑制XOD活性的作用。

表2 蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠SUA、XOD含量的影響()

表2 蜂膠配伍姜黃對(duì)高尿酸血癥模型小鼠SUA、XOD含量的影響()

與模型對(duì)照組比較，①P＜0.05

組別蜂膠配伍姜黃高劑量組蜂膠配伍姜黃中劑量組蜂膠配伍姜黃低劑量組姜黃提取物組別嘌醇組模型對(duì)照組溶劑對(duì)照組正常對(duì)照組S U A ( μ m o l / L ) 6 8 . 5 ± 2 7 . 9①7 2 . 5 ± 2 5 . 1①7 5 . 2 ± 2 3 . 9①8 7 . 0 ± 2 6 . 2 6 5 . 4 ± 2 2 . 5 1 0 4 . 3 ± 2 9 . 9 1 0 0 . 5 ± 2 9 . 8 6 1 . 7 ± 1 4 . 2 X O D ( U · g-1) 1 6 . 5 ± 4 . 0①1 8 . 4 ± 4 . 1①1 9 . 9 ± 4 . 3①2 4 . 9 ± 4 . 7 7 . 1 ± 2 . 0①3 0 . 1 ± 4 . 9 2 7 . 8 ± 4 . 2 1 3 . 9 ± 3 . 1①

綜上，與模型對(duì)照組比較，蜂膠配伍姜黃高、中、低劑量組小鼠SUA水平和肝臟XOD活性呈現(xiàn)劑量依賴性下降。

5 討論

蜂膠是蜜蜂集植物樹(shù)脂，并混入其唾液腺分泌物及蜂蠟、花粉等經(jīng)咀嚼加工而成的一種黏稠物質(zhì)，具有護(hù)肝、抗腫瘤、抗氧化、抗微生物、抗炎等藥理作用[4]，此外，蜂膠還可降低高尿酸血癥模型小鼠血液尿酸[5]。姜黃為姜科植物姜黃Curcuma longa L.的干燥根莖，味辛、苦、溫，歸脾、肝經(jīng)，是常用的活血化瘀藥，具有破血行氣、通經(jīng)止痛之功效。臨床用于風(fēng)濕痹痛、跌撲腫痛、筋脈拘攣、骨節(jié)酸痛等的治療。中醫(yī)臨床常與其它中藥配伍用于降尿酸和抗痛風(fēng)的治療。蜂膠和姜黃配伍具有抗高尿酸血癥作用潛力。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果示：蜂膠配伍姜黃各組小鼠體重與模型對(duì)照組、溶劑對(duì)照組、正常對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，而別嘌醇組與正常對(duì)照組比較，體重下降(P＜0.05)。提示別嘌醇對(duì)小鼠體重有影響，這可能與別嘌醇具有較大副作用，如胃腸道刺激所致的嘔吐、食欲不振，肝腎損害等有關(guān)。模型對(duì)照組和溶劑對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，SUA含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示造模成功。蜂膠配伍姜黃高、中、低劑量組與模型對(duì)照組比較，SUA含量下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示蜂膠配伍姜黃有降低小鼠血液高尿酸血癥的作用。模型對(duì)照組和溶劑對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，肝XOD活性升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；蜂膠配伍姜黃各劑量組和別嘌醇組與模型對(duì)照組比較，肝XOD活性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示蜂膠配伍姜黃和別嘌醇具有抑制XOD活性的作用。姜黃提取物組提取物有一定的降SUA和XOD的作用，但作用不顯著，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)果提示，蜂膠配伍姜黃有降低高尿酸血癥模型小鼠血尿酸及XOD活性的作用，其作用要優(yōu)于單味中藥——姜黃提取物。本研究為蜂膠配伍姜黃的抗高尿酸血癥相關(guān)臨床應(yīng)用和藥物開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。

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（責(zé)任編輯：劉淑婷）

Experimental Study of Propolis Combined with Curcuma on Anti-hyperuricaemi

CHEN Xuan，REN Zeming，TONG Yeling，DAI Guanhai，YANG Feng

Objective：To observe the influence of propolis combined with curcuma on the activity of Uric Acid(UA)and xanthine oxidase(XOD)in hyperuricaemia mice model.Methods：The mice were randomly divided into 7 groups，including low，middle and high dose of propolis combined with curcuma group，allopurinol group，hyperuricaemia model control group，camellia oil control group and normal control group.The body weight，UA level and XOD activity in liver were observed for all mice in each group.Results：Compared to hyperuricaemia model control group，UA level and XOD activity in liver of mice of the three doses of propolis combined with curcuma groups received significantly dose-dependent decrease.Conclusion：Propolis combined with curcuma can reduce UA level and XOD activity in liver in hyperuricaemia mice model.

Anti-hyperuricaemia；Propolis；Curcuma；Compatibility

R285.5

A

0256-7415（2016）02-0233-03

10.13457/j.cnki.jncm.2016.02.090

2015-10-29

浙江省科技廳資助項(xiàng)目（2014F50029）；浙江省科技廳資助項(xiàng)目（2015F10015）

陳璇（1984-），女，博士，助理研究員，研究方向：中醫(yī)藥機(jī)理研究。

楊鋒，E-mail：13858088332@163.com。