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        穿心蓮內酯及其磺酸鹽抗血小板聚集的實驗研究*

        2016-02-14 01:23:30段龍士危瑋尹曉明謝歡吳東風趙詩云
        實用中西醫(yī)結合臨床 2016年12期
        關鍵詞:詩云磺酸鹽穿心蓮

        段龍士 ?,| 尹曉明 謝歡 吳東風 趙詩云#

        (1江西省吉安市第一人民醫(yī)院吉安 343000;2江西省中醫(yī)藥研究院南昌 330046;3江西省人民醫(yī)院檢驗科南昌 330006)

        穿心蓮內酯及其磺酸鹽抗血小板聚集的實驗研究*

        段龍士1?,|2尹曉明3謝歡2吳東風2趙詩云2#

        (1江西省吉安市第一人民醫(yī)院吉安 343000;2江西省中醫(yī)藥研究院南昌 330046;3江西省人民醫(yī)院檢驗科南昌 330006)

        目的:探討穿心蓮內酯及其磺酸鹽(喜炎平針)對血小板聚集的影響。方法:選擇穿心蓮內酯、穿心蓮內酯磺酸鹽(喜炎平)用二磷酸腺苷(ADP)作為誘導劑,分別測定大鼠體內給藥對血小板5 min內之最大聚集率。結果:大鼠體內穿心蓮內酯給藥劑量600 mg/kg與空白對照組比較(P>0.05)無顯著性差異,穿心蓮內酯磺酸鹽體內給藥劑量400 mg/kg與空白對照組比較(P<0.05,P<0.01),可顯著降低5 min之內最大聚集率。結論:穿心蓮內酯對SD大鼠體內給藥600 mg/kg抗血小板聚集作用不明顯,而其磺酸鹽400 mg/kg抗血小板聚集的作用明顯。

        穿心蓮內酯;穿心蓮內酯磺酸鹽;SD大鼠;血小板聚集率

        穿心蓮為爵床科植物的全草或葉。穿心蓮內酯(Andrographolide)為天然植物穿心蓮的主要有效成份,分子式C20H3O5,分子量為350.45,具有清熱解毒、消炎止痛之功效,對細菌性與病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊療效,被譽為天然抗生素藥物,該品為二萜類內酯化合物,均難溶于水,通常僅能口服給藥[1]。穿心蓮內酯總磺酸鈉,分子式:C20H29O5·NaSO3,它是通過穿心蓮內酯與濃硫酸發(fā)生酯化、脫水、成鹽精制而成的水溶性穿心蓮內酯磺酸鈉,由于它是在其結構中引入親水基團,因此其水溶性好,療效高,具有清熱解毒止咳止痢,用于支氣管炎、扁桃體炎、細菌性痢疾等,通常為注射用藥[2~3]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)清熱抗炎中藥同樣有抗血小板聚集的作用,有報道用穿心蓮內酯能夠使心肌梗死的死亡率下降13%以上,但抗血小板聚集效果如何報道不多,課題組研究發(fā)現(xiàn)穿心蓮內酯磺酸鹽具有抗血小板聚集的作用,通過兩者比較發(fā)現(xiàn)穿心蓮內酯及穿心蓮內酯磺酸鹽在血小板聚集功能上具有一定的差異,探討其藥理學的作用和可能的機制,為今后深入研究奠定了基礎,有望通過改變穿心蓮內酯的分子結構在功效上能得到進一步開發(fā)和應用。

        1 材料

        1.1 動物SD大鼠,SPF級,雄性,體重260~280 g,由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供,許可證SCXK(湘)2011-0003。

        1.2 藥物與試劑穿心蓮內酯滴丸150 mg/袋(天士力制藥集團股份有限公司);穿心蓮內酯磺酸鈉(喜炎平針2 ml∶50 mg,江西青峰藥業(yè)有限公司,批號2015032003);阿司匹林(Aspirin)購于拜耳醫(yī)藥保健有限公司,批號BJ16334;二磷酸腺苷(Adenosine Diphosphate,ADP)購于美國海倫娜公司。

        1.3 主要儀器AggRam血小板聚集儀,型號:BJF52001,購于美國海倫娜公司,試劑為原裝配套試劑。日本西斯美康血凝儀CS-5100,試劑均為原裝進口配套。

        2 方法與結果

        2.1 大鼠體內給藥對血小板聚集影響的方法SD雄性大鼠32只,分成四組,每組8只,即正常對照組(生理鹽水)、阿司匹林腸溶片組(60 mg/kg)、穿心蓮內酯滴丸組(600 mg/kg),穿心蓮內酯磺酸鈉組(400 mg/kg)。阿司匹林腸溶片組、穿心蓮內酯組、穿心蓮內酯磺酸鹽組腹腔注射給藥連續(xù)5 d,第4天禁食過夜,第5天給藥2 h后用乙醚麻醉,腹主動脈取血,用3.8%枸櫞酸鈉溶液按1∶9抗凝,以1 000 r/min離心10 min取上清液即得富血小板血漿(PRP),剩余部分以3 000 r/min離心10 min,取上清液即得貧血小板血漿(PPP),用PPP調PRP中的血小板數(shù)為(3~4)×109/L,采用比濁法測定,取250 μl置37℃恒溫培養(yǎng)箱溫育5 min,加入誘導劑ADP溶液25 μl(5 μmol/L),用血小板聚集儀進行動態(tài)測量血小板聚集能力,記錄血小板5 min最大聚集率(PAGmax),與正常對照組比較計算給藥組血小板聚集的最大抑制率(IR),IR=(正常對照組PAGmax-給藥組PAGmax)/正常對照組PAGmax×100%。

        2.2 大鼠體內給藥對血小板聚集影響的結果穿心蓮內酯磺酸鹽組、阿司匹林腸溶片組血小板在5 min內最大聚集率均明顯低于正常對照組(P<0.01),有非常顯著性意義。阿司匹林腸溶片組、穿心蓮內酯組、穿心蓮內酯磺酸鹽組IR分別為20.6%、2.57%、36.4%。說明穿心蓮內酯磺酸鹽具有抗血小板聚集作用,而穿心蓮內酯組和正常對照組比較(P>0.05,)無統(tǒng)計學意義。見表1。

        表1 穿心蓮內酯及其磺酸鹽對ADP誘導大鼠體內血小板聚集的影響()

        表1 穿心蓮內酯及其磺酸鹽對ADP誘導大鼠體內血小板聚集的影響()

        注:與正常對照組比較,*P<0.01。

        組別n劑量(mg/kg)血小板5 min最大聚集率(%)血小板聚集抑制率(%)正常對照組阿司匹林腸溶片組穿心蓮內酯滴丸組穿心蓮內酯磺酸鹽組8 8 8 8 60 400 600 70.34±8.78 58.26±6.50*71.51.±5.31 46.66±7.47*20.6 2.57 36.4

        3 討論

        血小板的聚集是動脈血栓和微血栓形成的最主要的因素,其機理主要是血小板過度活化(釋放)和凝血系統(tǒng)過度激活的結果??寡“寰奂臋C理可能是:(1)抑制血小板環(huán)氧化酶,使血小板產生血栓烷素A2的能力下降,ADP誘導血小板顆粒內的ADP釋放,而阻止了Ⅱ相聚集;(2)封閉和阻斷此纖維蛋白受體(FgR)的作用,達到競爭性抑制;(3)ADP可抑制血小板表面ATP酶的活性,ATP酶可以防止血小板相互粘聚,達到抑制血小板聚集;(4)封閉血小板暴露出磷脂表面,因而阻斷Ca2+“搭橋”而達到抗血小板粘聚的作用[4~6]。

        眾所周知在預防心腦血管疾病藥物中阿司匹林(ASP)的效果顯著,主要作用是抑制血小板聚集、黏附及釋放,增強內皮細胞功能,進而防治血栓的形成,達到降低心腦血管疾病風險的作用。其機理為不可逆的抑制血小板內環(huán)氧合酶的合成,阻礙血小板花生四烯酸衍變PDD2,PGH2以及TXA2的生成,最終達到抑制血小板聚集、血栓的形成,還對ADP誘導的Ⅱ相聚集及低濃度的凝血酶都有抑制作用。雖然ASP在預防和治療血栓性疾病方面都發(fā)揮了積極的作用,但是引起血小板聚集的因素很多,它的作用途徑較為單一,加之其副作用等問題,在臨床應用上還是受到一定的限制。

        結果顯示,穿心蓮內酯在一定藥物范圍內抗血小板聚集作用不明顯,可能與其分子結構有關,水溶性差,利用率低。穿心蓮內酯磺酸鹽化學成分確定,抗炎功效明顯,其水溶性好,穩(wěn)定性及生物利用度高,通過其對大鼠的抗血小板聚集的藥理學研究,發(fā)現(xiàn)穿心蓮內酯磺酸鹽可明顯降低血小板聚集率,表明穿心蓮內酯磺酸鹽對血小板聚集有抑制作用。至于穿心蓮內酯磺酸鹽是通過哪一途徑使血小板聚集率下降,這些機理都有待今后進一步探討。

        [1]劉晟楠,魏惠珍,殷文靜,等.不同產地不同部位3種穿心蓮內酯成分研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2016,27(6):1483-1484

        [2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].2015年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015.412,1308

        [3]鐘星明,鐘美興,邱芳,等.穿心蓮內酯對心肌肥厚大鼠心肌膠原及心肌酶譜的影響[J].時珍國醫(yī)國藥,2016,27(4):822-823

        [4]趙詩云,危瑋,尹小明,等.喜炎平抗ADP誘導的血小板聚集作用的實驗研究[J].實用中西醫(yī)結合臨床,2016,16(8):81-82

        [5]尹小明,趙詩云,彭旦明,等.SD大鼠血小板聚集實驗測定方法的研究[J].南昌大學學報(醫(yī)學版),2013,53(8):6-7

        [6]尹小明,趙詩云,饒麗華,等.雞血藤不同成分抗AA誘導的血小板聚集作用得實驗研究[J].2016,34(4):422-424

        R285.5

        B

        10.13638/j.issn.1671-4040.2016.12.046

        2016-11-08)

        江西省衛(wèi)生計生委中醫(yī)藥科研課題(編號:2008A291)

        #通訊作者;趙詩云,E-mail:2605594053@qq.com

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