景永帥，張丹參，戎欣玉，杜紅霞，吳蘭芳

（1.河北科技大學(xué)化學(xué)與制藥工程學(xué)院，河北 石家莊 050018；2.河北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，河北 石家莊 050200）

遠(yuǎn)志多糖分散片的處方優(yōu)化及質(zhì)量控制

景永帥1，張丹參1，戎欣玉1，杜紅霞1，吳蘭芳2*

（1.河北科技大學(xué)化學(xué)與制藥工程學(xué)院，河北 石家莊 050018；2.河北中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，河北 石家莊 050200）

優(yōu)化遠(yuǎn)志多糖分散片制備處方，并進(jìn)行質(zhì)量控制。以崩解時(shí)限為主要指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法對(duì)遠(yuǎn)志多糖片的輔料和壓力進(jìn)行篩選，并對(duì)其質(zhì)量控制進(jìn)行研究。結(jié)果表明：采用交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮為崩解劑，碳酸鈣為填充劑，體積分?jǐn)?shù)為65%的乙醇溶液為黏合劑，滑石粉為潤滑劑，濕法制粒壓片制備的多糖片每片含遠(yuǎn)志多糖40 mg，崩解時(shí)間為56 s，15 min溶出度為標(biāo)示量的77.65%。說明利用該處方制備遠(yuǎn)志多糖片制備工藝簡單，崩解快，性質(zhì)穩(wěn)定，具有實(shí)用價(jià)值。

遠(yuǎn)志多糖分散片；質(zhì)量控制；制備工藝

遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志（Polygala tenuifolia Willd.）或卵葉遠(yuǎn)志（Polygala sibirica L.）的干燥根[1]。始記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，具有安神益智、交通心腎臟、祛痰、消腫的功效，用于心腎不交引起的失眠多夢(mèng)、健忘驚悸、神志恍惚、咳痰不爽、瘡瘍腫毒、乳房腫痛等癥[2，3]。已報(bào)道的化學(xué)成分主要包含三萜皂苷類、糖類、酮類，以及少量生物堿、香豆素、木質(zhì)素等[4]。遠(yuǎn)志多糖是遠(yuǎn)志中一類重要的活性物質(zhì)，并且是含量最高的活性成分。研究表明，遠(yuǎn)志多糖具有改善記憶力[4]、調(diào)節(jié)免疫[5]、抗腫瘤[6]、抗氧化[7]以及促進(jìn)益生菌生長[8]等作用。遠(yuǎn)志作為藥食兩用資源，日益受到研究人員的關(guān)注，逐漸成為增強(qiáng)免疫、改善睡眠類藥物和保健品的研發(fā)熱點(diǎn)。

分散片是近年來研制開發(fā)的一種新劑型，其生產(chǎn)工藝無特殊要求，可采用普通片劑生產(chǎn)線生產(chǎn)，兼具固體制劑和液體制劑的優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛使用在藥品和食品工業(yè)中[9]。筆者發(fā)現(xiàn)目前國內(nèi)還沒有遠(yuǎn)志多糖制劑上市，因此，本研究以遠(yuǎn)志水提醇沉多糖為原料，選用交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮、碳酸鈣、滑石粉、無水乙醇等為輔料，優(yōu)化了遠(yuǎn)志多糖分散片的制備處方，并采用紫外分光光度法測(cè)定主藥含量，同時(shí)進(jìn)行溶出度研究。本實(shí)驗(yàn)的開展為遠(yuǎn)志多糖產(chǎn)品的開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料

1.1藥材

遠(yuǎn)志購自河北安國藥材市場(chǎng)，經(jīng)河北中醫(yī)學(xué)院鄭玉光教授鑒定為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志的干燥根。

1.2試劑

交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮，購自安徽山河藥用輔料股份有限公司；滑石粉，購自上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司；無水碳酸鈣、淀粉，購自成都市科龍化工試劑廠；低取代羥丙基纖維素（L-HPC），購自上海厚誠精細(xì)化工有限公司；過氧化氫、無水乙醇、葡萄糖對(duì)照品、苯酚，購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；濃硫酸，購自北京化工廠；其他化學(xué)試劑為進(jìn)口或國產(chǎn)分析純。

1.3主要儀器

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，購自東京理化器械株式會(huì)社；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，購自寧波自動(dòng)化儀器研究所；紫外分光光度儀，購自上海光譜儀器有限公司；單沖壓片機(jī)，購自中南制藥機(jī)械廠；智能片劑硬度儀，購自天津大學(xué)無線電廠；智能崩解儀，購自天津大學(xué)精密儀器廠；智能溶出試驗(yàn)儀，購自天津大學(xué)無線電廠；分析天平，購自上海精科儀器公司。

2方法與結(jié)果

2.1遠(yuǎn)志多糖的制備

參照本課題組前期的遠(yuǎn)志多糖最優(yōu)工藝方法提取遠(yuǎn)志粗多糖 。遠(yuǎn)志粗多糖PTP 80使用木瓜蛋白酶結(jié)合Sevag法除蛋白，XAD-7型大孔樹脂除色素，然后用自來水、蒸餾水分別透析48 h[10]，真空冷凍干燥后得到遠(yuǎn)志多糖，備用。

2.2遠(yuǎn)志多糖片的制備

將遠(yuǎn)志多糖（主藥）、碳酸鈣（填充劑）、PVPP（內(nèi)加崩解劑）等過100目篩，混合均勻，以一定濃度乙醇溶液為黏合劑，制軟材，30目篩濕法制粒，80℃干燥20 min，過篩整粒，外加PVPP（外加崩解劑）和滑石粉（潤滑劑），混合均勻，壓片，片重200 mg，每片含遠(yuǎn)志多糖40 mg。

2.3遠(yuǎn)志多糖片的處方篩選

2.3.1輔料的篩選 由于片劑輔料多為多糖類，可能對(duì)應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定主藥遠(yuǎn)志多糖的含量產(chǎn)生影響，參考課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果[11]，本實(shí)驗(yàn)選擇了對(duì)多糖含量測(cè)定無干擾的碳酸鈣、PVPP和滑石粉作為輔料。

2.3.2崩解劑用量及加入方式的考察 對(duì)常用崩解劑羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素鈉、PVPP進(jìn)行篩選，結(jié)果表明，僅PVPP對(duì)多糖含量測(cè)定無干擾，故選擇PVPP作為崩解劑。對(duì)其用量和加入方式進(jìn)行考察，按處方量碳酸鈣為填充劑，滑石粉為潤滑劑，采用內(nèi)加或內(nèi)外加法，按2.2項(xiàng)下方法壓片，壓力為5 kg，考察崩解時(shí)間（見表1）。

表1 崩解劑PVPP用量和加入方式對(duì)崩解時(shí)間的影響（n=6）

從表1可以看出，崩解劑的用量在15%時(shí)，且內(nèi)加50%，外加50%比較合適。因此，選擇崩解劑的用量為15%（內(nèi)加50%，外加50%）作為正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的中心點(diǎn)。

2.3.3黏合劑乙醇溶液濃度的考察 按處方量，碳酸鈣為填充劑，PVPP為崩解劑，滑石粉為潤滑劑，按2.2項(xiàng)下方法壓片，考察崩解時(shí)間（見表2）。

表2 黏合劑乙醇溶液的濃度對(duì)崩解時(shí)間的影響

由表2可知，選擇乙醇溶液濃度為60%作為正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

的中心點(diǎn)。

2.3.4壓片壓力的考察 按上述單因素試驗(yàn)法確定分散片處方組成，按照2.2項(xiàng)下方法制備分散片，調(diào)整壓力，考察片劑的崩解時(shí)間（見表3）。

表3 壓力大小對(duì)崩解時(shí)間的影響

結(jié)果表明，壓力為3 kg時(shí)，崩解時(shí)間較短，但是硬度太低，為4.5 kg/cm2，不符合《中華人民共和國藥典》對(duì)片劑的規(guī)定；壓力為7 kg時(shí)，硬度適宜，為7.4 kg/cm2，但崩解時(shí)間較長；壓力為5 kg時(shí)硬度適宜，為6.4 kg/cm2，崩解時(shí)間為122 s。因此，選擇壓力為5 kg作為正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的中心點(diǎn)。

2.4正交試驗(yàn)優(yōu)化處方

在預(yù)實(shí)驗(yàn)及單因素篩選基礎(chǔ)上，選擇壓力（A）、PVPP用量（B）、乙醇溶液濃度（C）3個(gè)因素進(jìn)行考察，以崩解時(shí)間為評(píng)價(jià)指標(biāo)，按正交試驗(yàn)L9（34）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)[12]，優(yōu)化最佳處方組成和用量，見表4、5。

表4 正交試驗(yàn)因素與水平

表5 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果分析

根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果：所考察的3個(gè)因素對(duì)崩解時(shí)間的影響由大到小依次為：壓力，崩解劑PVPP的用量，黏合劑乙醇溶液的濃度。三者對(duì)遠(yuǎn)志多糖分散片的崩解時(shí)間均有顯著影響。最佳處方為A2B2C3，即壓力為5 kg，PVPP用量為15%，乙醇溶液濃度為65%。

2.5重現(xiàn)性試驗(yàn)

按最佳處方與工藝制備3批遠(yuǎn)志多糖片，片劑外觀光潔，硬度合適，崩解時(shí)間分別為58 s、57 s、56 s，表明最優(yōu)處方工藝穩(wěn)定。

2.6遠(yuǎn)志多糖片的含量測(cè)定

2.6.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 以葡萄糖濃度（C）對(duì)吸光度值（D）回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程D=4.792 9C+0.045 3，r=0.999 2。濃度為0.05～0.20 mg/ml，線性關(guān)系良好[11]。

2.6.2專屬性試驗(yàn) 按處方比例，稱取處方量的空白輔料，定容于250 ml量瓶中，充分溶解，過濾，苯酚—硫酸法檢測(cè)[13]，結(jié)果表明：輔料對(duì)多糖的測(cè)定無干擾，可用于分散片中多糖含量的測(cè)定。

2.6.3精密度試驗(yàn) 取6片遠(yuǎn)志多糖片，分別研細(xì)，溶解，過濾，定容于250 ml量瓶中，同2.6.1操作，測(cè)吸光度值，RSD為0.87%，說明本方法精密度良好。

2.6.4回收率試驗(yàn) 稱取處方量的空白輔料，分別加入20、25、30 mg遠(yuǎn)志多糖，定容于250 ml量瓶中，溶解，過濾，取0.6 ml續(xù)濾液同2.6.1操作，測(cè)吸光度值。結(jié)果表明，其平均回收率為99.76%，RSD為0.83%，n=9。

2.6.5含量測(cè)定 取10片遠(yuǎn)志多糖片，精密稱定，研成細(xì)粉，精稱相當(dāng)于1片重量的細(xì)粉（3份）置250 ml量瓶中定容，充分溶解，過濾，取續(xù)濾液0.6 ml同2.6.1操作，測(cè)吸光度值，測(cè)得平均含量為39.7 mg。

2.7崩解時(shí)限的測(cè)定

按照2015版中國藥典方法[1]，取6片遠(yuǎn)志多糖片，置于崩解儀的吊籃中，水溫37℃，按崩解時(shí)限檢查法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果分散片的崩解時(shí)間分別為57、55、55、57、58、56 s。

2.8分散均勻性的檢查

按照2015版藥典方法[1]，不銹鋼絲網(wǎng)的篩孔內(nèi)徑為710 μm，水溫為15℃～25℃，取6片遠(yuǎn)志多糖片，振搖3 min，全部崩解并通過篩網(wǎng)。

2.9分散片溶出度的測(cè)定

采用2015版藥典溶出度測(cè)定第二法[1]，取樣品6片，精密稱定，置溶出儀杯中，分別于5、10、15、20、30、45、60、90 min時(shí)，取樣5.0 ml，過0.45 μm的微孔濾膜，取續(xù)濾液0.6 ml，同2.6.1操作，測(cè)吸光度值，求得遠(yuǎn)志多糖含量。在15 min時(shí)，6片的溶出度分別為78.32%，76.78%，77.53%，76.85%，79.05%，77.37%，平均溶出度為77.65%，RSD為1.14%，說明遠(yuǎn)志多糖分散片的溶出度符合藥典要求，同時(shí)繪制溶出曲線。

3結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)以遠(yuǎn)志多糖片的崩解時(shí)間為考察指標(biāo)，采取正交試驗(yàn)法對(duì)遠(yuǎn)志多糖分散片的輔料和壓力進(jìn)行篩選，并對(duì)該分散片的質(zhì)量進(jìn)行控制。制備的遠(yuǎn)志多糖分散片每片200 mg，含遠(yuǎn)志多糖40 mg，崩解時(shí)間為56 s，15 min時(shí)溶出度為77.65%，符合2015版藥典對(duì)分散片的要求，且制備工藝簡單，操作簡便，崩解較快，性質(zhì)穩(wěn)定，易于產(chǎn)業(yè)化，具有一定的實(shí)用價(jià)值。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[2]劉超，馬海英.傳統(tǒng)中藥遠(yuǎn)志研究概述[J].河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，18（5）：75-81.

[3]翁毅力.遠(yuǎn)志的藥理作用[J].中國藥業(yè)，2005，14（12）：89-90.

[4]劉大偉，康利平，馬百平.遠(yuǎn)志化學(xué)及藥理作用研究進(jìn)展[J].國際藥學(xué)研究雜志，2012，39（1）：32-36，44.

[5]閏啟光.遠(yuǎn)志多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].中國中醫(yī)藥咨訊，2009，6（1）：134.

[6]Xin T，Zhang F B，Jiang Q Y，et al.Purification and antitumor activity of two acidic polysaccharides from the roots of Polygala tenuifolia[J].Carbohydr Polym，2012（90）：1671-1676.

[7]景永帥，吳蘭芳，王乾，等.遠(yuǎn)志多糖提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性研究[J].食品與機(jī)械，2016，32（5）：152-157.

[8]戴遠(yuǎn)臣，侯紅漫，張公亮.遠(yuǎn)志多糖的提取條件優(yōu)化及對(duì)保加利亞乳桿菌的增殖影響[J].中國釀造，2012，31（1）：136-140.

[9]王文寶，趙樹娟，楊俊濤，等.杜仲葉分散片的制備與質(zhì)量控制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2014，33（4）：508-510.

[10]Jing Y S，Cui X L，Chen Z Y，et al.Elucidation and biological activities of a new polysaccharide from cultured Cordyceps militaris[J].Carbohydr. Polym，2014（102）：288-296.

[11]景永帥，吳蘭芳，戎欣玉，等.山楂多糖分散片的制備及質(zhì)量控制[J].河北工業(yè)科技，2016，33（1）：35-39.

[12]李早慧，王建明.黨參多糖片的制備及其質(zhì)量考察[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2015（12）：206-208.

[13]Jing Y S，Zhu J H，Liu T，et al.Structural characterization and biological activities of a novel polysaccharide from cultured Cordyceps militaris and its sulfated derivative[J].J Agric Food Chem，2015，63（13）：3464-3471.

（*通訊作者：吳蘭芳）

R944.2+4

B

1671-1246（2016）23-0114-03

注：本文系河北省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（H2016208059）；河北省中醫(yī)藥管理局項(xiàng)目（2015082）；河北省食藥監(jiān)局食品藥品安全科技項(xiàng)目（QN2015016）；河北中醫(yī)學(xué)院博士啟動(dòng)基金項(xiàng)目（BSZ2015005）