魏江存，陳 勇，康夢(mèng)瑩，庾延和，闕祖亮，張 昕，魏中璇，葉 信，龐丹清

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西南寧530001；2.北海市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西北海536000）

藥學(xué)研究

瑤藥紅涼傘的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究

魏江存1，陳 勇1，康夢(mèng)瑩2，庾延和1，闕祖亮1，張 昕1，魏中璇1，葉 信1，龐丹清1

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西南寧530001；2.北海市食品藥品檢驗(yàn)所，廣西北海536000）

［目的］建立瑤藥紅涼傘的質(zhì)量分析方法。［方法］采用TLC法鑒別紅涼傘藥材的主要成分，根據(jù)2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》的方法對(duì)紅涼傘藥材的水分、總灰分及醇溶性浸出物進(jìn)行測(cè)定。［結(jié)果］本實(shí)驗(yàn)的薄層色譜條件有較好的分離效果，且重復(fù)性較好，薄層色譜鑒別特征可以作為紅涼傘藥材的鑒別依據(jù)；水分、總灰分及醇溶性浸出物的測(cè)定結(jié)果為：水分8.84%~12.40%，總灰分2.62%~4.80%，酸不溶性灰分0.37%~0.97%，浸出物含量13.40%~16.85%。［結(jié)論］本實(shí)驗(yàn)的鑒別方法可用于紅涼傘的質(zhì)量控制，研究結(jié)果可為紅涼傘的開(kāi)發(fā)利用和建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。

紅涼傘；性狀鑒別；TLC鑒別；質(zhì)量分析

紅涼傘Ardisia crenata Sims.var.bicolor（Walker）C.Y. Wu et C.Chen為紫金?？浦参锛t涼傘的根及根莖，是朱砂根（Ardisia crenata Sims）的變種，又名紅八爪［1］，以根入藥，主要分布于我國(guó)廣西、廣東、云南、浙江、湖南和四川等地區(qū)，是瑤族和壯族民間常用中草藥。臨床研究表明［2］，紅涼傘具有祛風(fēng)除濕、清熱解毒、止咳平喘、抗HIV病毒［3］、抗腫瘤等藥理作用，常用于治療跌打損傷、關(guān)節(jié)疼痛、扁桃體炎、咽喉腫痛、腰背痛和蜂窩組織炎等［4］，并且具有較高的觀賞價(jià)值［5］。紅涼傘含有三萜皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)和酚類(lèi)等多種成分［6］，其中主要成分為巖白菜素（Bergenin），屬異香豆素類(lèi)化合物。紅涼傘在我國(guó)分布廣泛，資源十分豐富，具有很大的開(kāi)發(fā)價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)對(duì)紅涼傘的化學(xué)成分與藥理作用有一定的研究，但有關(guān)質(zhì)量分析的報(bào)道尚少，為研究和開(kāi)發(fā)紅涼傘藥材資源，建立科學(xué)的藥材評(píng)價(jià)方法，本文對(duì)紅涼傘藥材的性狀特征、薄層色譜、藥材各項(xiàng)檢查及浸出物測(cè)定等方面進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器101A-3E電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司）；SX2箱式電阻爐（上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司）；HWSZ6型電熱恒溫水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；SQP電子分析天平［賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司］；KQ5200B型超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑巖白菜素對(duì)照品（批號(hào)：140927，上海融禾醫(yī)藥科技有限公司）；硅膠G（HG/2354-95，青島海洋化工有限公司）；羧甲基纖維素鈉（天津市凱通化學(xué)試劑有限公司）；三氯甲烷、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、甲酸、鹽酸、三氯化鐵、鐵氰化鉀等（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.3 藥材實(shí)驗(yàn)用10批紅涼傘藥材均來(lái)源于廣西境內(nèi)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院郭敏副教授和梁子寧副教授鑒定為紫金?？浦参锛t涼傘Ardisia crenata Sims.var.bicolor（Walker）C.Y.Wu et C.Chen的根莖部分，藥材來(lái)源見(jiàn)表1。

表1 紅涼傘藥材來(lái)源

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別紅涼傘藥材根部形狀不規(guī)則，略膨大，頂端有莖殘基，下部生長(zhǎng)著一些支根，表面為紅褐色或褐色，有縱向皺紋及橫向斷裂痕。根莖數(shù)條，表面為淺棕紅色或紅褐色，根圓柱形而微彎曲，散射狀，長(zhǎng)短不一及粗細(xì)不勻，直徑2～10 mm，有細(xì)小須根或須根斷痕。質(zhì)硬而脆，易折斷，斷面不規(guī)則，且斷面的皮部易與木部分離，皮部厚度約為斷面的1/2～1/3，紅褐色；木部硬且呈類(lèi)白色，靠近木質(zhì)部處有深紅棕色或淺色的環(huán)紋。味辛，微辣，有刺舌感，見(jiàn)圖1。

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備精密取巖白菜素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 ml含0.2 mg巖白菜素對(duì)照品的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備取不同產(chǎn)地的紅涼傘藥材粉末各1 g，加甲醇20 ml，超聲40 min，過(guò)濾，取續(xù)濾液10 ml濃縮成2 ml，作為供試品溶液。

按照薄層色譜法［7］（《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VIB）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。分別吸取上述溶液10 μl，在同一硅膠G薄層板上點(diǎn)樣，以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇=5∶4∶2為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出晾干，噴以0.1%三氯化鐵和0.1%鐵氰化鉀混合溶液（體積比為1∶1），晾干，日光下檢視。上述實(shí)驗(yàn)中展開(kāi)劑具有良好的分離效果，操作簡(jiǎn)便且具有專(zhuān)屬性。在日光下藍(lán)色斑點(diǎn)清晰，供試品與對(duì)照品在同一位置上有相同的斑點(diǎn)，其它斑點(diǎn)對(duì)其無(wú)明顯影響。見(jiàn)圖2。

圖1 紅涼傘藥材（2014年7月采自玉林）

圖2 紅涼傘藥材TLC鑒別

2.3 水分、灰分及浸出物測(cè)定［7］取10批紅涼傘藥材，參照《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄IXH（第一法）水分測(cè)定法、附錄IXK灰分測(cè)定法、附錄XA醇溶性浸出物測(cè)定法（熱浸法，以乙醇為溶劑）進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2結(jié)果顯示，廣西境內(nèi)10批紅涼傘藥材的水分、總灰分、酸不溶性灰分含量均有一定的差異，水分平均含量為11.18%。2014年7月玉林市采集的紅涼傘藥材的水分在10批中含量最高，為12.40%，故以最高值的120%設(shè)限［8］，暫定紅涼傘藥材水分不高于14.88%?？偦曳譁y(cè)定中含量最高為4.80%，故以最高值的120%設(shè)限［8］，暫定紅涼傘藥材總灰分不高于5.76%。酸不溶性灰分測(cè)定中含量最高為0.97%，故以最高值的120%設(shè)限［8］，暫定紅涼傘藥材酸不溶性灰分不高于1.16%。浸出物測(cè)定中含量最低為13.40%，故以最低值的80%設(shè)限［7］，暫定紅涼傘藥材浸出物不低于10.72%。

表2 紅涼傘藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物測(cè)定結(jié)果

3 討論與小結(jié)

3.1 展開(kāi)劑的選擇本實(shí)驗(yàn)采用不同的展開(kāi)系統(tǒng)進(jìn)行比較：①氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇∶甲酸（12∶4∶2∶1）［9］；②氯仿∶甲醇∶乙酸乙酯∶甲酸（4∶1∶1∶1.5）［10］；③氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇（5∶4∶2）［11］；④石油醚∶氯仿∶無(wú)水乙醇（5∶5∶4）［12］；⑤氯仿∶甲醇（8∶2）［13］。其中使用展開(kāi)系統(tǒng)③氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇=5∶4∶2進(jìn)行展開(kāi)時(shí)，獲得的藍(lán)色斑點(diǎn)不僅清晰而且具有較好的分離效果，因此選擇此展開(kāi)系統(tǒng)。

3.2 顯色劑的選擇本實(shí)驗(yàn)比較了3種不同的顯色劑：0.1%三氯化鐵∶0.1%鐵氰化鉀溶液（1∶1）［11］，10%硫酸乙醇溶液和5%香草醛濃硫酸溶液；其中0.1%三氯化鐵∶0.1%鐵氰化鉀溶液（1∶1）的顯色效果最好而且斑點(diǎn)穩(wěn)定。

3.3 小結(jié)對(duì)紅涼傘藥材性狀特征的描述及其薄層色譜鑒別特征可以作為紅涼傘藥材的鑒別依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)采用氯仿∶乙酸乙酯∶甲醇為展開(kāi)劑，0.1%三氯化鐵和0.1%鐵氰化鉀溶液（1∶1）為顯色劑，在此薄層色譜條件下分離效果較好，并且有較好的重復(fù)性。對(duì)紅涼傘藥材水分、灰分及主要有效部位的醇溶性浸出物進(jìn)行了測(cè)定研究，測(cè)定結(jié)果為：水分8.84%~ 12.40%，總灰分2.62%~4.80%，酸不溶性灰分0.37%~0.97%，浸出物含量13.40%~16.85%。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果可為紅涼傘的開(kāi)發(fā)利用和制定藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。

［1］鄒萍，黃靜，郭弘川，等.紅涼傘根莖皂苷化學(xué)成分研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2009，21（2）:249.

［2］王雪，唐生安，翟慧媛，等.紅涼傘抗腫瘤轉(zhuǎn)移化學(xué)成分研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2011，36（7）:881-885.

［3］宿樹(shù)蘭，李永輝，歐陽(yáng)臻，等.紫金牛屬藥用植物中三萜皂苷類(lèi)成分的研究進(jìn)展［J］.中藥材，2003，26（2）:144.

［4］尹春萍，趙燕彪.鄂西民族藥朱砂根（紅涼傘）的生藥鑒定［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志，2004（1）:42-45.

［5］鄧素芳，黃烯，賴(lài)鐘雄，等.朱砂根的藥用價(jià)值與觀賞價(jià)值［J］.亞熱帶農(nóng)業(yè)研究，2006，2（3）:176-178.

［6］張清華.紫金牛屬植物化學(xué)成分研究概況［J］.華西藥學(xué)雜志，1994，9（2）:99-108.

［7］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄26.

［8］劉林鳳，高寶益，高淑紅，等.龍葵藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（9）:77-79.

［9］丘翠嫦，戴斌，李釗東，等.瑤醫(yī)用紫金牛屬植物12種藥材的薄層色譜鑒別［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志，1997（25）:36-38.

［10］鄔家林，龐偉，宋良科，等.四川紫金牛屬藥用植物的薄層層析鑒別［J］.中藥材，1994，17（3）:25-26.

［11］彭麗彬，陳隨清，王紅霞，等.紅涼傘生藥學(xué)研究［J］.河南科學(xué)，2008，26（3）:298-301.

［12］劉姩，李穎，郭濟(jì)賢，等.中國(guó)紫金牛屬的分類(lèi)及其巖白菜素的含量研究［J］.上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1993，20（1）: 49-54.

［13］趙建平.復(fù)方巖白菜素片的薄層色譜鑒別法［J］.廣西中醫(yī)藥，2000，23（5）:54-55.

（編輯 陳明偉）

Primary Research on Quality Standard for Ardisia crenata Sims.var.bicolor（Walker）of Yao medicine

WEI Jiang－cun1，CHEN Yong1，KANG Meng－ying2，YU Yan－h(huán)e1，QUE Zu－liang1，ZHANG Xin1，WEI Zhong－xuan1，YE Xin1，PANG Dan－qing1
（1.Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning，Guangxi，530001；2.Guangxi Beihai Institute for Food and Drug Control，Beihai，Guangxi，536000）

［Objective］To establish the quality analysis method for Ardisia crenata Sims.var.bicolor（Walker）of Yao medicine.［Methods］TLC was performed to identify the main component of Ardisia crenata.The moisture，total ash and alcohol－soluble extract were determined based on the Chinese pharmacopoeia of 2015 edition.［Results］The TLC conditions of this experiment have good separation effect and reproducibility.TLC identification characteristics could be regarded as the distinguishing basis of Ardisia crenata.The moisture，total ash content and alcoholic－soluble extract content were 8.84%～12.40%，2.62%～4.80%，0.37%～0.97%and 13.40%～16.85%respectively.［Conclusion］The identification method of this experiment can be used for the quality control of Ardisia crenata.The research results can provide scientific basis for the development and utilization of Ardisia crenata and establishment of quality standard.

Ardisia crenata Sims.var.bicolor（Walker）；morphological identification；TLC identification；quality analysis

R284.1

A

2095-4441（2016）04－0062－03

2016－10－13

國(guó)家自然科學(xué)基金委地區(qū)基金項(xiàng)目（編號(hào)：81260673）；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（編號(hào)：81360524）；廣西中醫(yī)藥大學(xué)科

研創(chuàng)新項(xiàng)目（編號(hào)：YJS201625）；廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院青年科學(xué)基金項(xiàng)目（編號(hào)：GZYQJ13）；廣西中醫(yī)藥大學(xué)科研創(chuàng)新項(xiàng)目（編號(hào)：YJS201613）

陳勇，教授，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向：從事中藥及其制劑質(zhì)量分析研究；E-mail:cy6381@163.com