有效的HPLC方法轉(zhuǎn)移

Agilent1260系統(tǒng)到ACQUITY Arc系統(tǒng)的HPLC方法轉(zhuǎn)移

本文通過比較鹽酸甲氧氯普胺有關(guān)物質(zhì)分析和系統(tǒng)適應(yīng)性結(jié)果，展示了從Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)到ACQUITY?ArcTM系統(tǒng)的HPLC方法轉(zhuǎn)移。ACQUITY Arc系統(tǒng)成功重現(xiàn)了Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)上完成的色譜分離，并得到了可靠、穩(wěn)定、可重現(xiàn)的結(jié)果。

所有藥物生產(chǎn)商都必須對活性藥物成分(API)及其有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行分析以確保最終藥品的安全性和療效。通常，這些測定工作在整個實驗室機構(gòu)內(nèi)進(jìn)行，也或者是選擇承包給第三方實驗室（而他們多數(shù)都使用不同供應(yīng)商品牌的分析儀器）。因此，對于分析實驗室來說，能夠在不同儀器間成功實現(xiàn)方法的轉(zhuǎn)移具有至關(guān)重要的意義，這樣一來，就能夠確保產(chǎn)品的一致性和合規(guī)性。值得一提的是，有效的方法轉(zhuǎn)移能夠使同一種分析方法始終得出相同結(jié)果而不受儀器、實驗室資源的影響。這對于免去昂貴且耗時的方法重復(fù)驗證步驟來說非常重要。在本研究中，我們證實了從Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)到ACQUITY Arc系統(tǒng)的鹽酸甲氧氯普胺有關(guān)物質(zhì)分析的HPLC方法轉(zhuǎn)移。

方法轉(zhuǎn)移的評判方法

成功實現(xiàn)方法轉(zhuǎn)移的評判方法是檢驗色譜的分離結(jié)果是否相似，以及驗證系統(tǒng)適應(yīng)性結(jié)果是否符合USP通用章節(jié)〈621〉色譜法1中定義的規(guī)范。本研究解決方案中，使用的鹽酸甲氧氯普胺有關(guān)化合物列于表1。

本文的分離儲液均使用甲醇配制，濃度為1.0 mg/ml，用水將甲氧氯普胺儲液稀釋至0.5 mg/ml，有關(guān)物質(zhì)的加標(biāo)量為1.0%。在進(jìn)行系統(tǒng)適應(yīng)性試驗時，各種儲液均移至一個樣品瓶中，分別用水稀釋，使每種分析物濃度均為0.05 mg/ml。然后使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋液(50：50，甲醇/水)將混合溶液分別稀釋至15 μg/ml，以進(jìn)行系統(tǒng)適應(yīng)性測定。

表1. 方法轉(zhuǎn)移中USP指定的鹽酸甲氧氯普胺有關(guān)物質(zhì)的列表

表2. 流動相梯度設(shè)置

檢驗色譜分離結(jié)果是否相似

首先在Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)上運行HPLC方法，然后轉(zhuǎn)移至ACQUITY Arc系統(tǒng)運行。ACQUITY

本文資料由沃特世科技(上海)有限公司提供。Arc系統(tǒng)具有新型Multi-flow pathTM技術(shù)，該技術(shù)可高效轉(zhuǎn)移上一代LC儀器所適用的方法。具體HPLC方法轉(zhuǎn)移的儀器條件如表3所示。

Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)和ACQUITY Arc系統(tǒng)中得到的樣品(含甲氧氯普胺API和1.0%有關(guān)物質(zhì))色譜數(shù)據(jù)如圖1所示。ACQUITY Arc系統(tǒng)所得的色譜分離結(jié)果與Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)中得到的結(jié)果相近。使用與ACQUITY Arc系統(tǒng)聯(lián)用的ACQUITY QDa?檢測器得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過質(zhì)譜檢測確證甲氧氯普胺及其有關(guān)物質(zhì)。Empower?3軟件的質(zhì)譜分析窗口(圖2)所示為單個結(jié)果的UV和質(zhì)譜數(shù)據(jù)。輔以UV檢測結(jié)果的質(zhì)譜數(shù)據(jù)可快速確證樣品組分。

圖1.從Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)到ACQUITY Arc系統(tǒng)的方法轉(zhuǎn)移中，含1.0%有關(guān)物質(zhì)的0.5 mg/ml甲氧氯普胺API的色譜數(shù)據(jù)。

圖2.使用ACQUITY QDa檢測器獲得的質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過質(zhì)譜檢測確證峰，Empower 3軟件的質(zhì)譜分析窗口顯示了單個結(jié)果的UV和質(zhì)譜數(shù)據(jù)。

系統(tǒng)方法的適應(yīng)性結(jié)果

在ACQUITY Arc系統(tǒng)和Agilent 1260 Infnity LC系統(tǒng)上根據(jù)USP通用章節(jié)〈621〉色譜法1中的要求使用系統(tǒng)適應(yīng)性溶液重復(fù)進(jìn)樣五次，比較所得結(jié)果以驗證ACQUITY Arc系統(tǒng)上HPLC方法的性能。

針對Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)和ACQUITY Arc系統(tǒng)間的方法轉(zhuǎn)移，

得益于獨有的Multi-fow path技術(shù)，ACQUITY Arc系統(tǒng)能夠從各種平臺輕松接受并重現(xiàn)方法，且無需犧牲任何方法的完整性。ACQUITY Arc系統(tǒng)具有強大的LC性能，能夠通過整合諸如ACQUITY QDa檢測器和Empower色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)(CDS)軟件等新技術(shù)來保障實驗室投資。

表3.從Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)向ACQUITY Arc系統(tǒng)進(jìn)行鹽酸甲氧氯普胺及其USP有關(guān)物質(zhì)的HPLC方法轉(zhuǎn)移的儀器條件

小結(jié)

甲氧氯普胺及其有關(guān)物質(zhì)的HPLC方法成功地從Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到了Waters ACQUITY Arc系統(tǒng)。ACQUITY Arc系統(tǒng)成功重現(xiàn)了Agilent 1260 Infnity LC系統(tǒng)所得的色譜分離水平，并且系統(tǒng)適應(yīng)性符合USP通用章節(jié)〈621〉色譜法1中定義的規(guī)范,滿足系統(tǒng)適應(yīng)性要求對于始終符合良好實驗室規(guī)范來說至關(guān)重要。此外，與UV檢測配合使用的ACQUITY QDa檢測器能夠通過質(zhì)譜檢測快速確證峰。

總體而言，ACQUITY Arc系統(tǒng)能夠提供可靠性、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性高的結(jié)果，有助于提升QC實驗室中常規(guī)檢測的通量和效率。

表4.針對Agilent 1260 Infinity LC系統(tǒng)和ACQUITY Arc系統(tǒng)間的方法轉(zhuǎn)移，使用系統(tǒng)適應(yīng)性溶液重復(fù)進(jìn)樣五次得到的系統(tǒng)適應(yīng)性結(jié)果