秦卓明，徐懷英，馬秀麗，黃兵，李福偉，雷秋霞，李玉峰，曹頂國(guó)，逯巖，崔治中

（1.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，山東 濟(jì)南 250023；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，山東 泰安 271018）

山東省地方品系種雞禽白血病凈化技術(shù)的經(jīng)驗(yàn)與探討*

秦卓明1，徐懷英1，馬秀麗1，黃兵1，李福偉1，雷秋霞1，李玉峰1，曹頂國(guó)1，逯巖1，崔治中2

（1.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，山東 濟(jì)南 250023；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，山東 泰安 271018）

按照崔治中教授推薦的方案，對(duì)山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所保存的優(yōu)質(zhì)地方品種雞，分別進(jìn)行了多年的禽白血病持續(xù)凈化。禽白血病病毒p27病原攜帶率由凈化前的平均50%以上，降低到目前的不足5%，部分品種的1日齡雛雞胎糞檢測(cè)已經(jīng)連續(xù)三代ALV p27病原陽(yáng)性率控制在0.3%以內(nèi)，開(kāi)產(chǎn)前的母雞蛋清陽(yáng)性率已連續(xù)2代低于1%，凈化效果明顯。該凈化方案為我國(guó)地方品種雞禽白血病的凈化提供了一條技術(shù)可行的操作路徑。

禽白血病病毒；地方品種雞；凈化

禽白血?。ˋvian leucosis virus，ALV）是由反轉(zhuǎn)錄病毒科禽白血病/肉瘤病毒群病毒引起的禽類多種腫瘤性疾病的總稱，具有血清型多 （包括A、B、C、D和J亞型）、亞臨床感染、垂直傳播、感染率高等特點(diǎn)，既可誘發(fā)產(chǎn)生腫瘤，導(dǎo)致雞群死亡，又可導(dǎo)致雞群生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、免疫抑制等，并嚴(yán)重影響生產(chǎn)性能[1-2]。

經(jīng)過(guò)世界禽白血病凈化專家近20～30年的努力，目前國(guó)際上保留下來(lái)的不同品系的白羽肉用型種雞或蛋用型種雞群均已基本凈化了不同亞群的家禽外源性白血病。但在我國(guó)，由于歷史原因，我國(guó)自繁自養(yǎng)的地方品種雞群大多都不同程度感染了經(jīng)典的A或B亞群ALV，甚至感染了隨白羽肉雞由國(guó)外傳入的J亞群ALV[3-4]。流行病學(xué)調(diào)查顯示：部分純地方品種雞群對(duì)ALV-J的感染率已相當(dāng)高，且已開(kāi)始表現(xiàn)典型的髓細(xì)胞瘤和其他禽白血病的病理變化[3-5]。因此，適時(shí)開(kāi)展地方品種雞群ALV凈化對(duì)于保障我國(guó)地方品種種子資源，防止禽白血病散播和流行意義重大。

山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所為山東省地方雞種子資源基因保存中心，擁有10多個(gè)優(yōu)秀的家禽地方品種資源。為提高種子資源健康和保障后代雛雞質(zhì)量，提高地方品種的生長(zhǎng)和繁育性能，我們對(duì)保存的部分地方品種雞進(jìn)行了禽白血病初步凈化，并對(duì)其中的4個(gè)品種進(jìn)行了重點(diǎn)凈化。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 主要試劑 禽白血病p27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒、AB/J亞型抗體ELISA診斷試劑盒，均購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司；農(nóng)業(yè)部哈爾濱獸醫(yī)研究所研制的禽白血病P27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒 （高玉龍研究員惠贈(zèng)，在此表示感謝）。

1.1.2 細(xì)胞系 DF-1細(xì)胞系，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)趙鵬博士惠贈(zèng)，由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所保存。

1.2 樣品采集 對(duì)不同品種母雞的泄殖腔棉拭子、蛋清及公雞的精液以及1日齡雛雞胎糞分別進(jìn)行了p27抗原檢測(cè)。

1.3 地方品種核心群外源性ALV凈化的程序從2008年以來(lái)，我們就陸續(xù)開(kāi)始按照崔治中教授的建議進(jìn)行白血病凈化[6]。程序如下：

1.3.1 開(kāi)產(chǎn)初期（23～25周齡）檢測(cè)和淘汰 初產(chǎn)期往往是雞群禽白血病病毒排毒高峰期，開(kāi)產(chǎn)前公、母雞全部帶翅號(hào)，每個(gè)剛開(kāi)產(chǎn)母雞連續(xù)3枚蛋的蛋清用ALV p27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒做p27抗原檢測(cè)，淘汰陽(yáng)性雞。公雞可采集精液檢測(cè)p27抗原，淘汰陽(yáng)性雞。鑒于部分雞品種的精液p27假陽(yáng)性率太高，可對(duì)其血漿做病毒分離，以病毒分離的結(jié)果為準(zhǔn)。對(duì)每只后備種雞分別采集血漿接種DF-1細(xì)胞分離病毒，培養(yǎng)9d后用ALV p27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒逐孔檢測(cè)細(xì)胞，淘汰陽(yáng)性種雞。如果后備種雞是小群飼養(yǎng)，同一小群中如有一只為陽(yáng)性，淘汰該小群所有雞。

1.3.2 留種前（40～45周齡）檢測(cè)和淘汰 取樣原則和檢測(cè)方法同上，淘汰陽(yáng)性種雞同上。在感染嚴(yán)重的核心種雞群，經(jīng)過(guò)上一輪檢測(cè)淘汰后，部分地方品系的種雞在數(shù)量上可能不能滿足遺傳多樣性的育種原則，但也要從嚴(yán)淘汰。作為補(bǔ)充，對(duì)于一些生物學(xué)性狀確實(shí)優(yōu)秀的個(gè)體，仍然可以保留，但必須與所有陰性雞隔離飼養(yǎng)。從這些檢測(cè)陽(yáng)性的種雞采集的種蛋再單獨(dú)孵化，相應(yīng)雛雞按同樣的凈化程序單獨(dú)隔離飼養(yǎng)，從由此長(zhǎng)成的下一代育成雞中仍可篩選出陰性雞，然后再并入前一世代篩選出的同一品系陰性雞群，以彌補(bǔ)地方品種雞數(shù)量不足難題。本文中的蘆花雞即采用此方案。

1.3.3 種蛋的選留和孵化 經(jīng)上面兩輪篩選后，選留的每只母雞，應(yīng)只跟選留公雞群中的1只公雞的精液授精，且按規(guī)定時(shí)間留足種蛋，每只母雞所產(chǎn)的蛋均標(biāo)上同一母雞號(hào)，置入孵化箱時(shí)集中放置。在孵化18d后出殼前，將每只母雞所產(chǎn)種蛋置于同一標(biāo)號(hào)的專用滅菌紙袋中，再轉(zhuǎn)到出雛箱中出雛袋（出雛袋厚度0.15mm，規(guī)格22×18cm，在雛雞高度以上的位置，在紙袋的四周打出10～12個(gè)直徑約1cm透氣孔），所選雛雞作為凈化后的第一世代。本文未嚴(yán)格按照此方法命名，兼顧了常規(guī)育種的命名。

1.3.4 雛雞1日齡胎糞檢測(cè) 出雛后，用棉拭子逐只采集1日齡雛雞胎糞 （每只操作完必須更換手套或徹底洗手消毒），置于小試管中。利用ALV抗原ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)胎糞p27抗原。要注意，同一只母雞所產(chǎn)雛雞中，有一只陽(yáng)性即要淘汰同紙袋中的所有雛雞，同時(shí)淘汰相應(yīng)種雞。

對(duì)選留的雛雞，以母雞為單位，同一母雞的雛雞放于一個(gè)籠中隔離飼養(yǎng)。每個(gè)籠間用紙板隔離，避免不同籠內(nèi)雛雞的直接接觸及直接氣流的對(duì)流造成ALV橫向傳播。

1.3.5 育雛6周齡后病毒血癥檢測(cè) 育雛期結(jié)束，采雞血漿，接種DF-1細(xì)胞分離病毒，培養(yǎng)9d后用ALV抗原ELISA檢測(cè)試劑盒逐孔檢測(cè)[7]，淘汰陽(yáng)性后備雞。對(duì)選留的后備種雞，仍應(yīng)維持小群隔離飼養(yǎng)，盡量使同一母雞的后代置于一個(gè)小群中。

1.3.6 凈化后第一世代留種雞開(kāi)產(chǎn)初期 （約23～25周齡）檢測(cè)和淘汰 操作同1.3.1。

1.3.7 凈化第一世代留種前 （約40～45周齡左右）檢測(cè)和淘汰 操作同1.3.2。

1.3.8 第二世代雞的檢測(cè)和淘汰 對(duì)經(jīng)上述1.3.1到1.3.7步檢測(cè)淘汰后種雞的出殼雛雞，作為凈化后第二世代雞。繼續(xù)按1.3.4到1.3.7的程序，實(shí)施第二世代的檢測(cè)和凈化。第三世代以后，視凈化的進(jìn)展程度可按此程序繼續(xù)循環(huán)進(jìn)行，但應(yīng)視凈化的進(jìn)展程度逐級(jí)調(diào)整。當(dāng)全群不再檢測(cè)出陽(yáng)性或陽(yáng)性率很低時(shí)，可酌情調(diào)整降低p27抗原ELISA反應(yīng)中判定陽(yáng)性的s/p閾值，即從嚴(yán)淘汰。

1.3.9 凈化程序啟動(dòng)階段的選擇和維持 以上程序代表一個(gè)世代的全部過(guò)程，這是一個(gè)循環(huán)過(guò)程。實(shí)施上述完整的對(duì)核心群雞逐一檢測(cè)和淘汰的程序，工作量很大、成本很高。根據(jù)國(guó)外成功的經(jīng)驗(yàn)，當(dāng)一個(gè)核心群連續(xù)3個(gè)世代都檢測(cè)不出ALV感染雞后，可轉(zhuǎn)入維持期。在進(jìn)入維持期后，就不需再對(duì)每只后備種雞按上述做所有檢測(cè)步驟，可改為對(duì)一定比例雞的定期抽檢。

1.3.10 借鑒SPF雞生產(chǎn)管理經(jīng)驗(yàn) 對(duì)于凈化后的雞群，因其凈化成本較高，因此，在管理時(shí)，應(yīng)充分借鑒無(wú)特定病原雞（SPF）管理規(guī)定隔離封閉飼養(yǎng)。

2 山東省地方品種雞禽白血病病毒凈化結(jié)果

2.1 山東省不同地方品種雞禽白血病病毒凈化結(jié)果

2.1.1 山東地方品種麻雞3號(hào)（B3）凈化的結(jié)果 地方品種麻雞3號(hào)（B3）為國(guó)家審定品系，目前已經(jīng)連續(xù)凈化7代，也是目前ALV凈化最好的品種之一，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)：母雞連續(xù)在4～7世代留種或開(kāi)產(chǎn)前蛋清p27陽(yáng)性率在1%以下，初步達(dá)到國(guó)家有關(guān)種雞場(chǎng)ALV凈化的標(biāo)準(zhǔn)；公雞精液的P27檢測(cè)陽(yáng)性率呈現(xiàn)顯著降低趨勢(shì)，6世代時(shí)下降到 1.92%（仍存在一定的非特異性），由于是精液或泄殖腔棉試子檢測(cè)，尚不能排除其中的非特異性干擾，已多次對(duì)其陽(yáng)性公雞進(jìn)行血漿病原分離，均未分到ALV；1日齡雛雞2～4世代1日齡胎糞p27抗原陽(yáng)性率為1.12%～4.32%，5～7世代胎糞陽(yáng)性率均小于0.5%（圖1）。

表1 地方品種B3禽白血病凈化不同世代ALV p27抗原感染狀況

圖1 地方品種B3不同凈化世代1日齡胎糞ALV p27抗原陽(yáng)性率（%）

2.1.2 山東地方品種麻雞1號(hào)（B1）凈化結(jié)果 地方品種麻雞1號(hào)（B1）也是國(guó)家審定品系，目前凈化已經(jīng)進(jìn)行5年，也是目前ALV凈化最好的地方品種之一，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，母雞已經(jīng)連續(xù)在3～6世代留種或開(kāi)產(chǎn)前蛋清p27陽(yáng)性率在1%以下，初步達(dá)到國(guó)家有關(guān)種雞場(chǎng)ALV凈化的標(biāo)準(zhǔn)；公雞精液的P27檢測(cè)陽(yáng)性率也呈現(xiàn)顯著降低趨勢(shì)，6世代時(shí)下降到5.15%，多次對(duì)陽(yáng)性雞進(jìn)行病原分離，均未分到病毒（存在與上同樣的問(wèn)題）；雛雞胎糞3世代1日齡胎糞p27抗原陽(yáng)性率較高，為6.17%，4～6世代胎糞已降低到0.5%以下，凈化效果明顯（圖2）。

表2 地方品種麻雞1號(hào)（B1）禽白血病凈化不同世代ALV p27抗原感染狀況

圖2 地方品種B1不同凈化世代1日齡胎糞ALV p27抗原陽(yáng)性率（%）

2.1.3 山東地方品種麻雞2號(hào)（B2）凈化結(jié)果 山東地方品種麻雞2號(hào)（B2）也是國(guó)家審定品種，目前已凈化4個(gè)世代（詳見(jiàn)表3）。由表3可知，母雞開(kāi)產(chǎn)前母雞蛋清p27陽(yáng)性率由2世代的1.86%降低至4世代的0.49%；公雞p27陽(yáng)性率由37.88%降至目前精液的2.68%；雛雞4世代時(shí)1日齡胎糞陽(yáng)性率降至0%，凈化效果明顯。

表3 山東地方品種麻雞2號(hào)（B2）禽白血病不同凈化世代p27抗原感染狀況

2.1.4 山東蘆花雞凈化結(jié)果 蘆花雞是地方品種雞中ALV污染較為嚴(yán)重的品種，凈化前公雞肛棉拭子p27抗原陽(yáng)性率為57.95%，母雞蛋清陽(yáng)性率為37.63%。經(jīng)3個(gè)完整世代的凈化，取得了較好的凈化效果，結(jié)果見(jiàn)表4。公雞第三代精液p27抗原陽(yáng)性率已下降至9.16%；母雞蛋清中抗原陽(yáng)性率下降到2.29%；雛雞第4世代1日齡胎糞陽(yáng)性率降至0.58%（第1世代為27.35%），凈化效果顯著（圖3）。

表4 山東地方品種蘆花雞禽白血病凈化不同世代ALV p27抗原感染狀況

圖3 地方品種蘆花雞不同凈化世代1日齡胎糞ALV p27抗原陽(yáng)性率（%）

2.2 山東省地方品種雞禽白血病病毒抗體普查結(jié)果 對(duì)凈化后ALV p27抗原檢測(cè)陰性的雞 （不同世代開(kāi)產(chǎn)雞）采集血清，進(jìn)行了兩次ALV不同亞群抗體的檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 山東省地方品種種雞禽白血病血清學(xué)抗體陽(yáng)性率（%）

由表5可見(jiàn)，雞群ALV抗體陽(yáng)性率的高低與病毒攜帶率不相關(guān)。除少數(shù)品種ALV-J有個(gè)別陽(yáng)性外，大部分地方品種為陰性。值得警惕的是，幾乎所有的地方品種雞都不同程度地感染了ALV A/B亞群病毒，且抗體陽(yáng)性的比率在逐年增高，這一點(diǎn)應(yīng)引起高度關(guān)注并分析其內(nèi)在原因，以便采取相應(yīng)的對(duì)策。

2.3 山東省地方品種雞總體禽白血病病毒凈化結(jié)果 在對(duì)上述4個(gè)品系重點(diǎn)凈化的同時(shí)，我們對(duì)所內(nèi)所保存的其他品系，也進(jìn)行了同步凈化，取得了初步的效果，匯總上面所凈化的結(jié)果，一并總結(jié)，凈化前后的比較結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 山東省地方品種禽白血病凈化前后ALV p27抗原陽(yáng)性率（%）

鑒于部分地方品種的陽(yáng)性率較高，為避免對(duì)其他已凈化品種的傳播，項(xiàng)目組忍痛割愛(ài)，進(jìn)行淘汰。

3 討論

3.1 對(duì)地方品種ALV凈化程序和細(xì)節(jié)的建議 禽ALV凈化主要是對(duì)地方品種種雞群進(jìn)行徹底地凈化。國(guó)際通用的慣例是采取至少5次以上的p27抗原檢測(cè)進(jìn)行篩選。對(duì)核心群雞全部采用血漿接種DF-1細(xì)胞，培養(yǎng)9d后檢測(cè)p27抗原，凡陽(yáng)性者一律淘汰，且分別在68日齡和168日齡做二次采血檢測(cè)，另外，對(duì)保留的核心雞群的下一代進(jìn)行1日齡胎糞檢測(cè)，淘汰同一窩所有陽(yáng)性雞，如此反復(fù)。此法效果已得到有效證實(shí)，但技術(shù)要求較高、人力成本、試劑成本以及實(shí)驗(yàn)室條件都比較高，國(guó)內(nèi)雞場(chǎng)很難推廣應(yīng)用。

社會(huì)存在決定著社會(huì)關(guān)系，但存在多元化的價(jià)值觀念并不意味著其具有合理性，“超女熱”“相親熱”“考證熱”“出國(guó)熱”等現(xiàn)象需要引起重視。經(jīng)濟(jì)成分的多元化，必然會(huì)導(dǎo)致價(jià)值觀念的多元化，所以不能簡(jiǎn)單地再以重集體輕個(gè)人為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)價(jià)青年的道德水平，而是以青年的價(jià)值觀念是否與社會(huì)倡導(dǎo)的價(jià)值觀念一致以及青年所持有的價(jià)值觀念是否有利于社會(huì)發(fā)展為衡量標(biāo)準(zhǔn)。

崔治中教授自2005年就致力于國(guó)內(nèi)雞群ALV的凈化，在總結(jié)大量實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合國(guó)內(nèi)外ALV凈化的經(jīng)驗(yàn)，提出了我國(guó)雞群ALV凈化不同階段所應(yīng)采取的措施，取得了切實(shí)可行的實(shí)踐效果。我所自2008年就在崔老師的指導(dǎo)下進(jìn)行地方品種雞的凈化，積累了一系列成熟的經(jīng)驗(yàn)，獲得了一定的成功。在地方品種種禽群凈化前，母雞ALV抗原陽(yáng)性率最高達(dá)60.33%，公雞陽(yáng)性率高達(dá)71.23%。部分品種如瑯琊雞因?yàn)锳LV感染率過(guò)高，而挑不出陰性雞群，不得不淘汰。剩余的雞群均取得了可喜的結(jié)果。經(jīng)過(guò)4年的持續(xù)凈化，10個(gè)地方品種種雞群的陽(yáng)性率大大降低，其中4個(gè)品種的1日齡胎糞p27抗原陽(yáng)性率降至0.5%以下，母雞蛋清陽(yáng)性率低于1%，已初步達(dá)到國(guó)家對(duì)種禽場(chǎng)禽白血病的凈化要求。實(shí)踐證明：崔老師建議的方案是可行的，且與國(guó)外相比，無(wú)論是財(cái)力還是人力，都適合中國(guó)國(guó)情。

除此之外，在ALV凈化時(shí)，還要關(guān)注以下幾個(gè)環(huán)節(jié)：①在世代凈化前，對(duì)留種前對(duì)母雞和公雞進(jìn)行檢疫，每只留種公雞精液對(duì)應(yīng)固定的母雞；②同一孵化室只用于一個(gè)地方品種來(lái)源種蛋的孵化，以預(yù)防在孵化室內(nèi)早期的橫向傳播；③在孵化后期及1日齡雛雞采用小型紙袋進(jìn)行相對(duì)隔離，盡快進(jìn)行胎糞檢測(cè)淘汰陽(yáng)性雞，最大限度地縮短檢測(cè)的時(shí)間，提高效率。雛雞籠用擋板隔離，避免橫向傳播。

在凈化的過(guò)程中，也出現(xiàn)了ALV感染p27抗原陽(yáng)性率的反彈，大都發(fā)生在開(kāi)始凈化后的第3～4代，幾乎成為定律。對(duì)其中的原因，我們?nèi)栽谔剿髦小?/p>

3.2 引進(jìn)種雞前必須做最嚴(yán)格的ALV檢疫 通過(guò)對(duì)我所地方品種雞ALV凈化前的臨床檢測(cè)，結(jié)合大量的臨床樣品ALV普查，證實(shí)目前我國(guó)的地方品種雞大都污染有ALV，且主要是A/B亞群。事實(shí)上，早在1982年前，山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所試圖從我國(guó)地方品種中建立起凈化的無(wú)特定病原雞群，經(jīng)過(guò)大約3年的努力，終因ALV感染率過(guò)高，且我國(guó)雞群內(nèi)源性白血病E亞群幾乎100%感染，導(dǎo)致凈化無(wú)果而終。最后，還是采取了從美國(guó)、德國(guó)和英國(guó)等引種的路子，縮短了我國(guó)SPF雞培育成功的時(shí)間。當(dāng)然，引種是獲得家禽新品種的一條捷徑。即便是國(guó)際上最優(yōu)秀的大型育種公司，有時(shí)也要從其它來(lái)源引進(jìn)特定的種雞。但當(dāng)需要從其他來(lái)源引進(jìn)種雞時(shí)，在引進(jìn)雞場(chǎng)前必須對(duì)其ALV做嚴(yán)格的檢疫和檢測(cè)，而且這種檢疫絕不能僅是一次性的[8]。如前所述，雞在感染ALV后的病毒血癥或排毒是間隙性的，而且沒(méi)有那一種方法能一次把雞群中的感染和帶毒雞都能檢測(cè)出來(lái)。所以，至少要檢測(cè)到性成熟開(kāi)始產(chǎn)蛋時(shí)。

實(shí)際上，1988年在英國(guó)發(fā)現(xiàn)ALV-J亞群以后的幾年內(nèi)，該病之所以能在短短幾年內(nèi)蔓延至全球各國(guó)幾乎所有大型白羽肉雞的育種公司的原種核心雞群中，很顯然，這些都與上述公司相互引種直接相關(guān)。一旦ALV-J亞群在一個(gè)雞群中流行，便很快傳播至其他公司的白羽肉雞群。因?yàn)锳LV-J主要通過(guò)種蛋垂直傳播，而且潛伏期可長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月，普通1～2個(gè)月的隔離檢查于事無(wú)補(bǔ)。1995年前后，為了培育我國(guó)自己的快大型黃羽肉雞，縮短育種時(shí)間，部分公司在不了解禽ALV-J的危害性和傳播途徑的情況下，引進(jìn)了國(guó)外白羽肉雞作為種雞資源，使之與不同的地方品種雞雜交，從而在保留羽毛的黃色或雜色的同時(shí)，還能從白羽肉雞的遺傳性中獲得長(zhǎng)得大、生長(zhǎng)快、料肉比低的優(yōu)良特性。然而，正是這一過(guò)程，在不經(jīng)意間把ALV-J帶進(jìn)了我們自己的核心雞群，并在繁育擴(kuò)大雞群的過(guò)程中，使該病蔓延開(kāi)來(lái)[9-10]，而且?guī)?lái)的經(jīng)濟(jì)損失越來(lái)越大，有時(shí)還在養(yǎng)殖企業(yè)間造成很大的經(jīng)濟(jì)糾紛。正因?yàn)槿绱?，引進(jìn)外來(lái)種雞群時(shí)，必須做好對(duì)雞群ALV的長(zhǎng)期、系統(tǒng)的跟蹤和監(jiān)測(cè)。

3.3 需要特別關(guān)注的疫苗問(wèn)題 對(duì)選留雞選用的所有活疫苗，必須經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)，確保絕對(duì)沒(méi)有外源性ALV污染，這一點(diǎn)十分關(guān)鍵。除此之外，對(duì)滅活苗目前尚存爭(zhēng)議。大多數(shù)滅活苗由于是“死”苗，很多人認(rèn)為是比較安全。但是，我們知道，盡管滅活苗是經(jīng)過(guò)“滅活”的抗原，但滅活不可能完全100%殺滅病毒，從生物學(xué)的角度上講，只能是無(wú)限接近，少數(shù)的“漏網(wǎng)之魚(yú)”是可能的。人們關(guān)注的僅是“本病毒”是否滅活完全，而忽視了雞的垂直傳播性病原，其中就包括禽白血病病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒等。在實(shí)際的生產(chǎn)中，我們往往對(duì)每批弱毒活疫苗批批檢測(cè)，而不注重滅活苗的質(zhì)量檢測(cè)。目前需要免疫的滅活苗包括：新城疫病毒、高致病性禽流感的不同亞型病毒（RE-4/RE-5/RE-6/RE-7/RE-8）、低致病性禽流感病毒、減蛋綜合征病毒、傳染性支氣管炎的不同亞型病毒、病毒性關(guān)節(jié)炎病毒、禽腦脊髓炎病毒等的單苗、聯(lián)苗不下十余種，其接種次數(shù)在20次左右。頻繁的接種很難保證萬(wàn)無(wú)一失。事實(shí)上，在對(duì)雞群的禽ALV抗體檢測(cè)過(guò)程中，我們發(fā)現(xiàn)，雞群的日齡愈長(zhǎng)，其ALV的A/B亞群抗體陽(yáng)性率愈高（見(jiàn)表6），而病毒分離又為陰性。鑒于ALV病毒與血清抗體復(fù)雜的關(guān)系：病毒陽(yáng)性，抗體可能陰性；病毒陰性，抗體可能陽(yáng)性；病毒與抗體均為陽(yáng)性等，上述可能性均存在。這無(wú)疑對(duì)雞群的ALV凈化增加了難度。也是我們必須的思考所在。因此，進(jìn)行ALV種源凈化的雞群，其接種的滅活苗制備原料雞胚最好也要SPF化。

其次，由于ALV感染對(duì)年齡和感染途徑有很強(qiáng)的依賴性，年齡越小越易感，注射感染比其他途徑易感，所以應(yīng)高度關(guān)注雛雞階段使用的疫苗。一要特別關(guān)注的是液氮保存的細(xì)胞結(jié)合性馬立克氏病疫苗。該疫苗是在出殼后在孵化廳立即注射，而且如果發(fā)生污染，也容易污染較大的有效感染量（包括細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外）；其次是通過(guò)皮膚劃刺接種的禽痘疫苗。當(dāng)然，其他弱毒疫苗也要關(guān)注。但前面提到的二種疫苗，外源性ALV污染帶來(lái)的危害最大。

需要強(qiáng)調(diào)的是：對(duì)于雞群白血病凈化來(lái)講，其所應(yīng)用的所有疫苗絕不能有ALV的污染。否則，一旦使用了被外源性和內(nèi)源性ALV污染的疫苗，將使種雞群重新感染ALV，凈化取得的所有成果將化為泡影，務(wù)必慎之又慎。

3.4 禽白血病凈化需要長(zhǎng)期、持續(xù)的堅(jiān)持和努力 禽白血病的凈化是一個(gè)系統(tǒng)工程，需要政府、公司和科研部門等多部門聯(lián)動(dòng)。政府應(yīng)在政策方面（項(xiàng)目和資金等）予以持續(xù)支持，企業(yè)應(yīng)成為ALV凈化的主體，科研部門要做好保駕護(hù)航。行百里者半九十，禽白血病凈化任重而道遠(yuǎn)。

[1]Y.M.Saif主編，蘇敬良，高福，索勛，主譯.禽病學(xué)[M].第12版.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2012.

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S858.31

B

1673-1085（2016）12-0003-09

2016-11-12

國(guó)家公益性 （農(nóng)業(yè)） 行業(yè)科研專項(xiàng)（201203055）。