謝長峰杜杰曾桂芳徐紹坤梁曉李嬋左叢林劉沐蕓胡祥

·論著·

人臍帶間充質干細胞對裸鼠的促瘤和致瘤性研究

謝長峰1杜杰2曾桂芳1徐紹坤1梁曉1李嬋1左叢林2劉沐蕓1胡祥1

目的 研究人臍帶間充質干細胞（hUCMSCs）對動物是否具有促瘤性，以及不同代次是否有致瘤性，為其臨床應用提供安全性依據。方法 分別用人淋巴瘤細胞Raji接種于CB-17 SCID小鼠皮下、用人結腸癌細胞WiDr接種于BALB/c裸鼠皮下，建立皮下移植瘤模型，WiDr成模動物用完全隨機法分為4組（n = 8）：模型對照組、hUCMSCs低、中、高劑量組；Raji成模動物用完全隨機法分為5組（n = 7）：空白對照組、模型對照組、hUCMSCs低、中、高劑量組。hUCMSCs均靜脈注射給藥，觀察hUCMSCs對皮下移植瘤的增殖是否有影響。另外，觀察不同代次的hUCMSCs是否有致瘤性，NOD/SCID小鼠分別皮下接種hUCMSCs的第2、6、10代的細胞，注射后3周，16周對動物剖檢，觀察hUCMSCs皮下結節(jié)的形成及是否有腫瘤轉化的傾向。對照組和hUCMSCs組的瘤體積及瘤重采用成組t檢驗進行統(tǒng)計分析，并計算hUCMSCs組相比對照組的相對腫瘤抑制率T/C％。結果 WiDr腫瘤模型中，第43天hUCMSCs中、高劑量組的瘤體積均顯著低于模型對照組，分別為（586.7±274.4）mm3、（689.5±114.8）mm3vs（945.9±234.0）mm3，P ＜ 0.05，但T/C％值＞ 40％；第51天hUCMSCs低、中高劑量組瘤體積均顯著低于模型對照組，分別為（777.8±346.7）mm3、（793.1±358.6）mm3、（800.7±116.5）mm3vs（1300.0±356.8）mm3，P均＜0.05，但T/C％值均＞ 40％；表明hUCMSCs在3個劑量下均未對WiDr腫瘤的生長有影響，無顯著促進或抑制作用。Raji腫瘤模型中，hUCMSCs治療組瘤體積與對照組相比在所有時間點差異均無統(tǒng)計學意義（P ＞ 0.05），顯示hUCMSCs在本實驗條件下對腫瘤生長沒有明顯的抑制和促進作用。兩個模型的病理檢測均未見對腫瘤增殖有明顯影響。3個不同代次的hUCMSCs注射到NOD/SCID后16周對動物剖檢，也沒有觀察到腫瘤轉化的傾向。結論 hUCMSCs對裸鼠WiDr和Raji移植瘤模型的腫瘤增殖無促進作用，不同代次的hUCMSCs在NOD/SCID裸鼠體內移植也不具有致瘤性。

臍帶； 間質干細胞； 致瘤性； 促瘤性

間充質干細胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一類具有多向分化潛能的間葉組織來源干細胞，可從胎兒血液、肝臟、骨髓、脂肪等多種組織獲得，是一群多潛能細胞，可以向多種組織如骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質細胞增殖分化[1]。人臍帶間充質干細胞（human umbilical cordderived mesenchymal stem cells，hUCMSCs）作為理想的MSCs來源越來越受到人們的重視，關于hUCMSCs的研究報導也越來越多。hUCMSCs具有特殊的免疫學表型，不表達HLA-Ⅱ類分子和共同刺激分子，不會引起同種異體淋巴細胞增殖反應[2]。移植入宿主體內的MSCs可避免宿主的免疫排斥反應，通過細胞間的相互作用及旁分泌作用等機制抑制過度活躍的T細胞的增殖及其過度免疫反應[3]，從而發(fā)揮免疫重建的功能，進而有可能在自身免疫疾病方面取得較好的療效[2]。以上特點為hUCMSCs在臨床上應用于自身免疫性疾病提供了理論依據，但會不會因為其免疫抑制特性而誘發(fā)業(yè)內最為關注的干細胞致瘤性問題，已有研究認為骨髓來源的MSCs在體內外均有促進腫瘤生長的作用[4-5]。那么臍帶來源的MSCs是否也有同樣的作用，之前已經通過軟瓊脂克隆實驗及共培養(yǎng)對腫瘤細胞增殖的影響實驗，揭示了hUCMSCs體外不具有致瘤性[6]，本文旨在進一步通過動物實驗研究hUCMSCs是否在動物體內具有致瘤性及促瘤性，為其臨床使用提供安全性數據。

材料和方法

一、材料

hUCMSCs（深圳市北科生物科技有限公司生產）；人胚肺成纖維細胞（MRC-5）、人宮頸癌細胞（Hela）、人結腸癌細胞WiDr、人淋巴瘤細胞Raji均購于中國醫(yī)學科學院基礎研究所細胞中心；SPF級雌性BALB/C裸小鼠，動物周齡約4 ～ 5周，購自北京華阜康生物科技有限公司，動物質量合格證編號：0157988；雌性CB-17 SCID小鼠，動物周齡約4 ～ 5周，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，動物質量合格證編號：0196881、0199950；SPF級NOD/ SCID小鼠，動物周齡為4 ～ 5周，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，實驗動物質量合格證編號：0157641；動物飼養(yǎng)于屏障環(huán)境中的IVC籠內。本實驗中所有動物的使用均經過實驗動物倫理委員會的批準，批準號為ACU-09-227。

二、方法

1.促瘤實驗：體內促瘤試驗采用實體瘤WiDr和血液系統(tǒng)腫瘤Raji各1株，將對數生長期人結腸癌細胞WiDr細胞或人淋巴瘤細胞Raji濃度調整為5×107個/ml，以BALB/c裸鼠皮下注射WiDr細胞0.2 ml及CB-17 SCID小鼠皮下注射Raji細胞0.2 ml造F0代荷瘤小鼠，待腫瘤生長至400 mm3，選擇腫瘤生長及健康狀況良好的荷瘤動物，無菌條件下取瘤，制備成3 mm3左右組織塊，分別接種于動物右側腋窩皮下制備BALB/c裸鼠人結腸癌細胞WiDr腫瘤模型和CB-17 SCID小鼠人淋巴瘤細胞Raji腫瘤模型。成模動物隨機分為4組：模型對照組、hUCMSCs低、中、高劑量組，每組7 ～ 8只動物，Raji模型另設空白對照組。實驗組尾靜脈注射給藥，隔14天1次，共2次分別給予P2代hUCMSCs 2×105個細胞/只、6×105個細胞/只、2×106個細胞/只，給藥體積為0.5 ml，對照組給予相應體積的溶媒。每天進行一般臨床觀察，每周1次詳細臨床觀察，每周2次稱量體質量并測量腫瘤長短徑，計算腫瘤體積、相對腫瘤體積（RTV）和相對腫瘤增殖率T/C％，如果140％＞T/C％＞ 40％，為無影響；如果T/C％≤40％或≥140％，且經統(tǒng)計學處理P ＜0.05為有影響[7]。兩個模型試驗的動物安樂死后均剝離腫瘤結節(jié)、稱重，計算腫瘤抑制率，抑制率≥60％且經統(tǒng)計學處理P ＜ 0.05時為對腫瘤增殖有抑制作用，抑制率＜ -40％且經統(tǒng)計學處理P ＜ 0.05時為對腫瘤增殖有促進作用[8]；同時進行大體解剖觀察，取材心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及腫瘤結節(jié)用10％中性福爾馬林作常規(guī)固定，石蠟包埋、切片、HE染色、顯微鏡下觀察。

2.致瘤性實驗：為驗證多次傳代后hUCMSCs是否具有致瘤性，采用兩條臍帶不同代次（分別為P2、P6、P10）的細胞進行實驗，以Hela細胞為陽性對照，以MRC-5細胞作為陰性對照，每組分別按照1×107個細胞/只的劑量腋窩皮下注射于10只NOD/SCID小鼠，雌雄各半，連續(xù)觀察16周，主要觀察指標為小鼠皮下是否出現結節(jié)以及出現結節(jié)的病理類型，以判斷hUCMSCs是否存在體內致瘤的傾向。判斷標準為在陰性和陽性對照成立的前提下，待檢細胞皮下接種NOD/SCID小鼠后無腫物生長或雖有隆突狀腫物生長但卻是非腫瘤的，證明該細胞無致瘤性，判為陰性（－）；若有隆突狀腫物生長，經病理形態(tài)學觀察、腫瘤鑒定證實確為腫瘤的，則判為陽性（＋）。

三、統(tǒng)計學分析方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，不同組別動物的瘤體積或瘤重數據以± s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P ＜ 0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

結 果

一、促瘤性實驗結果

（一）一般臨床觀察

WiDr腫瘤模型實驗過程中，模型對照組、中劑量組和高劑量組均有動物出現活動減少、消瘦和死亡，推測與腫瘤負荷有關，非干細胞作用。Raji腫瘤模型對照組和低劑量組有動物出現消瘦、精神不振和死亡，各組均有動物出現腫瘤破潰現象，空白對照組動物皮下無結節(jié)形成。腫瘤的破潰考慮是由于淋巴瘤細胞自身的異質性程度較高和易轉移性所致，非干細胞作用。

兩個模型中，各劑量組在整個試驗過程中的平均體質量和對照組相比差異均無統(tǒng)計學意義。在整個試驗過程中，各劑量組的平均體質量與對照組相比均差異均無統(tǒng)計學意義。

（二）對移植瘤生長情況的影響

WiDr腫瘤模型中，首次給藥后每周2次測量腫瘤長徑和短徑，計算腫瘤體積Vt。結果可見：給藥后第43天中、高劑量組和給藥后第51天的低、中、高劑量組的Vt值均顯著低于模型對照組（P ＜0.05），但T/C％值均＞ 40％；其他時間點各劑量組T/C％值均＞ 40％，Vt值與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義（表1）。根據判斷標準[7]，判定供試品在3個劑量下均未對WiDr腫瘤的生長有影響，無顯著促進或抑制作用。

表1 hUCMSCs對小鼠WiDr模型腫瘤體積的影響（mm3，± s）

表1 hUCMSCs對小鼠WiDr模型腫瘤體積的影響（mm3，± s）

注：hUCMSCs為人臍帶間充質干細胞，與模型對照組比較，aP ＜ 0.05

組別例數第1天第13天第28天第43天第51天模型對照組832.3±11.6286.5± 72.5544.8±160.3945.9±234.01300.0±356.8低劑量組831.9± 9.0208.3±105.9461.8±243.5680.8±304.5 777.8±346.7a中劑量組832.7±10.2164.2± 70.9362.9±159.8 586.7±274.4a793.1±358.6a高劑量組832.9±20.7190.3±117.7435.4±117.0 689.5±114.8a800.7±116.5aF值0.0082.5101.4533.2165.336 P值0.9990.0790.2490.0380.005

Raji模型腫瘤中，給藥后每周2次測量腫瘤長徑和短徑，計算腫瘤體積Vt。結果可見：高、中、低劑量組Vt值與對照組相比在所有時間點差異均無統(tǒng)計學意義（P ＞ 0.05，表2），顯示供試品在本實驗條件下對腫瘤生長沒有明顯的抑制和促進作用。

（三）對腫瘤重量的影響

WiDr腫瘤模型中，高劑量組的平均瘤重低于模型對照組[（1.21±0.27）g vs（1.73±0.44）g，P ＜ 0.05]，低、中劑量沒有明顯差異[分別為（1.73± 0.44）g和 （1.37±0.68）g]。低、中、高劑量組對腫瘤生長的抑制率分別為21％、31％和30％，但均未達到40％，提示供試品三個劑量對腫瘤重量均無明顯影響。

Raji腫瘤模型中，模型組和低、中、高劑量組平均瘤重分別為（1.4±0.3）g、（1.8±0.6）g、（1.9±0.5）g和（1.6±0.7）g。供試品各劑量組與模型對照組差異無統(tǒng)計學意義，提示供試品3個劑量對腫瘤重量均無顯著影響。

（四）病理檢測

WiDr腫瘤模型病理切片可見：各組樣本的腫瘤結節(jié)在中央或一側出現單發(fā)或多發(fā)的灶狀大面積壞死，有的形成空腔，周圍腫瘤組織排列成不規(guī)則腺體狀，細胞呈有核分裂相，見圖1。各組樣本腫瘤結節(jié)均為皮下接種人結腸癌細胞WiDr所致。由此推論hUCMSCs對裸鼠實體腫瘤的生長無促進作用。

Raji腫瘤模型組及給藥低、中、高劑量組動物，均可見右側前肢的腋窩處有腫瘤結節(jié)，生長良好，未見破潰等明顯異常。腫瘤結節(jié)鏡檢結果顯示，腫瘤細胞聚集成較大團塊，細胞大小不一，形態(tài)不整，團塊中央大片不規(guī)則壞死并伴有出血，多見病理性核分裂相見圖2。剖檢各臟器內均未見腫瘤細胞轉移。由此推論hUCMSCs對裸鼠血液系統(tǒng)腫瘤的生長無促進作用。

二、致瘤性實驗結果

陰性對照組（MRC-5）在細胞接種后，本組10只動物的接種部位均未出現結節(jié)。部分動物（6/10）于第4周實施安樂死，剩余動物繼續(xù)觀察至16周實施安樂死。安樂死動物的接種部位及周圍均未見結節(jié)生長（表3），大體解剖觀察亦未見各臟器或組織有異常現象。

表2 hUCMSCs對小鼠Raji模型腫瘤體積的影響（mm3，± s）

表2 hUCMSCs對小鼠Raji模型腫瘤體積的影響（mm3，± s）

注：hUCMSCs為人臍帶間充質干細胞

組別例數第1天第7天第13天第28天第31天模型對照組7117.0±64.9284.9±160.5543.1±294.52013.2±617.72493.9±1013.1低劑量組7132.6±83.7315.3±189.6595.6±242.02088.2±748.42957.4±1032.2中劑量組7121.7±68.2313.4±147.6546.5±190.92199.3±501.62864.5± 643.8高劑量組7117.0±65.0252.2±181.0506.9±305.12107.3±967.92474.5± 139.0 F值0.0750.2120.1350.0770.690 P值0.9730.8880.9380.9720.567

圖1 光學顯微鏡下觀察WiDr模型各組腫瘤結節(jié) （HE染色×100）

表3 不同代次的hUCMSCs動物體內的致瘤情況

圖2 光學顯微鏡下觀察Raji模型各組腫瘤結節(jié) （HE染色×100）

陽性對照組（Hela細胞）在接種后的第8天，有2只動物出現結節(jié)，體積約為23.1 mm3和11.7 mm3。隨后，動物陸續(xù)出現結節(jié)，結節(jié)均表現為進行性生長。至觀察期第8周時結節(jié)的平均長徑達1.4 cm，短徑達1.1 cm，全部動物實施安樂死，大體解剖觀察見9/10只動物有結節(jié)形成（表3），病理組織學切片檢查結果發(fā)現,結節(jié)中間大面積壞死灶，周圍腫瘤細胞成簇分布，并可見核分裂相，細胞增殖活躍（圖3）。

圖3 光學顯微鏡下觀察 hUCMSCs致瘤性實驗各組接種部位 （HE染色×100）

hUCMSCs P2組細胞接種后有動物出現較明顯結節(jié)，結節(jié)均表現為退行性生長狀態(tài)，至接種后第17天結節(jié)全部消失，持續(xù)時間為7 ～ 9 d，之后觀察至16周終止實驗，均無結節(jié)再次出現。hUCMSCs P6組接種細胞第5天，有動物出現較明顯結節(jié)，結節(jié)均表現為退行性生長狀態(tài)，至接種后第14天結節(jié)全部消失，持續(xù)時間為6 ～ 9 d，之后觀察至16周終止實驗，均無結節(jié)再次出現。hUCMSCs P10組接種細胞第5天，本組有動物出現較明顯結節(jié)，結節(jié)均表現為退行性生長狀態(tài)，繼續(xù)觀察，至接種后第11天結節(jié)全部消失，持續(xù)時間為5 ～ 6 d，之后觀察至16周終止實驗，均無結節(jié)再次出現。以上3組安樂死后動物大體解剖及組織病理學檢測見注射部位皮膚及皮下組織未見明顯異常（圖3，表3）。

討 論

hUCMSCs具有免疫抑制和免疫豁免特性，這與其免疫調節(jié)因子（血管內皮生長因子和白介素-6）、協(xié)同刺激表面抗原（CD40、CD80和CD86）和HLA-G6的表達有關[9]。hUCMSCs本身免疫原性低，表達中等水平的MHC-I類分子，不表達MHC-II類分子，可以通過分泌可溶性細胞因子誘導T細胞活化受阻，從而改變T細胞和DC表型，并在體外抑制CD4+和CD8+T細胞增殖[9]。孫凌云等[10-16]即利用此特性進行了hUCMSCs治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的臨床研究，結果發(fā)現hUCMSCs治療安全、耐受性良好，臨床療效顯著而持久。

采用華通氏膠組織塊貼壁法培養(yǎng)得到hUCMSCs，其形態(tài)、表面標志物及誘導分化能力符合ISCT關于MSCs的標準[17]；軟瓊脂克隆實驗證實體外培養(yǎng)時hUCMSCs無致瘤性；與人白血病細胞K562和人結腸癌Colo-205細胞體外共培養(yǎng)實驗證實在體外hUCMSCs對腫瘤細胞的增殖沒有影響[6]。

BABL/c裸小鼠先天胸腺發(fā)育不良，不能產生胸腺依賴型T細胞，NOD/SCID和CB-17 SCID裸小鼠均存在聯(lián)合免疫缺陷并有T細胞和B細胞缺乏[18]，因此比較適合用于致瘤性評價。本次采用裸小鼠進行體內致瘤性和促瘤性實驗，以全面考察hUCMSCs的致瘤性。

在體內促瘤性實驗中，WiDr模型對照組在第51天時腫瘤結節(jié)直徑超過20 mm，Raji模型在第31天時所有模型動物均出現腫瘤破潰現象，根據人道終點的原則分別定為兩個腫瘤模型的終止點。WiDr模型中，給藥后第43天中、高劑量組和給藥后第51天低、中、高劑量組的Vt值均顯著低于模型對照組（P ＜ 0.05），但T/C％均大于40％，以腫瘤體積計算的腫瘤相對抑制率均未達到40％的標準[7]，認為供試品不抑制腫瘤生長。腫瘤重量數據顯示，供試品低、中、高劑量組平均瘤重均低于模型對照組且高劑量組差異有統(tǒng)計學意義（P ＜ 0.05，抑制率依次為21％、31％和30％），但抑制率均小于40％，未達到抑制腫瘤生長的標準[8]，雖然如此，這些異常結果仍然提示hUCMSCs與腫瘤生長的關系非常復雜，需要進一步的深入研究。病理檢測提示，陽性對照組及3個實驗組腫瘤結節(jié)形態(tài)在鏡下觀察無明顯差異，結節(jié)內部存在壞死灶，細胞形態(tài)多樣，雜亂無章，多處核分裂像，符合增生活躍的結腸癌腫瘤形態(tài)。Raji模型，3個劑量組Vt值與對照組相比在所有時間點差異無統(tǒng)計學意義（P ＞ 0.05）。腫瘤重量數據顯示，低、中、高劑量組平均瘤重均高于模型對照組，依次為134％、138％、118％，但差異無統(tǒng)計學意義（P ＞ 0.05），因此hUCMSCs靜脈注射對Raji模型淋巴細胞瘤的增殖沒有明顯影響，與文獻報道一致[19]。Raji模型實驗終止時，所有動物皮下結節(jié)均有破潰現象，病理檢查為惡性生長的淋巴細胞相，局部有壞死灶，符合增生活躍的淋巴瘤形態(tài)。經過實體瘤WiDr模型和血液系統(tǒng)腫瘤Raji模型的皮下成瘤實驗，從腫瘤的體積、重量、病理形態(tài)三個方面綜合分析，認為hUCMSCs對兩種來源的腫瘤增殖沒有抑制或促進作用。該結果與之前體外研究結果一致[6]。

為較全面研究hUCMSCs體外多次傳代后其致瘤性會否發(fā)生改變，選用了兩個不同來源的臍帶的P2、P6和P10代次細胞進行了裸鼠體內致瘤性實驗。hUCMSCs3個代次細胞接種于BABL/c裸小鼠皮下，各組均有部分動物接種部位出現結節(jié)，經過病理切片檢查證實為非腫瘤性纖維組織增生。分析其原因可能是：hUCMSCs接種于小鼠皮下后，因人類細胞體積較大且一次性局部接種細胞量多而不能被動物機體完全吸收或清除，對注射部位及其周圍組織產生刺激，引起局部炎性細胞浸潤，伴隨結締組織增生，形成體表可見的結節(jié)，但因為hUCMSCs本身不具有致瘤性，在動物體內非無限制增殖，早期炎癥反應隨時間逐步減退，結節(jié)隨之縮小，呈退行性生長表現。因此，在本實驗中接種hUCMSCs的動物在接種的幾天后出現明顯結節(jié)，隨著機體的組織修復，炎癥反應減退，壞死的組織細胞被巨噬細胞清除，結節(jié)逐漸減少至消失。本實驗中6個hUCMSCs實驗組動物在注射后結節(jié)形成和消失的趨勢一致，表明因為炎癥反應產生皮下局部結節(jié)的推測是可信的；并且其生長模式和陽性對照組Hela細胞皮下接種后形成的結節(jié)呈進行性增長模式不同，在實驗終止時，6個實驗組全部動物注射部位局部已經完全沒有結節(jié)的痕跡，而陽性對照組，存在肉眼可見的皮下結節(jié)，且對結節(jié)進行病理切片觀察，可以看到符合腫瘤細胞活躍增殖的核分裂像，這些實驗結果都提示，無論hUCMSCs體外傳代擴增至第2代、第6代還是第10代，移植至動物體內均不具有致瘤性，與許鍵煒等[20]第4代hUCMSCs體內致瘤性研究結果一致。

然而，鑒于MSCs與腫瘤細胞之間復雜的相互作用，尚需要更多、更深入的研究才能更全面地揭示hUCMSCs臨床應用的致瘤和促瘤風險。

hUCMSCs對裸鼠WiDr和Raji移植瘤模型的腫瘤增殖無促進作用，同時不同代次的hUCMSCs在NOD/SCID裸鼠體內移植也不具有致瘤性。

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Experimental investigation on tumorigenicity of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in nude mice

Xie Changfeng1, Du Jie2, Zeng Guifang1, Xu Shaokun1, Liang Xiao1, Li Chan1, Zuo Conglin2, Liu Muyun1, Hu Xiang1.1Shenzhen Beike Bio-Technology Company Limited, Shenzhen 518062, China;2Joinn Laboratories Company Limited, Beijing 100176, China

Liu Muyun, Email:muyun@beike.cc

Objective To study whether human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells (hUCMSCs) has tumor enhancement effect and tumoroginicity in nude mice, and to provide safety evidence for clinical use. Method hUCMSCs were intravenously injected into colo-205 bearing BALB/c nude mice and Raji bearing CB-17 SCID mice to evaluate its effects on tumor growth. WiDr animals were randomized into 4 groups (n = 8 for each group)∶ model group, hUCMSCs low, median and high dose groups. Raji animals were randomized into 5 groups (n = 7 for each group)∶ control group, model group, hUCMSCs low, median and high dose groups. P2, P6and P10 hUCMSCs were subcutaneously injected into NOD/SCID mice and animals were sacrificed at 3rd and 12th week respectivelyto observe the formation of tumors to evaluate tumorigenicity of hUCMSCs. t-test was used to compare tumor volumes and tumor weights. The relative tumor inhabitation rate, T/C％, was also calculated. Results The tumor volumes of median and high dose groups were smaller than the control group in WiDr tests at day 43（586.7±274.4）mm3,（689.5±114.8）mm3vs（945.9±234.0）mm3，P ＜ 0.05, but their T/C％ was greater than 40％; the tumor volumes of low-, median- and high-dose groups were smaller than the control group at day 51（777.8±346.7）mm3,（793.1±358.6）mm3,（800.7±116.5）mm3vs（1300.0± 356.8）mm3, P ＜ 0.05, but their T/C％ were greater than 40％; the study indicated that 3 doses of hUCMSCs have no effect on growth of WiDr tumor. The tumor volumes in all doses of hUCMSCs has no significant difference in all the time points compared to the control group in Raji tests (P ＞0.05), indicated that hUCMSCs did not affect tumor growth. Pathological examination showed the same results. No tumor transformation tendency was observed in gross and pathological examination in NOD/SCID mice when hUCMSCs groups of three different passages and MRC-5 negative control group were intravenously injected into NOD/SCID mice. Conclusion The study indicated that the hUCMSCs do not affect growth of WiDr or Raji tumor in nude mice, and hUCMSCs of different passages don't have tumorigenicity in NOD/SCID mice.

Umbilical cord; Mesenchymal stem cell; Tumorigenicity; Tumor enhancement

2016-06-11）

（本文編輯：李少婷）

10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2016.06.006

深圳市科技計劃項目（JSGG20130917151830203）

518062 深圳，北科生物科技有限公司1；100176 北京，昭衍新藥研究中心股份有限公司2

劉沐蕓，Email：muyun@beike.cc

前兩位作者對本文具有相同貢獻，同為第一作者

謝長峰，杜杰，曾桂芳,等.人臍帶間充質干細胞對裸鼠的促瘤和致瘤性研究[J/CD].中華細胞與干細胞雜志∶電子版, 2016, 6(6)∶356-362.