胡春良，蔣偉權(quán)

（浙江省東陽(yáng)市食品安全檢驗(yàn)檢測(cè)中心，金華 322100）

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淺議農(nóng)殘速測(cè)儀使用中注意事項(xiàng)
—以GDYN-106SD為例

胡春良，蔣偉權(quán)

（浙江省東陽(yáng)市食品安全檢驗(yàn)檢測(cè)中心，金華 322100）

摘 要：農(nóng)殘速測(cè)儀目前在基層農(nóng)技站、無(wú)公害種植基地、農(nóng)貿(mào)城等普遍配置。操作人員僅經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單培訓(xùn)后上崗，在檢測(cè)過(guò)程中常會(huì)發(fā)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果異常等問(wèn)題。以GDYN-106SD為例淺議農(nóng)殘速測(cè)儀在使用中的注意事項(xiàng)，幫助操作員加深對(duì)儀器的理解，以獲得可靠結(jié)果。

關(guān)鍵詞：GDYN-106SD 農(nóng)殘檢測(cè) 速測(cè)儀 注意事項(xiàng)

中國(guó)是農(nóng)藥生產(chǎn)和使用的大國(guó)，農(nóng)藥用量居世界首位，農(nóng)藥生產(chǎn)量居世界第2位［1］。不合理的使用農(nóng)藥，導(dǎo)致農(nóng)藥殘留問(wèn)題突出，對(duì)人體的健康產(chǎn)生巨大的影響［2］。我國(guó)對(duì)農(nóng)藥殘留的監(jiān)管要求也越來(lái)越嚴(yán)格，在新版的《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了食品中等387種農(nóng)藥3 650項(xiàng)最大殘留限量，并在標(biāo)準(zhǔn)中注明了檢測(cè)方法。目前常用的農(nóng)殘快速檢測(cè)法有：酶抑制率法，速測(cè)卡法，免疫分析法，生物傳感器法等［3］。

GDYN-106SD是長(zhǎng)春吉大小天鵝儀器有限公司開(kāi)發(fā)的一款6通道分光光度計(jì)型農(nóng)殘速測(cè)儀。該儀器由東陽(yáng)市政府于2011年統(tǒng)一配備給下轄鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)技站，用于鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)殘開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室文章就對(duì)鎮(zhèn)鄉(xiāng)檢測(cè)員進(jìn)行儀器培訓(xùn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行簡(jiǎn)單梳理。

1 GDYN-106SD型農(nóng)殘速測(cè)儀使用方法

1.1 檢測(cè)原理

依據(jù)有機(jī)磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制膽堿酯酶正常功能，其抑制率與農(nóng)藥濃度正相關(guān)。測(cè)定膽堿酯酶水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生的黃色物質(zhì)，獲得抑制率，判斷樣品中是否有高劑量有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在［7］。

1.2 檢測(cè)流程

儀器開(kāi)機(jī)預(yù)熱—儀器校準(zhǔn)—測(cè)量空白—樣品培養(yǎng)和樣品測(cè)量—結(jié)果判定。

1.2.1 開(kāi)機(jī)預(yù)熱檢查儀器參數(shù)

提前開(kāi)啟儀器電源開(kāi)關(guān)進(jìn)行儀器預(yù)熱。檢查儀器設(shè)置參數(shù)，選擇平行測(cè)定模式，打開(kāi)“即時(shí)打印”，設(shè)定培養(yǎng)時(shí)間10 min，顯色時(shí)間3 min。

1.2.2 儀器校準(zhǔn)

進(jìn)入儀器校準(zhǔn)模式。吸取農(nóng)殘（一）1.0 ml于比色瓶，加入農(nóng)殘（二）（三）試劑各50μl，蓋上比色皿定位器，搖勻后擦凈表面，放入比色槽A位鎖定，手工計(jì)時(shí)3 min后按“↑”鍵選擇校準(zhǔn)按鈕。校準(zhǔn)完畢后，儀器屏幕提示“校準(zhǔn)完畢...”

1.2.3 空白測(cè)定

儀器校準(zhǔn)完畢，按“↓”進(jìn)入空白測(cè)量，儀器提示“正在預(yù)熱...”，等待儀器發(fā)出“滴、滴、滴”聲響，儀器屏幕顯示“請(qǐng)加試劑4”，取出比色瓶加入50μl農(nóng)殘（四）試劑，蓋上定位器，搖勻后擦凈表面放入原位置鎖定，按回車(chē)鍵，儀器屏幕顯示“正在測(cè)量...”，儀器自動(dòng)倒計(jì)時(shí)3 min，時(shí)間到后，空白測(cè)定結(jié)束。儀器顯示吸光度值A(chǔ)1、A2、△A。觀察△A在0.4左右，判斷試劑有效，進(jìn)入樣品測(cè)量。

1.2.4 樣品培養(yǎng)和樣品檢測(cè)

進(jìn)入樣品測(cè)量模式。稱樣2.0 g于提取品中，加入農(nóng)殘（一）試劑10 ml浸沒(méi)樣品，靜置提取15 min，待測(cè)。

取一干凈比色瓶，吸取1.0 ml待測(cè)液清液，加入農(nóng)殘（二）（三）試劑各50μl，蓋上比色瓶定位器，搖勻后擦凈表面，放入比色槽，按“↓”鍵，儀器屏幕顯示“正在培養(yǎng)”，開(kāi)始培養(yǎng)10 min自動(dòng)倒計(jì)時(shí)。倒計(jì)時(shí)結(jié)束，儀器提示“請(qǐng)加入試劑4...”。

取出比色瓶，加入農(nóng)殘（四）試劑50μl，搖勻后擦凈放入原比色槽位。按繼續(xù)鍵，儀器屏幕顯示“正在測(cè)量”，自動(dòng)倒計(jì)時(shí)3 min，倒計(jì)時(shí)結(jié)束，儀器顯示各通道抑制率結(jié)果。儀器自帶打印機(jī)打印各通道結(jié)果。

1.2.5 結(jié)果判定

GDYN-106SD，以50%為抑制率分界點(diǎn)，≥50%為陽(yáng)性樣品，＜50%為陰性樣品。

2 檢測(cè)中碰到的問(wèn)題和解決方法

2.1 規(guī)范取樣過(guò)程

取樣要有代表性，田間取樣時(shí)可采用對(duì)角線法、梅花點(diǎn)法、棋盤(pán)法、S形法等。取樣量可以參考NY/T 762-2004《蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)抽樣規(guī)范》和GB/T 8855-2008《新鮮水果和蔬菜 取樣方法》，一般在1～3 kg。取可食部分進(jìn)行制樣備樣。

對(duì)于葉菜類撿去腐爛葉片，擦去表面泥土后，不同植株上分別取葉片壓疊后，用1 cm打孔器在葉片和葉柄處分別打孔，混勻后進(jìn)行測(cè)量。

對(duì)于瓜果類樣品，用刀削取不同個(gè)體可食表面各1片，切成1 cm見(jiàn)方，混勻后待測(cè)。

2.2 空白對(duì)照無(wú)法通過(guò)的原因

空白對(duì)照無(wú)法通過(guò)可能的原因有少加某種試劑、試劑變質(zhì)、儀器設(shè)置中反應(yīng)時(shí)間設(shè)置過(guò)短、試劑溫度過(guò)低影響酶活性、比色瓶添加試劑后未放入原比色槽、儀器未預(yù)熱穩(wěn)定等。各項(xiàng)原因需逐項(xiàng)檢查排除。

2.3 檢測(cè)結(jié)果抑制率異常

檢測(cè)結(jié)果抑制率異常原因有比色瓶定位器未鎖定導(dǎo)致光路漏光；比色瓶表面粘有油脂；比色瓶?jī)?nèi)有較大氣泡等。每次測(cè)量樣品前需要進(jìn)行空白測(cè)量，建議試劑空白測(cè)量△A在0.4左右再測(cè)樣。

添加試劑的量直接影響抑制率結(jié)果，特別是酶顯色劑和底物的量，如果加少了，會(huì)導(dǎo)致抑制率結(jié)果高，反之加多了，會(huì)降低抑制率結(jié)果。需要對(duì)添加試劑用的移液槍進(jìn)行定期校準(zhǔn)。

2.4 建立溫度校正曲線

建立溫度校正曲線，溫度高度影響酶的活性，間接影響最終樣品抑制率。蘇明偉等發(fā)現(xiàn)對(duì)一定濃度農(nóng)藥樣品溶液，隨溫度升高，抑制率逐漸增大，呈線性關(guān)系，并建立了20～40 ℃經(jīng)驗(yàn)式?；鶎訉?shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的儀器條件建立自己的關(guān)系式，將抑制率結(jié)果校正在標(biāo)準(zhǔn)溫度。

3 小結(jié)

以GDYN-106SD為代表的農(nóng)殘速測(cè)儀是有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥快速篩查的有效方式。該方法已在鄉(xiāng)鎮(zhèn)和種植基地進(jìn)行推廣。但是農(nóng)殘速測(cè)儀還存在儀器缺少統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)、試劑質(zhì)量參差不齊、檢測(cè)范圍無(wú)法覆蓋有機(jī)氯、菊酯等問(wèn)題。

基層檢測(cè)人員必須加強(qiáng)操作培訓(xùn)，在取樣、試劑配制保存使用、干擾樣的處理、陽(yáng)性結(jié)果的處理等方面加強(qiáng)關(guān)注，以獲得更加可靠地檢測(cè)結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

［1］ 周春梅.“入世” 與中國(guó)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的應(yīng)對(duì)措施.農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2001，21（6）：7～10

［2］ 崔偉偉，張強(qiáng)斌，朱先磊.農(nóng)藥殘留的危害及其暴露研究進(jìn)展.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（2）：883～884

［3］ 邱靜.我國(guó)主要農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法及產(chǎn)品現(xiàn)狀分析.農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全，2011，（5）：41～46