孫世宇

（遼寧省動物疫病預(yù)防控制中心，遼寧沈陽 110164）

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豬瘟乳兔疫苗的免疫效果實(shí)驗(yàn)

孫世宇

（遼寧省動物疫病預(yù)防控制中心，遼寧沈陽 110164）

豬瘟是由豬瘟病毒引起的豬的一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病，嚴(yán)重危害我國養(yǎng)豬業(yè)，屬于國家一類動物疫病。1956年我國豬瘟兔化弱毒苗培育成功，證明安全有效，至此，我國在豬瘟疫苗的研究中取得了重大突破。豬瘟兔化弱毒苗主要包括脾淋苗和乳兔苗，乳兔苗是通過向乳兔體內(nèi)接種豬瘟兔化弱毒，選擇發(fā)生正確病變的乳兔，解剖，取其肌肉和肝、腎，進(jìn)行研磨、過濾，獲得疫苗。本文選取某種豬瘟乳兔疫苗，對其進(jìn)行檢驗(yàn)，主要進(jìn)行安全檢驗(yàn)、效力檢驗(yàn)。

1　試驗(yàn)材料

乳兔（5日齡），家兔（1.5～3kg），豚鼠（330～450g）；Bal B/C小鼠。

2　方法

2.1安全檢驗(yàn)

（1）用滅菌生理鹽水稀釋疫苗，皮下注射Bal B/C小鼠5只，各0.2ml；肌肉注射豚鼠2只，各1ml。觀察10d，每日檢查體溫，全部存活則疫苗合格。

（2）選用經(jīng)中和試驗(yàn)方法檢測無豬瘟抗體的健康斷奶豬，注苗前觀察5～7d，測體溫2次/日。疫苗按瓶簽注明的頭份用滅菌生理鹽水稀釋成每1ml含6頭份疫苗，肌肉注射豬4頭，5ml/頭。注苗后，每日上下午測體溫，觀察21日。體溫、精神、食欲與注苗前相比沒有明顯變化，或體溫升高超過0.5℃～1℃，稽留〈2日，或減食〈1日，疫苗可判為合格。如有1頭豬體溫超過常溫1℃～1.5℃，稽留不超過兩個溫次，疫苗也可判為合格。如有1頭豬的反應(yīng)超過上述標(biāo)準(zhǔn)；或出現(xiàn)可疑的其他體溫反應(yīng)和其他異?，F(xiàn)象時，可用4頭豬重檢1次，重檢的豬仍出現(xiàn)同樣反應(yīng)，疫苗應(yīng)判為不合格。

2.2效力檢驗(yàn)

（1）取兩支疫苗，用生理鹽水將每頭份疫苗稀釋150倍，每支接種體重相同家兔2只，每只兔耳靜脈注射1ml。家兔接種后，上下午各測體溫一次，48h后，每隔6h測體溫一次，根據(jù)體溫反應(yīng)和攻毒結(jié)果進(jìn)行綜合判定。

（2）定型熱反應(yīng)（++），潛伏期48～96h，體溫上升呈明顯曲線，至少有3個溫次超過常溫1℃以上，稽留18～36h，如果超過42h，則必須攻毒。

（3）輕熱反應(yīng)（+），潛伏期48～96h，體溫上升呈明顯曲線，至少有個溫次超過常溫0.5℃以上 稽留12～36h。

（4）可疑反應(yīng)（±），潛伏期48～96h，體溫曲線起伏不定，稽留不到12h或潛伏期24～48及96～120 h出現(xiàn)熱反應(yīng)，體溫反應(yīng)呈二次高峰，有一次高峰符合定型熱反應(yīng)（++）或輕熱反應(yīng)（+）標(biāo)準(zhǔn)者，均須攻毒。攻毒后無反應(yīng)時，該兔熱反應(yīng)可判為定型熱或輕熱反應(yīng)。

（5）無反應(yīng)（-），體溫正常者。

3　結(jié)果

3.1安全檢驗(yàn)

經(jīng)過實(shí)驗(yàn)，乳兔苗可使5只小白鼠和2只豚鼠發(fā)熱，但不致死。實(shí)驗(yàn)4頭豬，其中3頭接種前后無明顯變化，另1頭減食1d，表明疫苗安全性合格。

3.2效力檢驗(yàn)

兩支疫苗分別接種2只家兔后，均表現(xiàn)為定型熱反應(yīng)，可使家兔發(fā)熱，并稽留18～36h。表明疫苗效力合格。

4　討論

4.1乳兔苗的特點(diǎn)

乳兔苗的免疫原性很好，免疫接種后可以快速產(chǎn)生堅強(qiáng)的免疫力。但由于疫苗內(nèi)含有乳兔組織成分，因此，接種后個別豬可能會出現(xiàn)過敏反應(yīng)。

4.2豬瘟疫苗使用中應(yīng)注意的問題

為搞好豬瘟的免疫，確保免疫效果，豬瘟免疫要注意以下幾個問題：

4.2.1制定合理的免疫程序

豬場要結(jié)合本場實(shí)際，制定合理的免疫程序，并嚴(yán)格按照程序進(jìn)行，嚴(yán)禁隨意進(jìn)行免疫。

4.2.2避免疫苗間的影響

據(jù)報道，藍(lán)耳病疫苗與豬瘟疫苗同時使用會降低豬瘟抗體合格率，所以豬瘟疫苗和藍(lán)耳病苗注射要間隔10天以上。

4.2.3及時淘汰帶毒母豬

帶毒母豬不停地排毒，在豬場就是“定時炸彈”。對流產(chǎn)、死產(chǎn)、產(chǎn)木乃胎的母豬及時檢測豬瘟病毒，豬瘟抗原陽性的母豬要及時淘汰。

4.2.4過敏反應(yīng)要及時治療

注射豬瘟疫苗前要準(zhǔn)備好腎上腺素或地塞米松，注射疫苗后要觀察10～20min，發(fā)現(xiàn)過敏時要及時注射，以免造成不必要的損失。

4.2.5定期監(jiān)測抗體水平

豬瘟疫苗注射后要定期檢測豬瘟抗體，不合格的及時補(bǔ)免。

4.2.6增強(qiáng)飼養(yǎng)管理

實(shí)施疫苗注射對機(jī)體的影響與所導(dǎo)致的機(jī)體反應(yīng)是相當(dāng)復(fù)雜的。機(jī)體反應(yīng)不僅與疫苗注射劑量有關(guān)，而且與機(jī)體體質(zhì)有密切關(guān)系。因此，在治療時要加強(qiáng)對病畜的飼養(yǎng)管理，加強(qiáng)營養(yǎng)，增強(qiáng)體質(zhì)。

（6）結(jié)果判定：注苗后，2只家兔均呈定型熱反應(yīng)（++），或1只兔呈定型熱反應(yīng)（++）、另1只兔呈輕熱反應(yīng)（+）時，疫苗判為合格；注苗后，1只兔呈定型熱反應(yīng)（++）或輕熱反應(yīng)（+），另1只兔呈可疑反應(yīng)（±）或2只兔均呈輕熱反應(yīng)（+）時，可在注苗后7～10日攻毒。攻毒時，取對照兔2只，攻毒劑量為50～100倍乳劑。每兔耳靜脈注射1ml。攻毒后的體溫反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)，熱反應(yīng)（+）為潛伏期24～72h，體溫上升呈明顯曲線，超過常溫1℃以上，稽留12～36h。可疑反應(yīng)為（±）潛伏期不到24h或72h以上，體溫曲線起伏不定，稽留不到12h或超過36h而不下降。無反應(yīng)（—）體溫正常。攻毒后，2只對照家兔呈定型熱反應(yīng)（++），或1只兔呈定型熱反應(yīng)（++），另1只兔呈輕熱反應(yīng)（+），而2只注苗兔均無反應(yīng)（-），疫苗判合格。注苗后，如有1只兔呈定型熱（++）或輕熱反應(yīng)（+），另1只兔呈可疑反應(yīng)（±）或無反應(yīng)（-），可對可疑反應(yīng)兔或無反應(yīng)兔采用剖殺或采心血分離病毒的方法，判明是否隱性感染；或注苗后，2只兔均呈輕熱反應(yīng)，亦可對其中1只兔分離病毒。方法是：接種疫苗后96～120h之間，將兔剖殺并取脾臟，用生理鹽水制成50倍稀釋乳劑，接種2只家兔，每只兔耳靜脈注射1ml。凡有1只兔潛伏期24～72h出現(xiàn)定型熱反應(yīng)（++），疫苗可判為合格。