方　麗，王連平，王漢榮（浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與微生物研究所，浙江杭州 310021）

一種為害溫郁金的新病害溫郁金枯萎病

方麗，王連平，王漢榮*
（浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與微生物研究所，浙江杭州 310021）

近年來(lái)，在溫州瑞安的溫郁金基地中發(fā)生了一種嚴(yán)重的枯萎病害——溫郁金枯萎病。該病害引起溫郁金葉片枯黃，植株大量枯死，塊莖腐爛，造成約20%～50%的產(chǎn)量損失，嚴(yán)重的致使溫郁金整株死亡。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，該病害是由茄科勞爾氏菌侵染引起的。

溫郁金；新病害；溫郁金枯萎病；勞爾氏菌

文獻(xiàn)著錄格式：方麗，王連平，王漢榮.一種為害溫郁金的新病害溫郁金枯萎?。跩］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，57（7）：985-986.

溫郁金為姜科植物，是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的中藥材，主產(chǎn)區(qū)在溫州瑞安一帶。《中國(guó)藥典》記載，溫郁金性寒，味苦，辛，歸肝、膽、心經(jīng)。具有活血止痛，行氣化瘀，清心解郁，利膽退黃等功效，為著名的中藥“浙八味之一”，在中醫(yī)臨床治療中有較廣泛的應(yīng)用?，F(xiàn)代臨床研究發(fā)現(xiàn)，溫郁金塊莖富含倍半萜烯醇類(lèi)、生物堿和姜黃素類(lèi)物質(zhì)，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有抑制及促進(jìn)凋亡的作用［1-3］。2013年7月，在溫州瑞安的溫郁金產(chǎn)地出現(xiàn)了一種枯萎病。該病最初引起植株葉片失水狀萎蔫，葉脈黃化，最后整個(gè)植株黃化枯萎，地下塊莖腐爛。該病不僅嚴(yán)重挫傷農(nóng)戶(hù)發(fā)展溫郁金的積極性，阻礙浙江溫郁金產(chǎn)業(yè)的持續(xù)快速發(fā)展，而且也嚴(yán)重影響農(nóng)民增收和農(nóng)業(yè)增效。因此，必須盡快探尋溫郁金枯萎病的防治藥劑及其綜合治理技術(shù)，遏制溫郁金枯萎病的擴(kuò)展蔓延，保障溫郁金產(chǎn)業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。

1　材料與方法

1.1病害標(biāo)樣采集

溫郁金枯萎病病樣采集于溫州瑞安的溫郁金基地；采樣后將標(biāo)樣置于保鮮袋帶回實(shí)驗(yàn)室分離，待用。

1.2病害癥狀觀察

在田間系統(tǒng)地對(duì)自然病株和人工接種病株的癥狀進(jìn)行觀察記錄。

1.3病原菌的分離和培養(yǎng)

分別對(duì)十幾個(gè)溫郁金的葉片、莖部和塊莖病樣用PSA、Richard、Czapek、NA等培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)組織分離和劃線(xiàn)分離、純化。獲得分離自溫郁金的莖部單胞菌株，編號(hào)為W-J-025，在TZC上28℃培養(yǎng)2 d，記錄菌落形態(tài)、顏色。

1.4病原菌的生理小種鑒定

盆栽的茄子、番茄、煙草、溫郁金和馬鈴薯等小苗，于溫室內(nèi)（20～28℃）種植2周后，用溫郁金枯萎病病原分離物對(duì)小苗進(jìn)行傷口接種，在XT5401-CD275TJH智能生物人工氣候箱內(nèi)，溫度25℃、相對(duì)濕度98%以上、光照12 h黑暗12 h情況下，保濕培養(yǎng)，以健康的植株為對(duì)照，重復(fù)3次，每天定時(shí)觀察記錄發(fā)病情況，分析分離物的生理小種類(lèi)型。

2　結(jié)果與分析

2.1田間癥狀

4月中下旬溫郁金出土后就逐漸開(kāi)始出現(xiàn)病癥，初發(fā)病植株葉片呈輕微缺水狀萎蔫，失去光澤，葉尖、葉緣或葉脈間微微發(fā)黃；隨著葉片的不斷抽生，發(fā)病葉片不斷增多，癥狀也不斷加重，上部葉片缺水狀萎蔫明顯，下部葉片的著生角度變大，葉片向葉背反卷，中脈漸漸黃化，葉緣、葉尖，或葉面隨機(jī)出現(xiàn)不規(guī)則黃斑；隨著病情加重，葉片黃化加重加深，葉面、葉緣，或葉尖出現(xiàn)枯死斑，有時(shí)病斑枯死前呈水漬狀，直至整葉枯黃，整個(gè)植株葉片自下而上地枯黃，最后整株黃化枯死；死后莖基部、塊莖常常腐爛。有時(shí)發(fā)病葉片呈現(xiàn)水浸狀、青褐色的急性枯死。

2.2病原菌的分離及培養(yǎng)性狀

對(duì)十幾個(gè)溫郁金的葉片、莖部和塊莖病樣進(jìn)行畫(huà)線(xiàn)分離和組織分離，葉片病樣上獲得3個(gè)真菌分離物和8個(gè)細(xì)菌分離物，莖部獲得1個(gè)真菌分離物和4個(gè)細(xì)菌分離物，塊莖病樣上獲得12個(gè)細(xì)菌分離物。經(jīng)柯赫法則證明真菌為非致病菌；在獲得的24個(gè)細(xì)菌分離物中，莖部和塊莖部分分離獲得的8個(gè)菌株為致病菌。選擇編號(hào)為W-J-025的病原菌作為典型菌株，置于25℃NA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，保存?zhèn)溆谩Ｔ摼甑母锾m氏染色反應(yīng)陰性，菌體桿狀，具1～3根極鞭毛，能游動(dòng)，好氣性，不產(chǎn)生芽孢。在NA培養(yǎng)基上于28℃生長(zhǎng)3 d，菌落灰白至暗褐色，平滑有光澤，濕潤(rùn)而呈黏液狀，直徑2～3 mm。在KMB培養(yǎng)基上不產(chǎn)生熒光色素。在TZC培養(yǎng)基上菌落初為白色，以后中央出現(xiàn)紅色小點(diǎn)，菌落紅色小點(diǎn)外的白邊大小因菌株不同而不同。

2.3病原菌的生理小種

將分離自溫郁金的3個(gè)代表菌株W-J-004、WJ-025、W-K-006和對(duì)照菌株S-1接種于茄子、番茄、煙草、溫郁金、馬鈴薯等幼苗，15 d后調(diào)查發(fā)現(xiàn)：分離自溫郁金的3個(gè)代表菌株均可侵染溫郁金；W-J-025、W-K-006對(duì)茄子的致病力較強(qiáng)，對(duì)馬鈴薯有微弱的致病力；W-J-004能夠侵染番茄，而對(duì)茄子的致病力弱；3個(gè)菌株均不能侵染煙草。對(duì)照菌株S-1能侵染除溫郁金以外的其他4種植物，其中，對(duì)茄科植物茄子、番茄、煙草具有較強(qiáng)的致病力，對(duì)馬鈴薯的致病力較弱。根據(jù)鄒陽(yáng)等［4］的青枯勞爾氏菌生理小種劃分標(biāo)準(zhǔn)，3個(gè)代表菌株W-J-004、W-J-025、W-K-006應(yīng)屬于茄科勞爾氏菌（Ralstonia solanacearum）4號(hào)生理小種。

3　小結(jié)與討論

茄科勞爾氏菌引起的溫郁金枯萎病害，是近年來(lái)溫郁金產(chǎn)區(qū)最嚴(yán)重的病害，對(duì)瑞安地區(qū)溫郁金產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重的影響。研究并鑒定溫郁金枯萎病的病原，是提供安全有效的病害防治措施的基礎(chǔ)，同時(shí)也可防止農(nóng)戶(hù)盲目過(guò)量的用藥，促進(jìn)中藥材產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

［1］ 何必立，呂賓，徐毅，等.溫郁金對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用及其對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響［J］.中醫(yī)藥學(xué)刊，2006，24（9）：1741-1743.

［2］ 王佳林，呂賓，倪桂寶，等.溫郁金對(duì)VEGF和MVD在人胃癌裸小鼠移植瘤中表達(dá)的研究［J］.腫瘤，2005，25（1）：55-57.

［3］ 王佳林，呂賓，倪桂寶，等.溫郁金對(duì)人胃癌裸鼠移植瘤生長(zhǎng)和環(huán)氧合酶-2表達(dá)的影響［J］.胃腸病學(xué)，2006，11（5）：277-280.

［4］ 鄒陽(yáng)，肖崇剛.重慶地區(qū)煙草青枯病菌生理小種的初步鑒定［J］.煙草科技，2008（5）：60-64.

（責(zé)任編輯：張才德）

S435

A

0528-9017（2016）07-0985-02

10.16178/j.issn.0528-9017.20160702

2016-05-16

溫郁金枯萎成因及關(guān)鍵防控技術(shù)研究

方 麗（1978—），女，浙江新昌人，從事經(jīng)濟(jì)作物病害研究工作，E-mai1：fl0155@163.com。

王漢榮，研究員，E-mai1：wanghrg@yahoo.com.cn。