李金花 李 軍 王君明 崔 瑛

(河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046)

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地黃葉化學(xué)成分及藥理作用研究進展

李金花 李 軍 王君明1崔 瑛1

(河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046)

地黃葉；化學(xué)成分；藥理

地黃葉始載于《北京市中藥材標準》〔1〕，為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa的葉，味苦，性寒，歸心、肝、腎經(jīng)，有清熱、益氣活血、滋陰補腎之功，內(nèi)服能生津止渴，滋陰降火，外用能治療惡瘡，手足癬。以往對地黃塊根研究較為豐富，在臨床中也得到了較為廣泛的應(yīng)用。由于地黃特殊的生長條件，以及每年在秋季采收地黃的時候，地黃葉基本上被丟棄并沒有體現(xiàn)其藥用價值，我們應(yīng)該對地黃葉進行更多地研究。本文通過查閱資料、整理文獻，對近年來地黃葉的化學(xué)成分及藥理作用的相關(guān)研究進行綜述，以期為地黃葉的進一步開發(fā)和利用提供一定的依據(jù)。

1 化學(xué)成分

地黃葉含有環(huán)烯醚萜類、揮發(fā)油以及苷類等化學(xué)成分，它的大部分化學(xué)成分與地黃塊根的化學(xué)成分相同。開展地黃葉化學(xué)成分的相關(guān)研究是發(fā)揮中藥材地黃多種作用的基礎(chǔ)，是探索地黃葉深度開發(fā)和利用的前提。

1.1 環(huán)烯醚萜及其苷類 環(huán)烯醚萜類是地黃葉的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，梓醇為環(huán)烯醚萜類主要的化合物之一。劉孟奇等〔2〕通過組織化學(xué)的方法觀察地黃葉的顯微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示,黃斑樣的薄壁細胞是地黃葉海綿組織中梓醇和多糖的存儲場所，這些薄壁細胞在地黃葉的葉片周圍齒末端處最為豐富。王娟娟等〔3〕利用超高效液相色譜(UPLC)法檢測地黃葉中梓醇和毛蕊花糖苷的含量，并且與地黃塊根中梓醇和毛蕊花糖苷含量進行比較，結(jié)果顯示，這兩種化學(xué)成分在地黃葉中的含量明顯比地黃塊根的含量高，而且地黃葉中不同部位的梓醇含量具有明顯的差別，而不同部位的毛蕊花糖苷含量差別較小，提示地黃葉具有很大的開發(fā)價值。

許繼承等〔4〕利用95%乙醇超聲提取鮮地黃葉、干地黃葉、生地黃、熟地黃中的梓醇，經(jīng)過HPLC含量測定后，發(fā)現(xiàn)地黃葉含有大量的梓醇，說明從地黃葉提取梓醇具有一定的可行性，并且可以減少地黃藥用資源的浪費，也可以增加梓醇的提取來源。

考察地黃葉、肉蓯蓉、梧桐花等5種不同中藥材，檢測毛蕊花糖苷的含量，結(jié)果顯示，地黃葉中的毛蕊花糖苷含量最高，而且毛蕊花糖苷比較穩(wěn)定〔5〕。在秋季采收地黃葉的時候并不會影響地黃葉中的毛蕊花糖苷的含量，由于毛蕊花糖苷也有一定的藥用價值，筆者認為應(yīng)該加大對地黃葉的開發(fā)利用，變廢為寶，更具有重要的經(jīng)濟價值。

1.2 苯乙醇及其苷類 地黃葉中含有苯乙醇及苷類化合物。張艷麗等〔6〕采取閃式提取的方法對干燥地黃葉進行提取，50%含水丙酮破碎提取物中的組織，得溶于水的物質(zhì)和不溶于水的物質(zhì)。溶于水的物質(zhì)用95%乙醇分級進行沉淀，再依次使用不同濃度的甲醇對其進行洗脫，不溶于水的物質(zhì)用乙酸乙酯對其進行萃取再洗脫。將最終洗脫出的物質(zhì)進行結(jié)構(gòu)鑒定，得到苯乙醇類化合物，分別是對羥基苯乙醇，3,4-二羥基苯乙醇，焦地黃苯乙醇苷B1。

1.3 萜類及其苷類 張艷麗等〔6〕從地黃葉的提取物中分離出萜類及其苷類化合物，進行波譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)進行鑒定，確定出具有2β,3β,19α-三羥基齊墩果-12-烯-13,28-二羧酸，2α,3β-二羥基齊墩果-12-烯-28-酸，glutinolicacid，齊敦果酸，熊果酸，齊墩果酮酸，胡蘿卜苷等化合物。

1.4 揮發(fā)油 翟彥峰等〔7〕通過水蒸氣蒸餾法提取地黃葉中的揮發(fā)油，利用GC-MS法分析鑒定地黃葉中揮發(fā)油的化學(xué)成分，最終鑒定出38個化合物的結(jié)構(gòu)，并進行含量的測定，其中葉綠醇、二十七烷、十六碳酸含量相對較高。

1.5 黃酮類 從地黃葉的提取物組織中分離純化、并通過化合物的理化性質(zhì)鑒定出具有黃酮類化合物，分別是香葉木素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素、木犀草素〔6〕。

2 藥理作用

2.1 降血糖作用 趙素霞等〔8〕利用小鼠實驗，比較地黃葉水提95%醇沉物、桑葉70%醇提物、地黃葉和桑葉醇提物合并液(1∶1)對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的降糖作用，實驗結(jié)果顯示，地黃葉單藥95%醇提物對糖尿病小鼠“三多一少”癥狀明顯改善并且能夠降低血糖，效果明顯高于桑葉70%醇提物以及兩者合用，提示地黃葉水提95%醇沉液具有降血糖的作用。但是地黃葉在降血糖方面的研究報道很少，筆者認為應(yīng)該加大對地黃葉在降血糖這方面的實驗研究。研究發(fā)現(xiàn),鮮地黃葉的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位對葡萄糖誘導(dǎo)小鼠高血糖具有明顯的降低血糖作用，并且具有免疫調(diào)節(jié)活性以及促進胰島素分泌，經(jīng)過結(jié)構(gòu)鑒定得出β-谷甾醇和胡蘿卜苷，推測二者可能是降血糖的有效成分〔9〕。

2.2 改善腎功能的作用 沈欣等〔10〕通過對大鼠尾靜脈注射兔抗大鼠基底膜抗體腎毒血清進行造模，造模成功后，給予一定劑量的地黃葉總苷,16 d后，發(fā)現(xiàn)地黃葉總苷不但可以明顯降低模型腎炎大鼠24 h尿蛋白、血漿總膽固醇的含量，還可以減輕模型腎炎大鼠腎臟的病理學(xué)變化，提示地黃葉總苷對兔IgG加速型腎毒血清腎炎具有顯著的治療作用，并且具有一定的量效關(guān)系。動物實驗研究表明，地黃葉總苷不同劑量對陽離子化牛血清白蛋白腎炎模型大鼠具有顯著的治療作用〔11〕。地黃葉總苷膠囊(干燥的地黃葉提取分離所得)配伍氯沙坦鉀片和氯沙坦鉀片單藥對糖尿病腎病進行早期治療研究，發(fā)現(xiàn)兩藥合用的患者收縮壓和舒張壓顯著改善，尿微量白蛋白和尿蛋白排泄率也都有下降，說明地黃葉與氯沙坦鉀片聯(lián)合使用能夠阻止糖尿病腎病病情的發(fā)展〔12〕。在臨床上治療糖尿病腎病中，地黃葉總苷膠囊聯(lián)合胰激肽原酶片〔13〕、坎地沙坦脂〔14〕等具有顯著的治療作用，并且起到保護腎臟的作用。

將86例患有慢性腎臟疾病的患者隨機分為2組，兩組分別給予單藥腎炎康復(fù)片、地黃葉總苷膠囊聯(lián)合腎炎康復(fù)片。治療一段時間后，觀察治療前后血清肌酐、24 h尿蛋白含量的變化值，并進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果顯示，治療后血清肌酐、24 h尿蛋白含量顯著降低〔15〕，說明地黃葉對慢性腎炎具有一定的治療作用。

2.3 抗菌作用 李玉璽等〔16〕利用80%的乙醇分別提取地黃的不同部位(花、葉、根)，分析比較地黃醇提液的不同部位的體外抑制菌體(常見的金黃色葡萄球菌)活性情況，測定各菌懸液OD值，研究結(jié)果顯示，地黃葉80%乙醇提取液的抑菌效果最強，其次是地黃的根，抑菌效果最差的是地黃花的80%乙醇提取液，三個部位80%乙醇提取液隨著濃度增加，對金黃色葡萄球菌的抑制效果呈遞增趨勢，提示地黃葉具有很高的開發(fā)價值，這可能與地黃塊根有較多相同的成分相關(guān)。

2.4 解毒作用 古人常用新鮮的地黃葉治療對化膿性傷口，具有顯著性的療效，并且可以很快痊愈?，F(xiàn)代關(guān)于地黃葉解毒的研究基本上沒有，筆者認為可以開發(fā)地黃葉解毒作用的研究。

2.5 其他 通過小鼠子宮增重實驗來優(yōu)選地黃葉、鮮地黃、生地黃、熟地黃這4味藥水提物對性未成熟雌性小鼠子宮系數(shù)的影響，判斷這4種藥材是否具有雌激素樣活性。結(jié)果顯示，鮮地黃水提取物對性未成熟雌性小鼠子宮的誘導(dǎo)作用較強，地黃葉水提物對性未成熟雌性小鼠子宮系數(shù)基本上沒有影響〔17〕，提示地黃葉沒有雌激素樣活性。

3 結(jié) 語

綜上所述，地黃葉含有環(huán)烯醚萜類、黃酮及其苷類等化學(xué)成分，其中環(huán)烯醚萜類含量較高，尤其是其中梓醇的含量較豐富，遠遠高于地黃塊根。眾所周知，梓醇具有神經(jīng)保護，抗腫瘤，降血糖等多種藥理作用，筆者認為應(yīng)該加大利用地黃葉富含的梓醇及其他的成分，使其發(fā)揮更大的價值。雖然地黃葉分離出來很多化合物與地黃塊根相同，如環(huán)烯醚萜類、苯乙醇類等，但是在實際采收地黃的時候，基本上都是舍棄了地黃的地上部分，并沒有使其充分的合理利用和體現(xiàn)其藥用價值，筆者認為，應(yīng)該加大對地黃葉的研究，使地黃這味中藥資源得到更加合理的開發(fā)和利用。

1 北京衛(wèi)生局.北京市中藥材標準〔S〕.北京:首都師范大學(xué)出版社,1988：111-2.

2 劉孟奇,徐圣博,崔曉飛.地黃葉和莖的解剖學(xué)及組織化學(xué)研究〔J〕.西北植物學(xué)報,2012;32(2):257-62.

3 王娟娟,張振凌,都盼盼,等.UPLC法測定地黃葉及塊根中的梓醇和毛蕊花糖苷〔J〕.中成藥,2015;37(9):1981-4.

4 許繼承,高明波,王 婷,等.HPLC測定地黃葉與生地、熟地中梓醇含量〔J〕.廣州化工,2015;43(12):103-5.

5 邊寶林,王宏潔,楊 健.5種不同藥材中毛蕊花糖苷的含量比較〔J〕.中國中藥雜志,2010;35(6):739-40.

6 張艷麗,馮志毅,鄭曉珂,等.地黃葉的化學(xué)成分研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志,2014;49(1):15-21.

7 翟彥峰,邢煜軍,王先友,等.地黃葉揮發(fā)油GC-MS分析〔J〕.河南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2010;29(2):113-5.

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9 匡巖巍.鮮地黃葉中梓醇的積累動態(tài)及其抗銀屑病作用的研究〔D〕.北京:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,2009.

10 沈 欣,李德鳳,宗桂珍,等.地黃葉總苷對兔IgG加速型大鼠腎毒血清腎炎的作用研究〔J〕.中國實驗方劑學(xué)雜志,2010;16(8):179-81.

11 沈 欣,李德鳳,宗桂珍,等.地黃葉總苷對大鼠C-BSA腎炎的作用研究〔J〕.中國實驗方劑學(xué)雜志,2010;16(13):167-9.

12 賈振武.地黃葉總苷膠囊聯(lián)合氯沙坦鉀片治療早期糖尿病腎病的療效觀察〔J〕.中國中醫(yī),2014;12(12):263-4.

13 李德功.地黃葉總苷膠囊聯(lián)合胰激膚原酶片治療糖尿病腎病68例〔J〕.光明中醫(yī),2014;29(8):1715-6.

14 薛福平,袁慧欣,郭麗君,等.坎地沙坦脂聯(lián)合地黃葉總苷治療早期糖尿病腎病療效觀察〔J〕.武警醫(yī)學(xué),2013;24(10):857-9.

15 柳文晶,王群元,劉 清,等.地黃葉總苷膠囊聯(lián)合腎炎康復(fù)片治療慢性腎臟病44例療效觀察〔J〕.河北中醫(yī),2013;35(3):408-10.

16 李玉璽,劉俊華,馬海玲.藥用植物地黃不同部位粗提液體外抑菌活性的比較研究〔J〕.安徽農(nóng)學(xué)通報,2015;21(20):24-6.

17 鄭曉珂,劉朝妍,蔣 贇,等.懷地黃雌激素樣活性篩選的實驗研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志,2013;48(21):1831-6.

〔2016-04-11修回〕

(編輯 李相軍)

河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計劃項目(2014GGJS-072)；鄭州市科技攻關(guān)計劃項目(20150309)；河南中醫(yī)學(xué)院2015年研究生創(chuàng)新基金項目(2015YCX020)

1 河南中醫(yī)藥大學(xué)呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心

王君明(1980-)，男，博士，博士后，副教授，主要從事中藥藥性藥效機制及新藥開發(fā)研究。

李金花(1989-)，女，在讀碩士，主要從事中藥藥性藥效機制及新藥開發(fā)研究。

R284

A

1005-9202(2016)19-4926-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.119