趙洪秋 楊 麗 周 霞 劉彩霞 李新強(qiáng)

（1.河北省藁城市畜牧水產(chǎn)局，河北 藁城 052160；2.河北省石家莊市藁城區(qū)衛(wèi)生和計劃生育局，河北 藁城 052160）

藁城市規(guī)模化豬場豬瘟抗體的血清學(xué)調(diào)查

趙洪秋1楊 麗2周 霞1劉彩霞1李新強(qiáng)1

（1.河北省藁城市畜牧水產(chǎn)局，河北 藁城 052160；2.河北省石家莊市藁城區(qū)衛(wèi)生和計劃生育局，河北 藁城 052160）

豬瘟目前仍然是危害國內(nèi)外養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一，本文采用北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體阻斷ELISA檢測試劑盒對藁城市32個規(guī)模化豬場送檢的650份血清進(jìn)行了抗體檢測。結(jié)果顯示，被檢樣本平均阻斷率為52.72%，平均陽性率（有豬瘟抗體存在）為71.47%，個體豬場陽性率最低的為7%，最高為100%。這說明這些省份豬群豬瘟免疫效果不能達(dá)到完全防控豬瘟的目的，仍需不斷加強(qiáng)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 血清 各地區(qū)豬場送檢血清。

1.1.2 試劑盒 北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體檢測試劑盒。

1.1.3 器材 美國Thermo Labsystems Multiskan Mk3酶標(biāo)儀、德國Eppendorf移液器（50μL和100μl）、一次性微量移液器使用的吸頭等。

1.1.4 實驗室環(huán)境 溫度23℃、相對濕度55%

1.2 實驗方法

1.2.1 血清分離 全血室溫靜置2～3h，吸取血清。如有少量紅細(xì)胞存在，可用離心機(jī)低速2000～3000r/m離心出去紅細(xì)胞。短時間存放可放于4℃，如需長期存放，應(yīng)放入-70℃低溫冰箱，并盡量減少反復(fù)凍融次數(shù)。

1.2.2 ELISA檢測方法 使用該試劑盒檢測時，所有組分都必須恢復(fù)到室溫18℃～25℃。使用前應(yīng)將各組分別放置于室溫至少1h。此外，洗滌液在使用前必須用超純水進(jìn)行10倍的稀釋。詳細(xì)的檢測步驟參見北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體試劑盒配套說明書。

2 結(jié)果

對檢測的數(shù)據(jù)應(yīng)用試劑盒配套的軟件分析，被檢樣本平均阻斷率為52.72%，平均陽性率（有豬瘟抗體存在）為71.47%，個體豬場陽性率最低的為7%，最高為100%。

3 分析與總結(jié)

（1）對于豬群來說，血清陽性率達(dá)到90%以上才能有效地預(yù)防豬瘟的流行，總保護(hù)率小于50%者為免疫無效或HC不穩(wěn)定地區(qū)，需加強(qiáng)免疫或采取措施消除不穩(wěn)定因素。而本研究結(jié)果顯示，這些規(guī)模豬場針對豬瘟的免疫情況均參差不齊，被檢樣本平均阻斷率為52.72%，血清總陽性合格率僅為71.5%，有的豬場甚至只有7%，這樣的免疫效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能達(dá)到完全防控豬瘟的目的，這應(yīng)引起規(guī)?；i場管理者的高度重視和警惕。

（2）針對目前這一結(jié)果和結(jié)合實際生產(chǎn)情況，分析如下

①生豬和肉品市場流通頻繁，檢疫不嚴(yán)。防疫效果不夠是HC傳播流行的重要因素。近年來集體、個體養(yǎng)豬發(fā)展迅速，使豬的自由貿(mào)易增多，大量生豬頻繁調(diào)動?？墒笻C隱性感染豬在全國范圍內(nèi)流傳。

②疫苗質(zhì)量問題。

豬瘟病毒（HCV）和牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）2種瘟病毒之間有較密切的抗原性和血清學(xué)關(guān)系，兩者同源性很高，能互相誘導(dǎo)一定程度的同源病毒抗體。用BVDV污染的HC疫苗免疫母豬后，抗體檢測結(jié)果很低。

疫苗的運(yùn)輸、保存、使用不當(dāng)，亦易影響免疫效果。有人曾在夏季進(jìn)行試驗，早晨剛稀釋的疫苗經(jīng)檢驗完全符合出廠標(biāo)準(zhǔn)，即每頭份含150RID，但到傍晚，自注苗點抽檢最后剩下1瓶稀釋的疫苗檢測，每1頭份只有15RID，在一天中效價已損失90%。

③免疫程序問題。免疫程序的關(guān)鍵是排除母源抗體干擾，確定合適的首免日齡。如在母源抗體效價尚高時接種疫苗，即會被母源抗體中和掉部分弱毒，阻礙疫苗弱毒的復(fù)制，仔豬就不能產(chǎn)生堅強(qiáng)的主動免疫力。

④其他免疫抑制疾病的影響。如PRRS、PCV等

（3）雖然本次僅對32個規(guī)?；i場豬瘟免疫情況進(jìn)行檢測，但有助于了解目前一些豬場豬群豬瘟免疫情況，從而為該病的監(jiān)測及其防控提供科學(xué)的依據(jù)。

4 防控措施

4.1 強(qiáng)化疫苗接種

由于我國豬瘟病毒弱毒株的出現(xiàn)，亞臨床感染豬和持續(xù)性感染豬來臨床上大量存在，所以當(dāng)前預(yù)防豬瘟的發(fā)生，仍需加強(qiáng)疫苗的接種工作。制定合理的免疫程序與使用新型高效豬瘟疫苗（比脾淋苗應(yīng)激性小，無BVDV，每頭份是原標(biāo)準(zhǔn)的10倍，突破母源抗體干擾，可阻斷豬瘟病毒亞臨床感染）應(yīng)停止使用政府免費(fèi)發(fā)放疫苗。

4.2 加強(qiáng)豬瘟病毒和抗體的實驗室檢測

典型豬瘟可根據(jù)主要臨床癥狀和病理變化做出診斷，實驗室診斷為輔助手段。非典型豬瘟由于癥狀不明顯和缺乏特征性癥狀和病變，通常需取決于實驗室診斷?，F(xiàn)在臨床上主要發(fā)生的非典型豬瘟，這就要求我們加強(qiáng)豬瘟病毒和抗體的實驗室檢測工作，及時淘汰引起仔豬感染和免疫耐受的傳染源，從而保證整個豬群的健康。

4.3 實施豬場凈化

對豬群尤其是種豬群實施凈化，淘汰亞臨床癥狀感染陽性豬，防止豬瘟病毒的水平傳播和垂直傳播。凈化方法：將阻斷率低于50%的種豬用豬瘟疫苗補(bǔ)充免疫一次，對這些豬6～8周后再進(jìn)行重測，抗體水平達(dá)到50%以上者保留，抗體水平?jīng)]有達(dá)到要求者淘汰，母豬第一年兩次：以后每年一次，公豬每年至少兩次。另外至少每季度對種豬群抗體狀況進(jìn)行抽樣調(diào)查，不少于60頭。后備豬對25～27周齡豬全群采樣，觀察免疫程序的效果，將抗體阻斷率低于50%的豬進(jìn)行補(bǔ)針，以保證后備豬具有良好的抗體和免疫性能，30～32周對補(bǔ)針的豬進(jìn)行抗體檢測，將抗體仍然是隱形的豬移除，不留做后備。

4.4 加強(qiáng)豬群的飼養(yǎng)管理與生物安全措施

注意欄舍的通風(fēng)和保溫工作，及時調(diào)整豬群飼料配方，滿足不同階段豬群對營養(yǎng)的需要，隨時觀察豬群的健康狀況，并采取相應(yīng)的措施。此外，還應(yīng)加強(qiáng)對欄舍、生產(chǎn)用具的消毒工作。

［1］ 趙德明，張中秋.豬病學(xué)［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2000.