劉芳，田忠平，蔡英杰，張雨，周蘊(yùn)薇*

(1.東北林業(yè)大學(xué)園林學(xué)院，黑龍江 哈爾濱150040；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)農(nóng)學(xué)院，黑龍江 大慶163319)

細(xì)葉百合低溫解除休眠過(guò)程中鱗莖細(xì)胞淀粉粒及花芽分化的變化

劉芳1,2，田忠平1，蔡英杰1，張雨1，周蘊(yùn)薇1*

(1.東北林業(yè)大學(xué)園林學(xué)院，黑龍江 哈爾濱150040；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)農(nóng)學(xué)院，黑龍江 大慶163319)

摘要：以細(xì)葉百合為試材，通過(guò)低溫(5℃)解除鱗莖休眠，研究了休眠解除過(guò)程中鱗莖細(xì)胞的淀粉粒的變化及細(xì)葉百合花芽分化的變化過(guò)程。通過(guò)石蠟切片和實(shí)體顯微結(jié)構(gòu)觀察，結(jié)果表明，低溫冷藏期間，頂芽生長(zhǎng)錐的高度和寬度逐漸增加，細(xì)葉百合花芽分化主要分為4個(gè)時(shí)期，0~48 d為小花原基分化期，60 d為外輪花被原基分化期，72 d為內(nèi)輪花被原基分化期，84 d為雄蕊和雌蕊原基分化期；鱗片及頂芽細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量隨著冷藏時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少。冷藏0~24 d內(nèi)，鱗莖細(xì)胞沒(méi)有進(jìn)行有絲分裂，冷藏36 d以后細(xì)胞分裂數(shù)量逐漸增加，冷藏84 d分裂期細(xì)胞數(shù)量增加到2.6個(gè)。

關(guān)鍵詞：細(xì)葉百合；鱗莖；休眠；淀粉粒；花芽分化

Change in starch grains and flower bud differentiation ofLiliumpumilumbulbs during breaking of dormancy under refrigerated conditions

LIU Fang1,2, TIAN Zhong-Ping1, CAI Ying-Jie1, ZHANG Yu1, ZHOU Yun-Wei1*

1.CollegeofLandscapeArchitecture,NortheastForestryUniversity,Harbin150040,China; 2.CollegeofAgriculture,HeilongjiangBayiAgriculturalUniversity,Daqing163319,China

Abstract:Changes in starch grains and flower bud differentiation of lily (Lilium pumilum) were studied during the breaking of dormancy at 5℃. Observations of paraffin sections under a microscope revealed that the height of the growth cone and the width of apical buds increased gradually during cold storage. The flower bud differentiation process in lily could be divided into four stages: the floral primordium differentiation stage from 0 to 48 days, the outer perianth primordium differentiation stage at 60 days, the inner perianth primordium differentiation stage at 72 days, and the stamen and pistil primordium differentiation stage at 84 days. The number of starch grains in apical bud cells gradually decreased as the duration of the cold temperature treatment extended. There were almost no mitotic cells in the plant tissues from 0 to 24 days of cold storage. The number of mitotic cells increased gradually after 36 days in cold storage, reaching 2.6 at 84 days of cold storage.

Key words:Lilium pumilum; bulbs; dormancy; starch grains; flower bud differentiation

百合是國(guó)內(nèi)外花卉市場(chǎng)上重要的切花之一，由于其鱗莖具有生理休眠的特性，收獲后不能立即用于切花再生產(chǎn)，必須在冷庫(kù)中貯藏3~4個(gè)月才能打破休眠。未完全解除休眠的鱗莖種植后會(huì)影響切花質(zhì)量或?qū)е旅せǔ霈F(xiàn)，從而影響了百合切花的周年生產(chǎn)和供應(yīng)，為此百合鱗莖休眠機(jī)理的研究獲得了廣泛的關(guān)注。

百合花芽分化過(guò)程的研究是百合花期調(diào)控研究的前提，目前，關(guān)于百合花芽形態(tài)發(fā)育過(guò)程的研究報(bào)道主要涉及麝香百合(Liliumlongifolorum)、新鐵炮百合(Liliumformolongi)、毛百合(Liliumdahuricum)、東方百合(Liliumorientalhybrids)及亞洲百合(Liliumasiatichybrids)栽培品種[1-5]。但是，百合鱗莖休眠期的持續(xù)時(shí)間和花芽發(fā)育的變化過(guò)程也因種系不同而有較大差異[6-8]，即便在同一種系內(nèi)也不完全相同。鱗莖的休眠程度與芽分生組織的有絲分裂活性有關(guān)[9]。已有研究表明，5℃貯藏30 d的龍牙百合試管鱗莖莖尖細(xì)胞的分裂已開(kāi)始啟動(dòng)，細(xì)胞中可見(jiàn)明顯的染色體[10]。淀粉含量的變化及休眠解除過(guò)程中細(xì)胞的分裂情況都是百合鱗莖休眠解除過(guò)程中的重要生理指標(biāo)。

細(xì)葉百合(Liliumpumilum)，花朵艷麗，是抗性極強(qiáng)的耐寒野生種百合，不僅是百合育種的良好親本，在園林綠化應(yīng)用方面也是寶貴的資源。本試驗(yàn)前期工作已經(jīng)系統(tǒng)研究了百合休眠解除過(guò)程中鱗莖細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)的變化，休眠打破時(shí)頂芽分生組織細(xì)胞中細(xì)胞器內(nèi)部結(jié)構(gòu)及數(shù)量增加，在液泡膜與質(zhì)膜邊緣形成內(nèi)質(zhì)網(wǎng)橋，細(xì)胞通過(guò)質(zhì)膜內(nèi)吞及胞間連絲進(jìn)行物質(zhì)交流[11]，低溫處理解除了特異轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯序列的阻抑作用，導(dǎo)致了莖頂細(xì)胞發(fā)生結(jié)構(gòu)上的變化[12]?？梢?jiàn)，植物細(xì)胞顯微及超微結(jié)構(gòu)的變化都與休眠進(jìn)程的發(fā)展密切相關(guān)[13-15]。前人的研究很少將鱗莖的花芽分化進(jìn)程與休眠解除進(jìn)程聯(lián)系在一起。細(xì)葉百合未見(jiàn)這方面的研究。因此，本試驗(yàn)中從5℃低溫誘導(dǎo)細(xì)葉百合鱗莖休眠解除過(guò)程中淀粉粒和花芽分化變化的研究入手，對(duì)低溫冷藏過(guò)程中百合鱗片及頂芽細(xì)胞淀粉粒數(shù)量和結(jié)構(gòu)的變化及花芽分化動(dòng)態(tài)進(jìn)行細(xì)致的觀察，以期為全面揭示細(xì)葉百合鱗莖休眠機(jī)理提供依據(jù)。本研究對(duì)補(bǔ)充細(xì)葉百合的生物學(xué)特性及調(diào)控細(xì)葉百合的花期和促成栽培都具有重要的實(shí)踐指導(dǎo)意義。

1材料與方法

1.1　試驗(yàn)材料

供試材料為東北林業(yè)大學(xué)花圃中引種的野生種細(xì)葉百合，鱗莖周徑4~6 cm。

1.2　試驗(yàn)方法與設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2011年10月中旬采收無(wú)病蟲(chóng)害的獨(dú)頭細(xì)葉百合鱗莖，用50%多菌靈可濕性粉劑800倍水溶液殺菌30 min后，充分洗凈并晾干，以蒸汽消毒的潮濕珍珠巖為貯藏介質(zhì)，置于5℃冰箱中冷藏處理。低溫處理階段，以12 d為周期，每次隨機(jī)取10個(gè)鱗莖用于莖尖形態(tài)觀察及石蠟切片、超薄切片的制作。利用實(shí)體解剖鏡觀察百合鱗莖整個(gè)花芽及中央縱切并拍照。

石蠟切片的制作： 每次取樣時(shí)將內(nèi)外層鱗片切成0.5 cm3左右，并切取頂芽分別用FAA固定液固定，采用常規(guī)石蠟切片法制片[16]，番紅固綠染色。切片厚度8 μm。Leica光學(xué)顯微鏡下觀察莖尖結(jié)構(gòu)及鱗片淀粉粒分布情況并拍照。

超薄切片的制作：每次取樣時(shí)同時(shí)切取鱗莖頂芽生長(zhǎng)錐基部組織0.5~1.0 mm3，用2.5%戊二醛固定，抽真空使材料下沉，4℃低溫固定24 h以上，用0.1 mol/L磷酸緩沖液沖洗2 h，分別用濃度為30%，50%，70%，80%，90%，100%的乙醇逐級(jí)脫水，Epon812滲透及包埋。ULTRACUTE型超薄切片機(jī)切片，醋酸雙氧鈾、檸檬酸鉛染色，H-7650透射電子顯微鏡下觀察頂芽生長(zhǎng)錐基部組織細(xì)胞淀粉粒分布情況并拍照。

淀粉粒觀察每次取3個(gè)視野，每個(gè)視野5個(gè)細(xì)胞。分裂期細(xì)胞每次取5個(gè)視野。每個(gè)視野100個(gè)細(xì)胞進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)。每個(gè)指標(biāo)測(cè)定各重復(fù)3次。

1.3　數(shù)據(jù)處理方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行計(jì)算和處理，利用DPS軟件進(jìn)行差異顯著性分析。

2結(jié)果與分析

2.1　細(xì)葉百合鱗莖冷藏過(guò)程中鱗片及頂芽細(xì)胞淀粉粒的變化

由表1，圖1，圖2，圖3，可清楚看到百合鱗莖外部鱗片、 內(nèi)部鱗片及頂芽生長(zhǎng)錐基部細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量的變化過(guò)程。剛采收的百合鱗莖，鱗片薄壁組織細(xì)胞內(nèi)含有大量的淀粉粒，充滿了整個(gè)細(xì)胞腔(圖1，0 d，圖2，0 d)。 淀粉粒均為單粒，體積大小不等，以橢圓形和長(zhǎng)卵形為主，可見(jiàn)染色較深呈黑褐色的淀粉粒的臍點(diǎn)，包裹在淀粉粒外圍的半透明膜也被染成淡紅色，休眠期外部鱗片細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量平均為13.2個(gè)，內(nèi)部鱗片細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量平均為12.8個(gè)，外層鱗片淀粉粒數(shù)量比內(nèi)層鱗片數(shù)量多一些。頂芽生長(zhǎng)錐細(xì)胞內(nèi)淀粉粒含量較高，平均每個(gè)細(xì)胞內(nèi)可達(dá)28.5個(gè)，淀粉粒多為圓球形，有的散布在細(xì)胞腔中，有的存在于質(zhì)體中(圖3，0 d)。

圖1　冷藏過(guò)程中細(xì)葉百合鱗莖外層鱗片淀粉粒的變化Fig.1　The changes of starch grain in outer scales of L. pumilum during cold storage

圖2　冷藏過(guò)程中細(xì)葉百合鱗莖內(nèi)層鱗片淀粉粒的變化Fig.2　The changes of starch grain in inner scales of L. pumilum during cold storage

圖3　冷藏過(guò)程中細(xì)葉百合鱗莖頂芽淀粉粒的變化Fig.3　The changes of starch grain in apical buds of L. pumilum during cold storage

從表1可以看出，在低溫解除休眠過(guò)程中，百合鱗莖外部及內(nèi)部鱗片細(xì)胞的淀粉粒數(shù)量隨著冷藏時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少，說(shuō)明鱗莖需要不斷消耗貯藏在細(xì)胞中的淀粉。內(nèi)外層鱗片內(nèi)淀粉粒變化趨勢(shì)相似，但外層鱗片比內(nèi)層鱗片細(xì)胞內(nèi)淀粉粒的數(shù)量變化幅度要大。冷藏84 d時(shí)內(nèi)部鱗片淀粉粒的數(shù)量只有8.7個(gè)，而外部鱗片淀粉粒的數(shù)量減少到8.2個(gè)。冷藏過(guò)程中有些淀粉粒的輪廓變得模糊，可能是因?yàn)樵谫A藏過(guò)程中有些淀粉降解導(dǎo)致的。頂芽生長(zhǎng)錐基部細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量在冷藏過(guò)程中整體上呈下降的變化趨勢(shì)，在鱗莖冷藏60~84 d內(nèi)數(shù)量下降幅度較大，冷藏84 d時(shí)淀粉粒數(shù)量較采收時(shí)明顯減少。冷藏過(guò)程中，淀粉粒主要分布在細(xì)胞核周圍。采收時(shí)內(nèi)外層鱗片淀粉粒數(shù)量與冷藏60~84 d內(nèi)的數(shù)量存在顯著差異。頂芽采收時(shí)淀粉粒數(shù)量只與冷藏84 d的數(shù)量差異顯著。

表1　冷藏過(guò)程中細(xì)葉百合鱗莖淀粉粒數(shù)量的變化

注：不同小寫(xiě)字母表示在P<0.05差異顯著。下同。

Note: Different small letters mean significant difference atP<0.05.The same below.

2.2　細(xì)葉百合鱗莖冷藏過(guò)程中花芽分化特征及細(xì)胞分裂動(dòng)態(tài)變化

細(xì)葉百合在夏季開(kāi)花，花期較其他品種要早，在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，細(xì)葉百合鱗莖在9月末至10月初開(kāi)始進(jìn)行花芽分化，10月中旬鱗莖采收進(jìn)行冷藏時(shí)，花芽不透明(圖4a)，生長(zhǎng)錐兩側(cè)有許多幼葉，休眠鱗莖的花芽生長(zhǎng)錐體積增大，已經(jīng)進(jìn)入小花原基分化期(圖4def)，生長(zhǎng)錐已經(jīng)具有一定的高度和寬度。此時(shí)，頂芽基部組織兩側(cè)可見(jiàn)著色較深的豐富的維管束，在花序軸上可見(jiàn)2~3個(gè)圓球狀突起，即為小花原基。本試驗(yàn)中細(xì)葉百合為3~5年生植株，多為2~3朵花。此時(shí)期頂芽分生區(qū)細(xì)胞觀察不到有絲分裂現(xiàn)象(表2)。

百合鱗莖冷藏12~48 d內(nèi)，頂芽生長(zhǎng)錐的高度和寬度略有增加，差異不明顯。此時(shí)期花芽沒(méi)有明顯分化，花芽主要處于小花原基分化期，鱗莖冷藏36 d時(shí)可觀察到分裂期細(xì)胞，但數(shù)量很少，隨冷藏時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞分裂數(shù)量增加，冷藏48 d時(shí)，花芽較冷藏初期明顯變得水潤(rùn)(圖4b)，生長(zhǎng)錐兩側(cè)幼葉增多，此時(shí)分裂期細(xì)胞已經(jīng)增加到1.2個(gè)。分裂期細(xì)胞數(shù)量較36 d時(shí)沒(méi)有顯著變化(表2)。

細(xì)葉百合為兩輪花被，外輪花被3片，內(nèi)輪花被3片。鱗莖冷藏至60 d時(shí)，隨著葉片的伸長(zhǎng)，頂芽生長(zhǎng)錐進(jìn)入小花原基分化期后進(jìn)一步生長(zhǎng)發(fā)育，生長(zhǎng)錐更為突起膨大，繼續(xù)增高，生長(zhǎng)錐的高度和寬度較冷藏0~48 d內(nèi)沒(méi)有顯著地變化，冷藏0~60 d內(nèi)，各取樣時(shí)期之間生長(zhǎng)錐的高度與寬度的變化也沒(méi)有顯著差異，生長(zhǎng)錐中央及下部邊緣隆起，兩側(cè)出現(xiàn)3個(gè)月牙形小凸起，形成的凸起即為外輪花被原基(圖4g)，此時(shí)已能清晰看到處于分裂后期的細(xì)胞(圖5，60 d)。大部分細(xì)胞仍處于分裂間期。分裂期細(xì)胞數(shù)量較冷藏36 d時(shí)變化顯著(表2)。

鱗莖冷藏至72 d時(shí)(圖4h，i)，頂芽生長(zhǎng)錐的高度和寬度都有較大幅度地增加，花被原基進(jìn)一步生長(zhǎng)，在生長(zhǎng)錐周圍基部，外輪花被內(nèi)側(cè)的兩個(gè)花被相鄰處，出現(xiàn)3個(gè)三角形小突起，即為內(nèi)輪花被原基，內(nèi)輪花被與外輪花被形狀相似，外輪花被較內(nèi)輪花被稍寬。此時(shí)，細(xì)胞有絲分裂數(shù)量增加 (圖5，72 d)。分裂期細(xì)胞數(shù)量較冷藏36 d時(shí)變化顯著，與其他各時(shí)期間沒(méi)有顯著地變化(表2)。

表2　細(xì)葉百合鱗莖冷藏過(guò)程中花芽分化過(guò)程及分裂期細(xì)胞數(shù)量的變化

圖4　細(xì)葉百合鱗莖冷藏過(guò)程中花芽分化過(guò)程Fig.4　The process of flower bud differentiation of L. pumilum during cold storage　a：冷藏0 d；b：冷藏48 d；c：冷藏84 d； d~f：小花原基分化期；g：外輪花被原基分化期；h~i：內(nèi)輪花被原基分化期；j~k：雌雄蕊原基分化期；LP：葉原基； SFP：小花原基；OPP：外輪花被原基；IPP：內(nèi)輪花被原基；SP：雄蕊原基；PP：雌蕊原基。a: Refrigerated 0 days；b: Refrigerated 48 days；c: Refrigerated 84 days；d-f: Floret primordium differentiation stage；g: Outer perianth primordium differentiation stage; h-i：Inner perianth primordium differentiation stage； j-k：Differentiation phase of stamens primordium and pistil primordium; LP：Leaf primordium；SFP：Small floral primordium；OPP：Outer perianth primordium；IPP：Inner perianth primordium；SP：Stamen primordium；PP：Pistil primordium.

圖5　細(xì)葉百合鱗莖冷藏過(guò)程中頂芽細(xì)胞有絲分裂的變化Fig.5　The changes of mitosis in apical buds of L. pumilum during cold storage　a. 分裂前期；b. 分裂中期；c.分裂后期； d.分裂末期。a. prophase；b. metaphase；c.anaphase； d.telophase.

百合的雄蕊有6枚，鱗莖冷藏至84 d時(shí)，由于鱗莖細(xì)胞內(nèi)新陳代謝活動(dòng)比較活躍，花芽變得更加水潤(rùn)(圖4c)，生長(zhǎng)錐兩側(cè)幼葉繼續(xù)增多、伸長(zhǎng)。頂芽生長(zhǎng)錐的高度和寬度迅速增加，0~60 d各時(shí)期與冷藏72和84 d的生長(zhǎng)錐的高度與寬度均在0.05水平上存在顯著差異?；ū辉纬珊螅ū粌?nèi)側(cè)出現(xiàn)6個(gè)小突起，形成雄蕊原基，石蠟切片縱切圖(圖4j) 和在實(shí)體顯微鏡下觀察(圖4k)中，花被原基中央還沒(méi)有逐漸凹陷。在部分分化芽中，可見(jiàn)雄蕊原基內(nèi)側(cè)的中央生長(zhǎng)點(diǎn)形成一個(gè)比較大的突起，即為雌蕊原基(圖4j，k)。此時(shí)， 頂芽?jī)?nèi)細(xì)胞有絲分裂數(shù)量大大增加，分裂期細(xì)胞數(shù)量較冷藏36和48 d時(shí)變化顯著(表2)。在切片中可以明顯看見(jiàn)處于分裂前期(圖5a)、中期(圖5b)、后期(圖5c)、末期(圖5d)的細(xì)胞。

3討論

3.1　鱗莖休眠解除過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)淀粉粒的變化

百合鱗莖為貯藏器官，淀粉在鱗莖休眠過(guò)程中為重要的貯藏物質(zhì)，為鱗莖休眠解除過(guò)程中的代謝活動(dòng)提供能源。孫紅梅等[17]研究表明，蘭州百合低溫解除休眠過(guò)程中，鱗莖的淀粉含量逐漸減少，貯藏后34 d頂芽迅速發(fā)育，此時(shí)是物質(zhì)變化最為活躍的時(shí)期，淀粉明顯降解，34~67 d淀粉含量變化幅度不大，本試驗(yàn)中鱗片淀粉粒的數(shù)量隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，這一結(jié)果與管畢財(cái)?shù)萚18]研究龍牙百合(Liliumbrowniivar.viridulum)低溫貯藏過(guò)程中鱗莖的淀粉含量變化結(jié)果是相符的。本試驗(yàn)中觀察到的淀粉粒的數(shù)量變化與寧云芬等[19]的研究也是一致的。張?jiān)碌萚20]及柳文慧[21]指出蘭州百合鱗片大小維管束中心細(xì)胞淀粉粒數(shù)量變化與大維管束周圍細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量的變化趨勢(shì)基本相同。說(shuō)明鱗片不同部位細(xì)胞內(nèi)淀粉的變化是類似的。夏宜平等[22]在東方百合“索邦”栽種期取鱗莖的外層和內(nèi)層鱗片，利用掃描電子顯微鏡觀察鱗片中細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)，可清楚地看到淀粉粒呈稍不規(guī)則的薄晶體狀的近圓形或圓柱體形態(tài)，其內(nèi)部沒(méi)有任何結(jié)構(gòu)。栽種期的內(nèi)外層鱗片中存在明顯的淀粉顆粒，多集中在細(xì)胞壁附近，內(nèi)層鱗片的淀粉顆粒稍多于外層鱗片，這些結(jié)果與本試驗(yàn)的研究結(jié)果也是一致的。

目前，有關(guān)百合鱗片淀粉粒亞顯微結(jié)構(gòu)的變化已有研究，但百合頂芽細(xì)胞內(nèi)淀粉粒變化的研究尚少。劉成運(yùn)和彭隆金[23]對(duì)麗江百合(Liliumlijiangense)鱗莖發(fā)育過(guò)程中貯藏物質(zhì)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察中指出，鱗片細(xì)胞內(nèi)含有2種貯藏顆粒，一種體積較大，橢圓形，另一種體積略小呈圓球形。較大的顆粒內(nèi)含有淀粉物質(zhì)，較小的顆粒內(nèi)含有蛋白質(zhì)、脂肪、多糖和少量核糖核酸。在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在冷藏過(guò)程中生長(zhǎng)錐頂部不斷增高，體積不斷增大，芽不斷伸長(zhǎng)。試驗(yàn)中觀察到頂部細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量很少，基部細(xì)胞內(nèi)淀粉粒數(shù)量很多，芽伸長(zhǎng)生長(zhǎng)過(guò)程中需要增大細(xì)胞體積和數(shù)量，在這個(gè)生長(zhǎng)過(guò)程中需要貯藏物質(zhì)代謝提供能量，基部細(xì)胞豐富的淀粉?？赡転轫敳考?xì)胞提供了能源，但在冷藏36~48 d內(nèi)頂芽基部淀粉粒數(shù)量又有所增加，在60 d后又逐漸減少，頂芽生長(zhǎng)錐基部細(xì)胞內(nèi)的淀粉粒主要是圓球形，這種圓球形的貯藏顆粒內(nèi)可能還含有除了淀粉以外的其他物質(zhì)，在鱗莖冷藏的不同時(shí)期不同的貯藏物質(zhì)可能參與了代謝。鱗莖整個(gè)貯藏過(guò)程中，頂芽分生區(qū)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育所需的能源物質(zhì)在冷藏初期可能更直接來(lái)源于芽的下部組織，在冷藏后期還需要貯藏大量糖類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的鱗片的供應(yīng)。

3.2　鱗莖冷藏期花芽分化與休眠解除的關(guān)系

已有研究表明百合由于種類、品種的不同及種植地的氣候條件有所差異，其花芽分化的時(shí)間及進(jìn)程也不同。根據(jù)前人的研究可按百合花芽分化時(shí)間分為4種類型：第1種，花芽分化在夏季末開(kāi)始，秋季完成。如毛百合[3]；第2種，花芽分化在晚秋開(kāi)始，至次年春天出土前完成，如日本百合；第3種，春季剛發(fā)芽時(shí)花芽開(kāi)始分化，如條葉百合、輪葉百合[24]；第4種，在春季發(fā)芽后約一個(gè)月開(kāi)始出現(xiàn)花芽分化，如麝香百合[1]。這4種花芽分化類型在亞洲百合中均有存在，細(xì)葉百合屬于亞洲百合野生種類。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)其花芽分化開(kāi)始于秋季，在次年春天完成。在哈爾濱栽種的能露地越冬的百合中，毛百合的花芽分化較早，在5月中旬便能開(kāi)花，細(xì)葉百合花芽分化較毛百合晚，其花期也稍晚，花期主要集中在5月末至6月初，其次，是亞洲百合栽培品種，花期主要集中在6月中下旬，可見(jiàn)，百合的花芽分化進(jìn)程與其花期是一致的。

在試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，百合鱗莖的規(guī)格及鱗莖的貯藏溫度不同，花芽分化也有所差異，5℃冷藏的鱗莖周徑4~5 cm的百合花朵數(shù)多為2~3朵，而在0~4℃冷藏的8~10 cm的鱗莖花朵數(shù)量可達(dá)4~6朵，8~10 cm的鱗莖休眠期采收時(shí)基本進(jìn)入了花被原基分化期。在鱗莖冷藏過(guò)程中不同花朵的分化時(shí)間上差距較大。周徑4~5 cm的百合鱗莖在5℃冷藏84 d時(shí)鱗莖已經(jīng)出芽，而此時(shí)花芽則處于雌雄蕊原基分化初期，雄蕊雌蕊分化程度較8~10 cm的鱗莖發(fā)芽時(shí)稍低，0~4℃冷藏的8~10 cm的鱗莖98 d時(shí)才能發(fā)芽[25]。2種鱗莖由于其貯藏溫度不同，其休眠解除的時(shí)間不同，而且本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，同一規(guī)格的鱗莖，在5℃冷藏條件下相比4℃貯藏鱗莖休眠解除時(shí)間稍短，花芽發(fā)育程度沒(méi)有明顯變化。不同規(guī)格鱗莖花芽分化進(jìn)程上的差異是和其自身的發(fā)育程度相關(guān)的。鱗莖在5℃貯藏時(shí)較0~4℃冷藏的8~10 cm基質(zhì)的含水量稍高，休眠解除進(jìn)程相對(duì)較短，因此，含水量也是鱗莖休眠解除的一個(gè)關(guān)鍵的因素。百合有48條染色體，且有絲分裂過(guò)程中分裂間期時(shí)間較長(zhǎng)，所以，進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞大多處于分裂間期，整個(gè)冷藏期，間期細(xì)胞染色體變化不明顯。鱗莖冷藏過(guò)程中，0~48 d內(nèi)，花芽分化沒(méi)有明顯變化，冷藏初期細(xì)胞沒(méi)有分裂現(xiàn)象，冷藏過(guò)程中，分裂期細(xì)胞數(shù)量極少。48 d后，花芽分化加快，48~84 d內(nèi)已經(jīng)進(jìn)行了外輪花被原基、內(nèi)輪花被原基及雌雄蕊原基的分化，而且細(xì)胞分裂數(shù)量明顯增加。說(shuō)明鱗莖休眠的完全解除是在48 d后開(kāi)始的。因此，花芽分化的進(jìn)程與鱗莖休眠解除的過(guò)程是密切相關(guān)的。

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通訊作者*Corresponding author. E-mail：dlzhyw@126.com

作者簡(jiǎn)介：劉芳(1980-)，女，黑龍江雙城人，實(shí)驗(yàn)師，碩士。E-mail：byndliufang@163.com

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金(31470698)資助。

收稿日期：2014-10-20；改回日期：2014-11-24

DOI：10.11686/cyxb2014428http://cyxb.lzu.edu.cn