李釗 李維聰

中藥天麻中天麻素的含量測定

李釗 李維聰

目的探討分析不同產(chǎn)地中藥天麻的天麻素含量。方法從合法的藥材公司購買標(biāo)示產(chǎn)地為四川江油、云南昭通、甘肅康縣、貴州大方的天麻各一批次若干,在色譜條件：YMC-Triart C18 色譜柱(4.6mm×250mm,5 μm)；檢測波長：220 nm；柱溫: 30℃；流動(dòng)相: 0.05%磷酸水溶液(B)-甲醇(A)梯度洗脫,0～10min,B(98%);10～20min,98%B→95%B；20～60min ,95%B→60%B；60～85min,60%B維持；流速為 0.8ml/min；進(jìn)樣體積：20 μl；測定其中天麻素含量。結(jié)果云南昭通平均天麻素含量為0.51%,貴州大方為0.42%,四川江油為0.35%,甘肅康縣為0.27%。結(jié)論云南昭通所含天麻素含量較高。

中藥；天麻；天麻素；含量

天麻為蘭科植物天麻干燥塊莖,是一種名貴中藥材,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,又稱赤箭、離母、定風(fēng)草根、木浦、明天麻、冬麻、春麻等;根狀莖肥厚,無綠葉,在自然界中通常以塊莖或者是種子繁殖、生長,是多年生草本類植物；性甘味平,歸肝經(jīng)。具有息風(fēng)止痙、平抑肝陽、祛風(fēng)通絡(luò)功效,用于小兒驚風(fēng)、 癲癇抽搐、 破傷風(fēng)、 頭痛眩暈、 手足不遂、 肢體麻木,風(fēng)濕痹痛等神經(jīng)系統(tǒng)疾?。?］。為進(jìn)一步探討天麻的質(zhì)量,本文于合法的藥材公司購買標(biāo)示產(chǎn)地為四川江油、云南昭通、甘肅康縣、貴州大方的天麻各一批次若干,分別對天麻素含量進(jìn)行測定。

1 儀器與試藥

WL-100高速粉碎機(jī),R-1001N旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,WB-200水浴箱,1/100000天平,島津LC-20A 高效液相,甲醇(色譜級),乙腈(色譜級),超純水機(jī)(自制),磷酸(分析級)；天麻素對照品(成都曼斯特生物科技有限公司,純度＞99.5%)天麻藥材選擇云南昭通,四川江油,甘肅康縣,貴州大方幾個(gè)主要天麻產(chǎn)區(qū)樣品,經(jīng)副主任中藥師鑒定為蘭科植物天麻。

2 方法

2.1 色譜條件 色譜柱：YMC-Triart C18 色譜柱(4.6mm× 250mm,5 μm)；檢測波長：220 nm；柱溫為 30℃；流動(dòng)相：0.05%磷酸水溶液(B)-甲醇(A)梯度洗脫,0～10min,B(98%)；10～20min,98%B→95%B；20～60min,95%B→60%B；60～85min,60%B維持；流速為 0.8ml/min；進(jìn)樣體積：20 μl。

2.2 供試品及樣品制備

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品 精密稱取天麻素標(biāo)準(zhǔn)品適量于10ml容量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,得到濃度為51.2 μg/L天麻素對照品。

2.2.2 供試品制備 精密稱取干燥天麻樣品,粉末(過三號(hào)篩)3 g,加入50ml 60%甲醇,50℃超聲提取 60min,補(bǔ)足缺失的重量,過濾,取續(xù)濾液 10ml 濃縮至近干,加流動(dòng)相溶解后定容至 25ml容量瓶中,搖勻,過0.45 μm 微孔濾膜,即得。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取天麻素對照品溶液,分別稀釋1、2、 4、 8、 10后,參照“2.1項(xiàng)”檢測條件進(jìn)行測定,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性擬合,得到天麻素的線性方程是：y=235.5A1-254.3(r=0.9995),線性范圍為 5.12～51.2 μg/L。

2.4 精密度檢測 取對照品溶液,對照溶液進(jìn)樣量10 μl,連續(xù)進(jìn)樣6次,測定峰面積,測定吸光RSD為1.34%,符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,可見儀器精密度良好。

2.5 重復(fù)性 精密稱取同批號(hào)粉碎過篩(40目)的天麻樣品6份,參考“2.2.2項(xiàng)”處理樣品后,制作供試品共6份,按照“2.1項(xiàng)”檢測條件進(jìn)行檢測,結(jié)果對應(yīng)RSD為1.47%(＜2.00%),符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,因此具有良好的重復(fù)性。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取樣品溶液與對照品溶液,分別在0、2、4、8、16、24 h密量取20 μl注入分析儀器,進(jìn)樣測定,兩組溶液峰面積的RSD為1.3%(＜2.0%),符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。結(jié)果表明對照品和供試品溶液至少在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.7 回收率實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取6份樣品,粉碎過篩(40目),0.5 g/份,然后加相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液,進(jìn)行定容。按照“2.1項(xiàng)”檢測條件進(jìn)行檢測,得到回收率。測定結(jié)果表明：平均回收率分別是102.13%,RSD分別是1.07%。

2.8 樣品中天麻素測定 參照“2.2.2項(xiàng)”上供試品制作方法及“2.1項(xiàng)”相關(guān)檢測條件,對各批次樣品中 天麻素含量進(jìn)行測定。

3 結(jié)果

含云南昭通平均天麻素含量為0.51%,四川江油平均天麻素含量為0.35%,貴州大方為0.42%,甘肅康縣為0.27%。

4 討論

天麻早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有記載,將其稱之為“赤箭”,至明代,李時(shí)珍的《本草綱目》則集以往之大成,對天麻等作了系統(tǒng)概述［2］。天麻在自然界的形態(tài)特征具體表現(xiàn)在植株高30～100cm,此類植物根狀莖肥厚,塊莖狀橢圓形至近啞鈴形,長8～12cm,直徑3～7cm,具有較密的節(jié),一般生長在疏林下,林中空地,灌叢邊緣或海拔400～3200 m位置［3］,分布于我國各個(gè)領(lǐng)域。目前以云南昭通天麻中天麻素含量最高,質(zhì)量更優(yōu)。

本文以天麻有效成分天麻素為例對不同來源的天麻含量進(jìn)行測定結(jié)果顯示,云南昭通天麻中天麻素平均含量0.51%,與上述結(jié)論基本相符。臨床使用天麻時(shí),必須要保證藥材符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并結(jié)合患者的體質(zhì)應(yīng)用,確保用藥的合理性和安全性,避免藥物風(fēng)險(xiǎn)事件的發(fā)生。

［1］杜慶波.天麻藥理活性與臨床應(yīng)用研究新進(jìn)展.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,34(16):2434-2435.

［2］龔其海,石京山,楊丹莉,等.天麻素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用及其機(jī)制.中國新藥與臨床雜志,2011(3):176-179.

［3］李穎,毛瑞陽,杜曉紅.天麻素對同型半胱氨酸誘導(dǎo)的細(xì)胞因子表達(dá)的影響.中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2014,32(2):393-395.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.09.217

2016-02-29］

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