劉美琳，張梅

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藏藥波棱瓜子的現(xiàn)代研究進(jìn)展

劉美琳，張梅

［摘要］波棱瓜子是治療肝病的傳統(tǒng)藏藥材。本文綜述了波棱瓜子近年來(lái)的研究進(jìn)展，包括化學(xué)成分、藥理作用、工藝研究等方面。旨在為探索波棱瓜子中新的化學(xué)成分和深入研究其藥理作用，促進(jìn)藏藥資源的合理利用等方面提供一定的參考。

［關(guān)鍵詞］波棱瓜子；化學(xué)成分；藥理作用；工藝研究

［作者單位］成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中藥資源系統(tǒng)研究與開(kāi)發(fā)利用省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

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波棱瓜子為葫蘆科波棱瓜屬植物波棱瓜Herpetospermum caudigerum Wall.（H. pedunculosum （Ser.） Baill）的干燥成熟種子，是一種常用藏藥。其藥用歷史悠久，始載于公元前1700多年，藏醫(yī)藥名著《月王藥診》、《晶珠本草》、《四部醫(yī)典》等對(duì)該藥均有記載。而《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》（藏藥）卷及現(xiàn)代醫(yī)藥著作《全國(guó)中草藥匯編》、《中華本草》等記載該藥功效為“清腑熱，膽熱，治赤巴入臟腑，肝、膽熱癥（肝炎，膽囊炎），消化不良”［1～3］。

1　化學(xué)成分

波棱瓜子中主要含脂肪酸類、木脂素類成分及一些苯呋喃類、香豆素、甾醇、氨基酸、油脂及微量元素等多種物質(zhì)。

1.1 脂肪油類

波棱瓜子中富含大量脂肪油，其含量約為22.3%［4］。張梅、劉興利等［5，6］采用GC-MS法對(duì)其脂肪油成分進(jìn)行分析得知其主要含各類不飽和脂肪酸，包括亞麻酸、亞油酸十六院酸、9-十八碳烯酸、硬脂酸、3-十二烯-1-炔、順-3-丁基-4-乙烯基-環(huán)戊烯、二十四碳燒六稀，主要成分是不飽和脂肪酸十八烯酸，含量高達(dá)68.91%，而亞麻酸為12.108%，亞油酸為22.190%。王洪倫等［7］采用超臨界CO2萃取波棱瓜子的種子油，發(fā)現(xiàn)含有棕櫚酸、亞油酸、油酸等大量不飽和脂肪酸。薄海波等［4］采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)從波棱瓜子脂肪油中分離并鑒定出17種組分，主要包括直鏈飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸、環(huán)氧乙烷基脂肪酸等。研究結(jié)果指出波棱瓜子油含不飽和脂肪酸近60%，并首次發(fā)現(xiàn)青海波棱瓜子油脂中存在不常見(jiàn)的環(huán)氧乙烷基脂肪酸（2.70%）。

由此可見(jiàn)，波棱瓜子脂肪油中主要含有各類不飽和脂肪酸，其中大多是十二碳以上的長(zhǎng)鏈脂肪酸。據(jù)報(bào)道，不飽和脂肪酸具有抗衰老、防癌抗癌、防止動(dòng)脈硬化、降低血栓形成及血小板的凝聚等多種生理功能，因此波棱瓜子脂肪油具有一定的開(kāi)發(fā)利用前景。

1.2 木脂素類

國(guó)外KaouadjiMourad等人在1978-1987年陸續(xù)從波棱瓜子中分離出木脂素類二聚物（Herpetol）、三聚物（Herpetrione）、五聚物（Herpepentol）、四聚物（Herpetetradione，Herpetrone）［8～14］以及呋喃類成分herpeta1、herpetotriol。國(guó)內(nèi)袁海龍等從波棱瓜子乙醇提取液分離得到波棱素，從總木脂素中分離得到波棱甲素［15～16］。張梅等［17～21］從波棱瓜子中分離出波棱芴酮（herpetfluorenone）、波棱酮（Herpetone）、波棱酚（herpetenol）。楊帆等［22］從中分離得到二氫苯并呋喃類木脂素herpepropenal。徐冰、周雪杉等［23～24］從中確定了木脂素類化合物Herpetosin B、 BL-6和BL-13以及（-）-tanegool-7'-methyl ether。

1.3 香豆素類

從波棱瓜子乙酸乙酯提取物分離得到香豆素類化合物包括波棱內(nèi)酯herpetolide A、波棱內(nèi)酯herpetolide B、Herpetospin C；香豆素苷類化合物Herpetospin D［19～20，23］、herpetosperin A、herpetosperin B［25］等。

1.4 氨基酸及微量元素

李玉林等［26］研究發(fā)現(xiàn)波棱瓜子中富含全部的十八種氨基酸，其中人體必需的八種氨基酸占總量的三分之一。楊黎彬等［27］采用原子吸收光譜法分析得知波棱瓜子中含人體必需微量元素Fe、Mn、 Cu、Zn、 Se、 Co、 Cr、Ni等，特別是Cu、 Se、 Fe、Zn含量較高。而肝臟疾病與Cu、 Se、 Fe、 Zn等元素有密切關(guān)系，研究結(jié)果提示波棱瓜子治療肝臟疾病的顯著療效可能與這些微量元素有關(guān)系。

1.5 其他

從波棱瓜子乙酸乙酯提取物中還分得豆甾醇、尿嘧啶、甾醇葡萄糖苷［19～20］以及二萜類化合物HerpetosinA 、2，4-二經(jīng)基-嘧啶、Arbutin， 1-acetate、Dodecanoic acid、10-Eicosenoic acid［23，28］、β-谷甾醇以及一個(gè)波棱內(nèi)酯G［21］。

2　藥理研究

近年來(lái)，關(guān)于波棱瓜子的藥理作用研究較多，主要包括抗肝損傷、抗氧化、抗疲勞、耐缺氧、抗免疫等作用。

2.1 抗肝損傷

波棱素對(duì)CCl4所致小鼠GPT、GOT的升高有較強(qiáng)的抑制作用［16］；波棱酮對(duì)二甲基亞礬（DMSO）引起的肝細(xì)胞損傷有保護(hù)作用［29］；波棱甲素制成的納米混懸液（HNS）對(duì)D-半乳糖胺（D-GalN）誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷具有明顯的保護(hù)作用［30］；波棱內(nèi)酯G和波棱芴酮對(duì)肝損傷的體外抑制作用效果顯著［21］。由波棱瓜子木脂素類成分制備的制劑肝能滴丸對(duì)CCl4所致小鼠試驗(yàn)性肝損傷有明顯的保護(hù)作用［31］；對(duì)環(huán)磷酰胺所致小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物水平升高具有一定的改善作用［32］；對(duì)慢性乙型肝炎患者有較好的近期療效［33］。

波棱瓜子氯仿提取液和水提取液可明顯抑制CCl4和TAA引起的急性肝損傷小鼠血清中ALT、AST活性的升高及TG水平的升高，增加肝糖原含量［29］；氯仿提取物還能顯著促進(jìn)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，并顯著提高小鼠胸腺與脾臟重量［34］；氯仿提取物亦具有較強(qiáng)的抗氧化和自由基清除活性［40］；波棱瓜子乙酸乙酯提取物對(duì)CCl4和TAA所致小鼠急性肝損傷具有明顯的保護(hù)作用［35～37］；波棱瓜子乙酸乙酯提取物及脂肪油對(duì)BCG+LPS 誘導(dǎo)的小鼠免疫性肝損傷都具有明顯的保護(hù)作用，其保肝的機(jī)制可能與增強(qiáng)抗氧化活性有關(guān)［38］。波棱瓜子總木脂素提取物對(duì) ConA致小鼠免疫性肝損傷有一定的保護(hù)作用［39］。

2.2 抗氧化、抗疲勞、耐缺氧作用

體外CCl4損傷肝臟引起大鼠脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)以及體內(nèi)DPPH自由基清除法保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)表明，波棱瓜子氯仿及水提取物均具有較強(qiáng)的抗氧化活性和自由基清除活性［40］。小鼠疲勞游泳時(shí)間及耐缺氧存活時(shí)間實(shí)驗(yàn)表明，波棱瓜子乙醇提取物能顯著提高小鼠抗疲勞耐缺氧能力［41］。體外的抗氧化實(shí)驗(yàn)（采用DPPH法）研究發(fā)現(xiàn)，波棱芴酮具有比較好的抗氧化活性［21］。

2.3 抗HBV作用

波棱酮和波棱素呈現(xiàn)劑量和時(shí)間依賴性顯著地抑制乙型肝炎病毒 DNA 復(fù)制以及核心抗原和表面抗原的表達(dá)［42］；波棱素能明顯抑制HBsAg和HBeAg的復(fù)制和表達(dá)［16］；肝能滴丸能明顯抑制鴨乙肝病毒的復(fù)制，能有效治療鴨乙肝病毒感染［43］。

2.4 抗腫瘤作用

分別以人肝癌細(xì)胞株BEL-7402、 BEL-7404及人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT為研究對(duì)象，用MTT法檢測(cè)得知波棱瓜子乙醇提取物和波棱素對(duì)不同癌細(xì)胞體外生長(zhǎng)都具有明顯的抑制作用［16，44］；波棱內(nèi)酯I與波棱內(nèi)酯II對(duì)人白血病細(xì)胞株HL-60細(xì)胞的生長(zhǎng)有一定程度的抑制作用［36］。

3　質(zhì)量控制

對(duì)波棱瓜子藥材的質(zhì)量控制主要涉及指紋圖譜研究及各類成分的含量測(cè)定。

陳朝霞等［45～46］采用RP-HPLC測(cè)定了波棱瓜子藥材中波棱酮及波棱內(nèi)酯A的含量，結(jié)果表明波棱酮的平均含量為0.14 mg.g-1，波棱內(nèi)酯A的含量為0.0038%。方清茂等［47］采用RP-HPLC測(cè)定了不同產(chǎn)地色吉美朵（波棱瓜子）中木脂素類成分波棱酮的含量，其平均含量為0.32%。錢毓洲等［48］采用超高效液相色譜法測(cè)得10批波棱瓜子中波棱甲素 Herpetrione的平均含量為3.723 mg.g-1。杭偉等［49］首次采用高速逆流色譜法對(duì)波棱瓜子乙酸乙酯提取物進(jìn)行分離純化得到了香豆素類化合物herpetolide A、木脂素類化合物Herpetrione，純度均高于95%。叢龍波等［50］通過(guò)RP-HPLC同時(shí)測(cè)定了15個(gè)批次藏藥波棱瓜子中7個(gè)活性木脂素成分的含量，研究得出不同產(chǎn)地波棱瓜子藥材中木脂素含量相差很大，因此可能會(huì)使臨床療效產(chǎn)生差異。袁海龍等［51］采用正相高效液相色譜聯(lián)合二極管陣列紫外檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定波棱瓜子中4個(gè)木脂素類化合物含量，研究得到在280nm處，四個(gè)木脂素的吸收達(dá)到最大值。

近年來(lái)一測(cè)多評(píng)法已廣泛應(yīng)用于中藥有效成分的多指標(biāo)含量測(cè)定上。王佩龍等［52］以herpetolide A為內(nèi)參物，建立其與herpetotriol的相對(duì)校正因子，通過(guò)相對(duì)校正因子建立了 herpetotriol的含量測(cè)定方法，利用該方法，使用herpetolide A作為標(biāo)準(zhǔn)品，可以用時(shí)測(cè)定herpetolide A和herpetotriol的含量。

4　工藝研究

袁海龍等［53～57］對(duì)肝能滴丸的制備工藝進(jìn)行了研究。對(duì)基質(zhì)、冷卻劑及滴制條件進(jìn)行篩選，確定了以PEG4000:PEG6000（2:5）為基質(zhì)，藥液溫度90℃，滴頭內(nèi)徑3.0mm，滴距11.0 cm，滴速40滴/min，二甲基硅油為滴制時(shí)的冷卻劑的肝能滴丸制備工藝。并采用具有量化指標(biāo)的丸重變異系數(shù)、崩解時(shí)限及外觀質(zhì)量等3項(xiàng)指標(biāo)按加權(quán)系數(shù)評(píng)分法對(duì)肝能滴丸的成型工藝進(jìn)行綜合評(píng)分，評(píng)定工藝的優(yōu)劣。為了增加波棱甲素溶解度并提高其肝臟靶向性，可將其與水溶性載體結(jié)合來(lái)提高其生物利用度。研究采用高壓均質(zhì)法制備波棱甲素以及其納米混懸劑，采用Box-Behnken 設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化 HPE-NS-ODF 的處方納米混懸劑（nanosuspension，NS）。張?chǎng)蔚龋?8］首次采用薄膜分散法制備了波棱素脂質(zhì)體并優(yōu)化了其處方工藝，增加了波棱素的溶解度并提高了其肝臟靶向性。

5　結(jié)語(yǔ)

綜上所述，近年來(lái)對(duì)于藏藥波棱瓜子的化學(xué)、藥理、工藝的研究已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展。其化學(xué)成分研究較為透徹，主要集中在木脂素、香豆素類以及脂肪油等，但其它成分研究較少，尤其生物堿類成分未見(jiàn)報(bào)道。藥理方面，對(duì)其木脂素類成分的抗肝損傷活性研究較為全面，但對(duì)其黃酮類、微量元素等成分對(duì)肝損傷的影響尚無(wú)研究，更未見(jiàn)各組分配伍的藥效研究報(bào)道，對(duì)其作用機(jī)制的研究也報(bào)道較少。

藏藥在肝炎治療中具有一定的特色和優(yōu)勢(shì)，但其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機(jī)制等研究尚欠深入，導(dǎo)致其療效不夠顯著，限制其臨床應(yīng)用。因此我們應(yīng)該在總結(jié)利用國(guó)內(nèi)外研究經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，對(duì)波棱瓜子的化學(xué)成分、藥理作用及機(jī)制、制劑工藝及質(zhì)量控制方法進(jìn)行深入而系統(tǒng)的研究，為促進(jìn)藏藥新藥的研究和開(kāi)發(fā)及臨床攻克肝炎這一危害人類健康的重大疾病提供科學(xué)依據(jù)。

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（責(zé)任編輯：陳思敏）

Modern research progress of Tibet medicine Bolengguazi

LIU Mei-lin， ZHANG Mei//（School of Pharmacy， ChengduUniversity of Traditional Chinese Medicine； Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine， Ministry of Education； National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research， Development and Utilization of Chinese Medicine Resources， Chengdu 611137，Sichuan）

［Abstract］Bolengguazi is a traditional Tibetan drug in treating liver-disease. The latest research developments of Bolengguazi are reviewed in the paper， including chemical composition， pharmacological effects and technology research. The review is aimed to provide a reference for exploring new chemical composition， further researching on pharmacological effects of Bolengguazi，and promoting the effective use of Tibetan medicinal resources.

［Key words］Bolengguazi； chemical constituents； pharmacological effects； technology research

［中圖分類號(hào)］R 284

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1674-926X（2015）06-030-04

［作者簡(jiǎn)介］劉 美琳，中藥學(xué)專業(yè)在讀碩士研究生，主要從事中藥化學(xué)研究

［通訊作者］張 梅，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事中藥化學(xué)研

［收稿日期］究 Tel:028-61800231 Email:zhangmei63@126.com2015-03-12