吳春濱 （山東省萊州市朱橋畜牧獸醫(yī)站 261400）

三碘氧化合物消毒劑殺菌測(cè)試

吳春濱 （山東省萊州市朱橋畜牧獸醫(yī)站 261400）

含三碘氧化合物的消毒劑，在有機(jī)物干擾下對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌、枯草桿菌等殺滅率均可達(dá)99.90%以上，50%小牛血清對(duì)消毒殺菌能力無(wú)影響，可用于環(huán)境消毒和帶雞噴霧消毒。而常規(guī)碘伏類消毒劑則在有機(jī)物干擾下嚴(yán)重影響效果，不能用于環(huán)境消毒和噴霧消毒。為了篩選出合適養(yǎng)殖場(chǎng)使用的消毒劑，對(duì)不同結(jié)構(gòu)的碘伏進(jìn)行消毒學(xué)測(cè)試，表明三碘氧化合物消毒劑效果較好，屬高效消毒劑。

三碘氧化合物；碘伏；殺菌效果；抗有機(jī)物；環(huán)境消毒；測(cè)試；實(shí)驗(yàn)

為了篩選出合適養(yǎng)殖場(chǎng)使用的消毒劑，特以不同結(jié)構(gòu)的碘伏進(jìn)行消毒學(xué)測(cè)試，以期通過正確篩選方法來(lái)為養(yǎng)殖場(chǎng)提供參考，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 消毒劑

三碘氧化合物消毒劑：有效成份為三碘氧化合物，有效碘含量為3.04%。普通碘伏：有效成份為聚維酮碘，有效碘含量為3.02%。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)菌

金黃色葡萄球菌 （ATCC 6538），白色念珠菌 （ATCC 10231），大腸桿菌 （8099），枯草桿菌黑色變種芽孢 （ATCC 9372），均用含1%蛋白胨的稀釋液配成107cfu/m l的菌懸液備用，實(shí)驗(yàn)菌株為保存菌株。

1.2 方法

1.2.1 中和劑選擇實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)菌選金黃色葡萄球菌和白色念珠菌，實(shí)驗(yàn)分8組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以第6、7、8組不長(zhǎng)菌，第3、4、5組組間菌數(shù)相差≤10%，第1組不長(zhǎng)菌或細(xì)菌數(shù)遠(yuǎn)低于第2組，第2組菌數(shù)≥100cfu/ml，為所用中和劑及其濃度適宜。

1.2.2 懸液定量殺菌實(shí)驗(yàn)

用無(wú)菌蒸餾水將拜凈稀釋成不同濃度，取5ml于試管中，與0.1ml菌液混勻，作用至規(guī)定時(shí)間；取菌藥混合液0.5m l加入含4.5ml中和劑的試管中，混勻；作用10min后，取0.5ml接種平皿；傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂并混勻，枯草桿菌黑色變種芽孢37℃培養(yǎng)72h，其余菌則培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)，根據(jù)消毒技術(shù)規(guī)范要求，殺滅率達(dá)99.9%則判為合格，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.3 抗有機(jī)物實(shí)驗(yàn)

用無(wú)菌蒸餾水將拜凈稀釋成有效碘2.5mg/L濃度，各取5m l于3只試管中，分別加入小牛血清含量為0%、25%和50%的金黃色葡萄球菌菌懸液0.1m l，混勻；按懸液定量殺菌實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行殺菌實(shí)驗(yàn)，觀察有機(jī)物對(duì)消毒能力的影響，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.4 現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

對(duì)照組用無(wú)菌水噴地面；實(shí)驗(yàn)組用含碘20mg/L的三碘氧化合物消毒劑噴地，5min后，用浸過中和劑的無(wú)菌棉簽在地面涂擦兩次采樣，將樣本放入原中和劑試管內(nèi)作消毒前樣本；用同樣方法采得實(shí)驗(yàn)樣本。10min后取0.5m l接種平皿，傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂，37℃培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。按下式計(jì)算殺滅率：地面細(xì)菌菌落總數(shù) （cfu/地面）=平皿上平均菌落數(shù)×檢測(cè)時(shí)樣本洗液稀釋倍數(shù)。

1.2.5 養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)

選3組相同來(lái)源相同數(shù)量的肉雞，分別為三碘氧化合物消毒劑A組、普通碘伏B組和空白對(duì)照C組。從第1日齡開始到70日齡結(jié)束，A組每天用三碘氧化合物消毒劑帶雞噴霧消毒一次，B組每天用普通碘伏消毒液帶雞消毒一次，均按1：600比例兌水稀釋噴灑。記錄各組死淘數(shù)，死淘重，用料量，用藥情況，實(shí)驗(yàn)初重，小雞重量，中雞重量，大雞重量，全程料肉比，上市率，經(jīng)濟(jì)效益分析。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)采用平均數(shù)，應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行差異顯著分析。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 中和劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)表明，中和劑 （1%硫代硫酸鈉+1%吐溫-80+0.03mol/L pH7.2PBS）能有效中和有效碘40mg/L濃度及以下的三碘氧化合物消毒劑溶液，且中和劑與中和產(chǎn)物對(duì)各實(shí)驗(yàn)菌均無(wú)不良影響。

2.2 殺菌效果

實(shí)驗(yàn)表明，三碘氧化合物消毒劑305ppm（6000倍稀釋）殺滅細(xì)菌繁殖體只需1min，1.25ppm（240002倍稀釋）低劑量也只需要20min。殺真菌所需濃度約為殺細(xì)菌的8倍。能殺枯草桿菌黑色變種芽孢，符合高效消毒劑的要求，可以推測(cè)其殺病毒能力也強(qiáng)。

2.3 抗有機(jī)物

實(shí)驗(yàn)表明，25%、50%的小牛血清對(duì)三碘氧化合物消毒劑殺滅作用均無(wú)影響；在對(duì)照組中，25%、50%小牛血清對(duì)含聚維酮碘的普通碘伏殺滅作用則有輕度影響；而目前含有機(jī)物25～50%的小血清對(duì)含聚維酮碘的普通碘伏消毒能力的報(bào)道均為較嚴(yán)重影響；實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，三碘氧化合物消毒劑是抗有機(jī)物影響能力最強(qiáng)的碘伏類消毒劑，因此適宜于養(yǎng)殖場(chǎng)的環(huán)境消毒。

2.4 現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)表明，三碘氧化合物消毒劑有效碘25mg/L（1200倍稀釋）噴于地面，作用5min對(duì)地面自然菌的平均殺滅率為99.68%，達(dá)到90.00%以上，符合消毒現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)合格要求。而普通碘伏基本無(wú)效。

2.5 養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)

三碘氧化合物消毒劑組在3個(gè)組別中上市率最高，中雞均重最大。料肉比方面三碘氧化合物消毒劑組與普通碘伏和空白對(duì)照組差異顯著 （P＜0.05），大雞均重三碘氧化合物消毒劑組與普通碘伏組差異極顯著 （P＜0.01）。從生產(chǎn)成績(jī)方面看，三碘氧化合物消毒劑組上市率最高，料肉比最低，中雞與大雞均重最大，普通碘伏組與空白對(duì)照組差異不顯著。

3 討論分析與結(jié)論

（1）實(shí)驗(yàn)表明，三碘氧化合物消毒劑在低濃度下可以快速殺死細(xì)菌繁殖體、真菌、細(xì)菌芽孢，而且在高濃度有機(jī)物50%小牛血清存在上，對(duì)消毒效果也無(wú)影響，按1：1200倍稀釋現(xiàn)場(chǎng)消毒，5min內(nèi)對(duì)環(huán)境中的自然菌可達(dá)99.9%殺滅率。根據(jù)三碘氧化合物消毒劑對(duì)芽孢有良好的殺滅作用來(lái)推測(cè)，三碘氧化合物消毒劑是可以殺病毒的，屬高效消毒劑。

（2）含聚維酮碘的普通碘伏在有機(jī)物干擾下快速失效，不適合養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境消毒，根本原因可能是聚維酮碘、非離子表面活性劑碘和季銨鹽碘抗有機(jī)物能力差。三碘氧化合物消毒劑之所以能突破碘伏抗有機(jī)物能力差的缺陷，可能與三碘氧化合物的殺菌方式和十二烷基氧化胺載體也具有殺菌功能有關(guān)，而第一、二代碘伏 （聚維酮碘和季銨鹽絡(luò)合碘）均以游離碘殺菌，而且載體幾乎無(wú)殺菌功能。同時(shí)三碘氧化合物消毒劑中的非離子膠束微囊可直接解離有機(jī)物，表面活性劑又對(duì)病原及環(huán)境中的有機(jī)物進(jìn)行清洗，因而在實(shí)驗(yàn)條件下高濃度的有機(jī)物也不影響三碘氧化合物消毒劑的消毒殺菌能力。所以三碘氧化合物消毒劑適宜于對(duì)污染環(huán)境的消毒，可推薦用于養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境消毒、器械消毒等。