肖春芳，田恒林，沈艷芬，張遠(yuǎn)學(xué)，高劍華，程 群，陳家吉

(湖北恩施中國南方馬鈴薯研究中心，恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，湖北恩施 445000)

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代森錳鋅和戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌不同菌株的毒力

肖春芳，田恒林*，沈艷芬，張遠(yuǎn)學(xué)，高劍華，程 群，陳家吉

(湖北恩施中國南方馬鈴薯研究中心，恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，湖北恩施 445000)

馬鈴薯早疫病是由茄鏈格孢(AlternariasolaniSorauer)引起的真菌性病害，發(fā)生范圍較廣，能危害葉片、莖稈和薯塊。相關(guān)研究表明，馬鈴薯早疫病在我國北方馬鈴薯產(chǎn)區(qū)發(fā)生較頻繁，引起不同程度的減產(chǎn)，嚴(yán)重發(fā)生時(shí)造成20%以上的產(chǎn)量損失[1-3]。近年來，隨著種薯調(diào)運(yùn)以及受氣候條件變化、連年栽種等因素影響，西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)也出現(xiàn)了馬鈴薯早疫病，且呈上升趨勢。目前生產(chǎn)上防治馬鈴薯早疫病的主要措施是依靠化學(xué)藥劑[4]。代森錳鋅是一種二硫代氨基甲酸酯殺菌劑，主要作用于病原菌糖酵解和三羧酸循環(huán)過程中一些含巰基的酶，使其失去活性，從而達(dá)到殺菌作用[5]。該藥劑具有低毒、作用位點(diǎn)多、殺菌范圍廣等特點(diǎn)，防治效果明顯優(yōu)于其他同類殺菌劑，還可為植物補(bǔ)充鋅元素，既可解決缺鋅癥狀還能一定程度上增強(qiáng)植物抵御病害的能力。戊唑醇是新一代高效三唑類殺菌劑，1980年由德國拜耳公司首先研究成功并制成商品投放市場，目前已在全球范圍內(nèi)多種作物上獲得登記并廣泛使用。該藥劑具有生物活性高、持效期長、殺菌譜廣等特點(diǎn)，通過抑制病菌麥角甾醇的生物合成，破壞菌體細(xì)胞膜功能，從而抑制或干擾菌體附著器和細(xì)胞的發(fā)育以及菌絲和孢子的形成，顯著降低病原菌的致病力[6]。筆者研究了保護(hù)性和內(nèi)吸性的2種代表藥劑代森錳鋅和戊唑醇對西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)早疫病菌的毒力，旨在為馬鈴薯早疫病的化學(xué)防治提供參考。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試藥劑。80%代森錳鋅可濕性粉劑由美國陶氏益農(nóng)化工有限公司提供；43%戊唑醇懸浮劑由德國拜耳作物科學(xué)公司提供。

1.1.2培養(yǎng)基。PCA培養(yǎng)基：馬鈴薯100 g/L，胡蘿卜100 g/L，蔗糖10 g/L，瓊脂15 g/L。

1.2方法

1.2.1病原菌的分離與鑒定。2014年，在湖北省恩施州、四川省西昌市和陜西省安康市等地發(fā)病季節(jié)采集具有典型早疫病癥狀的馬鈴薯葉片，采用單病斑組織分離法，不斷進(jìn)行純化得到病原菌。顯微鏡下觀察所有病原菌均能發(fā)現(xiàn)分生孢子，且分生孢子形態(tài)及大小，與《中國真菌志》所記載的馬鈴薯早疫病菌相吻合[7]。采用科赫氏法則進(jìn)行回接驗(yàn)證后均能使葉片發(fā)病，7 d后可觀察到同心輪紋狀病斑，且能在發(fā)病葉片上再次分離到相同病原菌，從而確定該病原菌為馬鈴薯早疫病菌。

1.2.2病原菌對2種藥劑的敏感性測定。采用菌絲生長速率法[8]分別測定代森錳鋅和戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌的毒力。根據(jù)代森錳鋅和戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌毒力的差異，2種藥劑設(shè)定以下6個(gè)質(zhì)量濃度梯度：0、2、4、6、8、10 μg/ml。將預(yù)培養(yǎng)5 d的馬鈴薯早疫病菌用直徑為5 mm的打孔器沿菌落邊緣打取菌盤，接入含藥PCA培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)基含藥質(zhì)量終濃度為藥劑的濃度梯度，每個(gè)處理重復(fù)3次。將接種后的平板放入25 ℃培養(yǎng)箱中，黑暗培養(yǎng)7 d 左右，對照(不添加藥劑)菌落直徑至少50 mm時(shí)，采用十字交叉法測定菌落直徑，根據(jù)菌落直徑求出菌株對2種殺菌劑的敏感性(EC50值)。

2結(jié)果與分析

2.1病原菌的分離結(jié)果2014年，在西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)共分離了35株馬鈴薯早疫病菌。其中，在重慶市巫溪縣、湖北省恩施州、陜西省安康市和四川省西昌市等地的馬鈴薯植株上依次分離得到5、10、8和12株。

2.2代森錳鋅和戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌敏感性的分布馬鈴薯早疫病菌群體是由對代森錳鋅和戊唑醇敏感性不同的菌株組成的，室內(nèi)篩選防治馬鈴薯早疫病菌的藥劑時(shí)，應(yīng)選用不同菌株，以提高篩選的準(zhǔn)確率。代森錳鋅對馬鈴薯早疫病菌的EC50為1.000 0～10.000 0 μg/ml，平均為5.100 0 μg/ml。其中，EC50在平均值以下的菌株有20株，占總數(shù)的57.15%(圖1)；戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌的EC50為1.000 0～7.000 0 μg/ml，平均為3.300 0 μg/ml。其中，EC50在平均值以下的菌株有21株，占總數(shù)的60.00%(圖2)。

2.3代森錳鋅和戊唑醇對不同地區(qū)馬鈴薯早疫病菌的毒力由表1可知，代森錳鋅對西南北部不同地區(qū)馬鈴薯早疫病菌株的毒力有差異，對重慶巫溪、湖北恩施菌株的毒力明顯低于四川西昌、陜西安康菌株，其中重慶巫溪菌株的平均EC50最高，為7.313 7 μg/ml，而四川西昌菌株最不敏感，平均EC50為3.456 3 μg/ml。這可能與采樣前重慶巫溪和湖北恩施等地區(qū)使用過代森錳鋅防治馬鈴薯晚疫病有關(guān)，但各菌株對代森錳鋅仍保持敏感。從整體上看，戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌菌絲生長的抑制作用高于代森錳鋅，且對來源于不同地區(qū)馬鈴薯早疫病菌的毒力程度相近。如四川西昌菌株的平均EC50最高，為3.637 5 μg/ml，而陜西安康菌株的平均EC50最低，為2.559 2 μg/ml，相互之間差異不明顯。

表1　代森錳鋅和戊唑醇對不同地區(qū)馬鈴薯早疫病菌的毒力　μg/ml

3討論

該研究表明，代森錳鋅和戊唑醇均對馬鈴薯早疫病表現(xiàn)出較好的室內(nèi)抑菌效果。選擇重慶巫溪、湖北恩施、陜西安康、四川西昌等西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)的35株馬鈴薯早疫病菌，未出現(xiàn)對代森錳鋅和戊唑醇的抗性菌株。其中，代森錳鋅對該區(qū)域內(nèi)馬鈴薯早疫病菌群體的毒力EC50范圍為1.000 0～10.000 0 μg/ml，與張福光報(bào)道的代森錳鋅對2009～2010年采自河北省175株馬鈴薯早疫病菌的毒力EC50范圍(1.040 0～4.860 0 μg/ml)基本接近[2]。戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌群體的毒力EC50范圍為1.000 0～7.000 0 μg/ml，低于姚亮亮等報(bào)道的戊唑醇對2009～2010在黑龍江分離的42株馬鈴薯早疫病菌的毒力EC50范圍(3.090 3～23.561 3 μg/ml)[9]。這可能與不同地區(qū)使用過戊唑醇或類似藥劑的程度不同有關(guān)，但均未出現(xiàn)敏感性下降的抗藥性群體。

農(nóng)藥混配的目的主要是為了提高藥效、降低成本和擴(kuò)大防治譜。梁偉伶等研究表明代森錳鋅與醚菌酯以9∶1混配對馬鈴薯早疫病的增效作用最好，增效系數(shù)(SR)值為3.800 2[1]。武江等研究顯示代森錳鋅與異菌脲質(zhì)量比為3∶7混配時(shí)對番茄早疫病(Alternariasolani)的增效作用最好，SR值為1.71[10]。代森錳鋅和戊唑醇作為有效防治馬鈴薯早疫病的2種不同作用機(jī)制的殺菌劑，其增效混配比例有待進(jìn)一步研究。

隨著代森錳鋅和戊唑醇在生產(chǎn)中的廣泛使用，馬鈴薯早疫病菌亦有可能產(chǎn)生抗藥性。因此，應(yīng)加大田間抗藥性監(jiān)測和治理研究。另外，除充分認(rèn)識到殺菌劑的藥效作用外，其對人類健康的危害性也必須引起高度重視，不能盲目使用。為了延緩馬鈴薯早疫病菌抗藥性的產(chǎn)生，建議將代森錳鋅和戊唑醇與其他殺菌劑交替或混合使用，將每個(gè)生長季節(jié)內(nèi)同一藥劑的施用次數(shù)控制在3次以內(nèi)，避免鏟除性使用，同時(shí)配套合理的栽培措施，以達(dá)到對馬鈴薯早疫病的綜合防控。

參考文獻(xiàn)

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摘要[目的]明確代森錳鋅和戊唑醇對馬鈴薯早疫病菌不同菌株的毒力。[方法]采用菌絲生長速率法測定了從西南北部馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)采集的35株馬鈴薯早疫病菌對代森錳鋅和戊唑醇2種殺菌劑的敏感性。[結(jié)果]代森錳鋅和戊唑醇對所有菌株均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用。其中，代森錳鋅的EC50為1.000 0～10.000 0 μg/ml，平均為5.100 0 μg/ml；戊唑醇的EC50為1.000 0～7.000 0 μg/ml，平均為3.300 0 μg/ml。[結(jié)論]該區(qū)域內(nèi)馬鈴薯早疫病的防控仍可使用代森錳鋅和戊唑醇，但要注意藥劑交替使用，并實(shí)時(shí)監(jiān)測菌株的抗藥性。

關(guān)鍵詞代森錳鋅；戊唑醇；馬鈴薯早疫病菌；毒力

Toxicity of Mancozeb and Tebuconazole on Different Strains ofAlternariasolaniCaused Potato Early Blight

XIAO Chun-fang, TIAN Heng-lin*, SHEN Yan-fen et al(Southern Potato Research Center of China, Enshi Academy of Agricultural Sciences, Enshi, Hubei 445000)

Abstract[Objective] The aim was to understand toxicity of Mancozeb and Tebuconazole on different strains of Alternaria solani caused potato early blight. [Method] Thirty-five isolates of Alternaria solani were collected from the major regions of potato production in the northern area of the southwest China. The sensitivity to Mancozeb and Tebuconazole was determined by mycelium growth rate method. [Result] Mancozeb and Tebuconazole were toxic to all strains. The EC50values of Mancozeb and Tebuconazole were in the range of 1.000 0-10.000 0 and 1.000 0-7.000 0 μg/ml respectively, followed by the mean EC50value were 5.100 0 and 3.300 0 μg/ml. [Conclusion] Prevention and control of potato early blight can still use Mancozeb and Tebuconazole. It was advised that Mancozeb and Tebuconazoleto should be used alternately and the strains of drug-resistant of fungicides were detected at any time.

Key wordsMancozeb; Tebuconazole; Potato early blight; Toxicity

收稿日期2015-05-13

作者簡介肖春芳(1986- )，女，湖南岳陽人，農(nóng)藝師，碩士，從事馬鈴薯遺傳育種及病蟲害防治研究。*通訊作者，研究員，從事馬鈴薯遺傳育種及病蟲害防治研究。

基金項(xiàng)目現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)(CARS-10)。

中圖分類號S 435.32

文獻(xiàn)標(biāo)識碼A

文章編號0517-6611(2015)18-123-02