楊昌彪　張運依+　李占彬等

摘要：建立SP-2560脂肪酸專用柱和ZB-WAXplus毛細(xì)管柱對菜籽油中主要脂肪酸成分分析的氣相色譜法。對來源及品牌商標(biāo)不同的60個菜籽油（其中低芥酸菜籽油41個，高芥酸菜籽油19個）樣品進行主要脂肪酸含量的檢測分析，總合格率為58%，其中低芥酸和高芥酸菜籽油中合格率分別為66%和58%，并總結(jié)出在質(zhì)量不合格的菜籽油中大豆油是主要摻假種類之一，為食用油的健康管理提供一定的技術(shù)參考。

關(guān)鍵詞：脂肪酸；氣相色譜法；菜籽油；大豆油

中圖分類號： TS227文獻標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2015）11-0392-04

收稿日期：2014-11-26

基金項目：貴州省科學(xué)技術(shù)基金（編號：黔科合J字[2012]2220號，黔科院J合字[2013]11號）。

作者簡介：楊昌彪（1984—），男，貴州織金人，碩士，中級工程師，主要從事食品安全分析研究。E-mail：cb-yang@gzata.cn。

通信作者：李榮華（1978—

，男，貴州織金人，碩士，高級工程師，主要從事食品安全分析研究。 E-mail：lrh@gzata.cn。食用油與人們的生活息息相關(guān)，近年來食用油的質(zhì)量和安全問題日益受到關(guān)注，雖然相關(guān)部門一直在監(jiān)管，但長期存在的地溝油風(fēng)波始終延續(xù)不斷。由于相關(guān)的法律體系不完善以及受利益驅(qū)使，不法經(jīng)營者將生產(chǎn)、銷售地溝油以及摻假廉價油作為一種獲取高額利潤的手段，不僅影響到食用油的營養(yǎng)品質(zhì)，同時還會嚴(yán)重影響到消費者的健康安全。

目前劣質(zhì)食用油的衛(wèi)生指標(biāo)經(jīng)檢測基本都是合格的，因此須從成分組成、氣味光譜圖特征等方面對其進行檢測，分析找出其與優(yōu)質(zhì)油的差別。吳惠勤等利用SPME/GC-MS技術(shù)對油脂中內(nèi)源及外源物質(zhì)的微量成分的存在進行分析以確定樣品是否為地溝油，首次建立SPME/GC-MS鑒別地溝油的新方法[1-3]。周永生等建立了固相萃取-氣質(zhì)色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測地溝油中的膽固醇，檢出限達(dá)0.02 mg/L[4]。劉玲玲等用近紅外光譜技術(shù)找出地溝油與食用油光譜的波數(shù)差別，為后續(xù)的地溝油光譜分析提供了相應(yīng)的參考[5]。金靜等用內(nèi)標(biāo)法測定油脂中十一烷酸與13-甲基十四烷酸的含量，以推定食用油中是否摻假，方法檢出限分別達(dá)到0.070、 0.006 mg/kg[6]。許秀麗等建立了分析油脂樣品中37種脂肪酸含量的氣相色譜—質(zhì)譜檢測方法，對衛(wèi)生部2次盲樣進行判定，陽性準(zhǔn)確率分別為100%、95%，陰性準(zhǔn)確率分別為100% 、90%[7]。黃韜睿等建立了采用氣相色譜對食用油中肉豆蔻酸含量的檢測以鑒別地溝油及食用油的方法[8]。

本研究通過采用不同毛細(xì)管柱對不同來源的菜籽油進行脂肪酸含量檢測，分析不同方法對檢測結(jié)果的影響，對不合格菜籽油從脂肪酸主要成分含量的變化分析其可能摻假的方式，為執(zhí)法部門對食用油監(jiān)管及保障消費者健康安全提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器設(shè)備

氣相色譜儀：Agilent 6890N，F(xiàn)ID檢測器；SP-2560毛細(xì)管柱100 m×0.25 mm×0.20 um，色譜科；ZB-WAXplus毛細(xì)管柱30 m×0.25 mm×0.25 um，菲羅門；旋渦混合器：XW-80A，江蘇省常州諾基儀器有限公司。

1.2試劑及材料

37種脂肪酸甲酯混標(biāo)；異辛烷（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；硫酸氫鈉（優(yōu)級純，上海安譜科學(xué)儀器有限公司）；氫氧化鈉（分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；甲醇（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；菜籽油，購于超市、小作坊或送檢。

1.3儀器條件

1.3.1SP-2560毛細(xì)管柱檢測條件進樣口溫度：230 ℃；檢測器溫度：250 ℃；柱流量：1.0 mL/min；分流比：80 ∶1；柱溫梯度：140 ℃（5 min），2.5 ℃/min升到240 ℃（25 min）。

1.3.2ZB-WAXplus毛細(xì)管柱檢測條件進樣口溫度： 230 ℃ ；檢測器溫度：250 ℃；柱流量：3.0 mL/min；分流比： 50 ∶1 ；柱溫梯度：60 ℃（2 min），13 ℃/min 升到150 ℃， 2 ℃/min 升到240 ℃（3 min）。

1.4試驗步驟

（1）37種脂肪酸甲酯直接上機檢測，作為不同種脂肪酸的定性標(biāo)準(zhǔn)。

（2）方法按照國標(biāo)GB/T 17376—2008《動植物油脂肪酸的制備》中第5章“酯交換法”進行處理。稱樣品60 mg，加4 mL 異辛烷溶解樣品并搖勻，渦旋振蕩1 min，加入200 μL氫氧化鈉甲醇溶液，猛烈振搖30 s后靜置至澄清，加入1 g硫酸氫鈉猛烈振搖中和強氧化鈉，待沉淀后取上清液過膜，待上機分析。

（3）按“1.3”節(jié)儀器條件進行上機檢測，用百分比法進行數(shù)據(jù)處理分析。

2結(jié)果與分析

2.1SP-2560毛細(xì)管柱檢測分析的37種脂肪酸圖譜

從圖1可以看出，樣品檢測所需時間較長，接近60 min才能檢測完1個樣品，但分離效果好。在檢測過程中，發(fā)現(xiàn)同樣的條件下SP-2560柱子使用一段時間后保留時間會向后推移，最后指標(biāo)C22 ∶6ns出峰時間接近70 min，且C22 ∶1n9和C20 ∶3n3這2個指標(biāo)分不開并作1個峰，所以在檢測分析過程中如果這2個指標(biāo)分離不好且指標(biāo)C22 ∶1n9（芥酸）組分含量大于3%時，須同其他柱子比對或優(yōu)化方法分開這2個指標(biāo)，保證高芥酸和低芥酸菜籽油分界線劃分準(zhǔn)確以確保產(chǎn)品質(zhì)量判定的準(zhǔn)確。

2.2SP-2560毛細(xì)管柱檢測分析的主要脂肪酸色譜圖

從圖2可以看出，此脂肪酸專用柱能對目標(biāo)物有很好的分離效果，保證結(jié)果定性的準(zhǔn)確性，用于假陽性樣品的復(fù)檢分離是必不可少的有力助手，但長時間使用后分析樣品時間較長，不易于批量樣品的檢測分析。

2.3ZB-WAXplus毛細(xì)管柱檢測分析的37種脂肪酸圖譜

從圖3可以看出，此方法檢測樣品的時間較SP-2560而言所需時間較短，在40 min內(nèi)就可以完成，分離效果較好，對大批量樣品的檢測能節(jié)約時間。但此條件只檢測出36個峰，主要是因為在19.655 min時C18 ∶1n9t和C18 ∶1n9c重合在一起。在對多種植物油中脂肪酸組分檢測后發(fā)現(xiàn)，C18 ∶1n9t含量很低或是未檢出，不影響C18 ∶1n9c的定性分析，所以在此時間的峰可作為C18 ∶1n9c目標(biāo)物的定性峰。但針對特殊樣品必須具體問題具體分析，用其他的柱子如SP-2560毛細(xì)管柱進行二者分離以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4ZB-WAXplus毛細(xì)管柱檢測分析的主要脂肪酸色譜圖

從圖4可以看出， 由于C18 ∶1n9c含量較高，同C18 ∶0

分離效果較差，但不影響二者的準(zhǔn)確定性，同時由于ZB-WAXplus柱子對芥酸C22 ∶1的分離效果較好，為確認(rèn)樣品是否為高芥酸或者低芥酸菜籽油提高了準(zhǔn)確性。

2.5菜籽油檢測過程中的質(zhì)量監(jiān)控

為了保證試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，在試驗過程中用質(zhì)控樣進行質(zhì)量監(jiān)控，檢測結(jié)果見表1。

從表1可以看出，2次試驗結(jié)果值都在不確定度的偏差范圍之類，在檢測過程中帶上質(zhì)控樣一起處理，這樣保證了試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.6一般菜籽油脂肪酸主要成分含量

試驗通過對來源及商標(biāo)品牌不同的60個菜籽油（低芥酸41個，高芥酸19個）樣品主要脂肪酸中棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸和芥酸指標(biāo)進行檢測，低芥酸和高芥酸菜籽油指標(biāo)成分含量分別見表2和表3。

對于一個菜籽油樣品中脂肪酸的主要組成判定取決于芥酸的含量，范圍在ND～3%間就按低芥酸來判定，芥酸含量在3%～60%間時按高芥酸進行判定，所以芥酸含量的準(zhǔn)確測定對判斷該樣品質(zhì)量是否合格起主要決定作用。

按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB 1536—2004《菜籽油》中對低芥酸菜籽油脂肪酸主要組成的判定：棕櫚酸2.5%～7%，硬脂酸0.8%～3%，油酸51%～70%，亞油酸15%～30%，亞麻酸 5%～14% ，芥酸0～3%。表2 中41個均為低芥酸菜籽油，其脂肪酸主要組成可按低芥酸菜籽油指標(biāo)含量進行判定，其中合格的為1～27號，不合格的為28～41號，合格率為66%。用表2 數(shù)據(jù)對不合格的樣品指標(biāo)進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，28～32號樣品相對于質(zhì)量合格的樣品指標(biāo)而言，棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸含量均有一定上升，油酸含量均呈下降趨勢。用正常大豆油指標(biāo)相比對分析，此5個樣品可能添加了一定量的大豆油。大豆油主要脂肪酸指標(biāo)含量范圍分別是：棕櫚酸8%～13.5%，硬脂酸 2.5%～5.4% ，亞油酸49.8%～59%。此含量均比菜籽油含量高，添加一定量就能提升菜籽油這3個指標(biāo)含量，同樣的大豆油油酸含量范圍為17.7%～28%，比菜籽油油酸 51%～70% 低，所以添加大豆油到菜籽油中其油酸含量必定下降。而33～41號組分含量雖不合格但變化無規(guī)律，可能是地溝油或調(diào)和油。

標(biāo)稍微偏高。同理，出于成本考慮，不法生產(chǎn)商可能向高芥酸菜籽油中添加部分大豆油，從而使不合格的8個高芥酸菜籽油的棕櫚酸和亞油酸指標(biāo)明顯提升，硬脂酸含量也有增大的趨勢。其他3個指標(biāo)油酸、亞麻酸、芥酸添加大豆油后結(jié)果無大變化，主要是高芥酸菜籽油中油酸的含量范圍較大，為8%～60%，大豆油此指標(biāo)含量包含在此范圍間，且這2種植物油亞麻酸的含量相近，再者大豆油的芥酸含量為0～03%，所以添加大豆油后這3個指標(biāo)無明顯的變化。

3結(jié)論

建立SP-2560和ZB-WAXplus毛細(xì)管柱對菜籽油中主要脂肪酸成分分析的方法，并分析2種柱子在檢測中存在的問題及互補應(yīng)用。同時對60個菜籽油進行分析，了解現(xiàn)在食用油的一個產(chǎn)品質(zhì)量安全概況，并對不合格的菜籽油進行分析，得出廉價便宜的大豆油主要是生產(chǎn)商摻假的主要種類。此方法為食用油產(chǎn)品質(zhì)量的安全監(jiān)管提供了一定的參考。

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