沈娜

（福建省永安市農(nóng)業(yè)局366000）

豬瘟的實驗室診斷技術(shù)

沈娜

（福建省永安市農(nóng)業(yè)局366000）

為了有效控制我國豬瘟的流行，減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟損失，了解和掌握豬瘟的實驗室診斷方法很重要。本文簡要介紹豬瘟的實驗室診斷方法和相關(guān)診斷技術(shù)。

豬瘟；實驗室；診斷技術(shù)

豬瘟 (HC)具有高度接觸傳染性，流行廣泛，發(fā)病率、死亡率高，危害極大。1984年國際獸疫局 (OIE)將之列為A類16種法定傳染病之一。豬瘟是養(yǎng)豬業(yè)中常見的疾病，給養(yǎng)豬生產(chǎn)和發(fā)展帶來了巨大的損失。因此，有必要了解和掌握豬瘟的實驗室診斷方法，研究出快速、準(zhǔn)確的診斷技術(shù)，有效控制豬瘟的擴散，減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟損失，為在我國徹底消滅豬瘟奠定基礎(chǔ)。常見的實驗室診斷有以下幾種。

1 免疫熒光試驗 (FA)

將病豬扁桃體和脾制成20g/L的混合勻漿后接種PK-15細(xì)胞，24-72h以后用FA試驗或酶標(biāo)抗體檢查證實培養(yǎng)物中的病毒。此種病毒分離診斷方法較敏感。

2 間接血凝試驗 （IHA）

間接血凝試驗 （IHA）是將抗原或抗體包被于紅細(xì)胞表面，成為致敏載體，然后與相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合，使紅細(xì)胞發(fā)生聚集，在反應(yīng)孔中出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)。間接血凝實驗曾經(jīng)是非常普遍的檢測手段，它操作步驟簡單，實驗時間短，價格便宜，不需要特殊的檢測儀器等優(yōu)點，因此，在基層實驗室檢測中受到大力推廣。不足之處是檢測試劑有質(zhì)量差異和不穩(wěn)定性，且此類實驗的結(jié)果判定依靠肉眼判斷，準(zhǔn)確性差。同時，待檢血清的滅活程度也對實驗結(jié)果有很大的影響。

3 酶聯(lián)免疫吸附試驗 （ELISA）

酶聯(lián)免疫吸附實驗是現(xiàn)階段基層實驗室最常用的檢測手段，它檢測手段簡單，結(jié)果穩(wěn)定，實驗的重復(fù)性高，且檢測費用適中，逐漸取代了早期推廣的間接血凝實驗。它既可檢測抗體，也可檢測抗原，檢測多樣性高，更適應(yīng)豬場清除帶毒豬只的需要?，F(xiàn)階段酶聯(lián)免疫吸附實驗主要分以間接ELISA、阻斷ELISA和斑點ELISA這3種較為常見。

4 聚合酶聯(lián)反應(yīng) （PCR)

聚合酶聯(lián)反應(yīng)是1985年由美國PE-Cetus公司人類遺傳研究室的MuLlis（穆里斯）發(fā)明的。聚合酶鏈反應(yīng)又稱無細(xì)胞克隆技術(shù)，是在一定的條件下 （溫度和反應(yīng)酶），對某一段DNA進行體外快速復(fù)制擴增，達到肉眼可見的新技術(shù)。它具有快速、反應(yīng)產(chǎn)量高、實驗結(jié)果穩(wěn)定、特異性和敏感性高等特點，是十分先進的一種檢測技術(shù)。隨著耐熱DNA聚合酶--Taq酶的發(fā)現(xiàn)，該實驗操作過程變的得十分簡單便捷，實驗的時間和人工成本都大大降低，促進的該技術(shù)的發(fā)展，使之逐步應(yīng)用于基層實驗室檢測。

5 其他檢測方法

中和試驗是通過測定不同濃度的被檢血清對定量的豬瘟病毒的感染力的阻止能力來判斷被檢血清中的抗體效價。這種方法對實驗儀器的依靠性強，對實驗人員檢測技術(shù)的要求高，且操檢測過程復(fù)雜，操作時間長，不適用基層實驗室的檢測工作。膠體金免疫技術(shù)是一種新型的檢測技術(shù)，主要有斑點免疫金滲濾法和膠體金免疫層析技術(shù)。此類檢測技術(shù)具有便捷，快速，敏感性高，結(jié)果判斷直觀等特點。