高清清

(江蘇省太倉市瀏河動物防疫站215400)

淺談奶牛乳房炎PCR 診斷技術的應用

高清清

(江蘇省太倉市瀏河動物防疫站215400)

奶牛乳房炎是由物理、化學或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引發(fā)的一種炎癥反應，其中多種病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因。該病廣泛存在于世界各地，其發(fā)生率至今仍相當高。它不僅僅給世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經濟損失，也給乳品工業(yè)的發(fā)展、公共衛(wèi)生以及食品安全帶來一定隱患。目前，奶牛乳房炎的防治仍以采用抗菌素進行治療為主，臨床治療過程中由于盲目使用抗生素，致使耐藥菌株不斷產生，不但療效不佳，而且造成治療成本增加；還可引起乳中藥物殘留，這將大大降低經濟效益。早期的檢測不僅能夠預防乳房炎的發(fā)病，而且也可為乳房炎治療提供有效依據，是直接提高牛奶質量有效、切實的手段。目前奶牛乳房炎主要的診斷方法有乳汁體細胞計數(shù)、微生物鑒定、電導率值檢驗、乳成分檢驗、MTT和PCR檢測等方法。

微生物鑒定法是目前比較認同的一種標準檢測方法，但此種檢測方法檢測時間長，檢測環(huán)境要求高，工作量大，并且極易產生假陰性誤判，因此目前還僅限于實驗室檢測，并未在奶牛養(yǎng)殖場進行推廣。隨著分子生物學的廣泛發(fā)展，PCR應用技術日益完善，PCR檢測奶牛乳房炎是目前在臨床診斷中廣泛應用的一種分子水平方法。此次筆直應用上海奶牛育種中心PathoProof奶牛乳房炎PCR診斷系統(tǒng)對江蘇太倉地區(qū)部分牧場兩百多個樣本進行檢測，發(fā)現(xiàn)其具備以下特點：（1）準確：100%特異性鑒別出牛奶樣本中的DNA，結果客觀，無需依賴檢測者經驗；實現(xiàn)定性和定量分析，如果樣本中同時存在多種病原菌，所有病原菌會被同時檢測到并報告各種細菌的比例。 （2）高效：從樣本到結果只需4～5h，包括支原體。 （3）便捷：可用于分析鮮乳及添加溴硝丙二醇防腐劑保存了3個月的牛乳樣本，樣本常溫運輸，使牛奶跟蹤樣本 （DHI樣本）能首次用于乳腺炎檢測項目；可用于對奶牛治療期間的樣本進行檢測，不受抗生素藥品的影響；不需要非常豐富的微生物鑒定經驗和嚴格的無菌操作環(huán)境及設備就能得到準確結果。

基于該技術的特點，牧場可對乳房炎急性發(fā)病高產奶牛，久治不愈的、反復發(fā)作的奶牛優(yōu)先進行采樣送檢，及時確定主要致病菌及用藥濃度，避免盲目用藥、過量用藥，縮短治療周期，減少生產上的損失。有條件的牧場也可以制定科學的計劃，結合奶牛臨床癥狀及隱性乳房炎檢測結果，定期集中采樣送檢，獲得牧場全年度不同季節(jié)奶牛乳房炎病原菌發(fā)病情況及其藥物敏感性的系統(tǒng)資料，為指導臨床合理用藥和制定來年牧場環(huán)境、擠奶管理計劃，提高奶牛乳房炎防治效果提供理論依據。