吳懷戈

氟喹諾酮類藥物是治療結(jié)核病的常用藥物。近年來(lái)，隨著結(jié)核病發(fā)病率的不斷升高，結(jié)核病患者對(duì)氟喹諾酮類藥物的抗藥性也隨之增強(qiáng)，嚴(yán)重地影響其治療效果。為了進(jìn)一步探討結(jié)核分枝桿菌對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥性，筆者對(duì)2014年9月～2015年5月期間在我院接受治療的結(jié)核病患者攜帶的178株結(jié)核分枝桿菌的檢測(cè)資料進(jìn)行回顧性研究，以便為臨床合理用藥提供參考。現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對(duì)象為2014年9月～2015年5月期間在我院接受治療的結(jié)核病患者攜帶的178株結(jié)核分枝桿菌。這178株結(jié)核分枝桿菌經(jīng)常規(guī)生化鑒定和分子生物學(xué)鑒定后，均被確定為結(jié)核分枝桿菌。

1.2 檢測(cè)方法

使用液體培養(yǎng)基聯(lián)合MTT技術(shù)對(duì)這178例結(jié)核分枝桿菌均進(jìn)行耐藥性檢測(cè)。進(jìn)行檢測(cè)的項(xiàng)目為，氧氟沙星、莫西沙星和左氧氟沙星對(duì)這178株結(jié)核分枝桿菌的最低抑菌濃度（MIC）和BactecMGIT960藥敏性。進(jìn)行耐藥性檢測(cè)的方法為：①配制7H9-S液體培養(yǎng)基：Middleebrook7H9液體培養(yǎng)基，包括0.5%的甘油，0.1%的酪蛋白胨，葡萄糖，10%的油酸，牛血清白蛋白，過(guò)氧化氫酶添加劑。②配制試劑的方法：用0.1mol/L的NaOH溶解氧氟沙星、左氧氟沙星和莫西沙星，將其分裝后放置在-70℃中備用。使用PH=6.8的磷酸緩沖液溶解MTT（噻唑藍(lán)），將其配制成濃度為5mg/ml的溶液，用0.22μm的無(wú)菌濾過(guò)器對(duì)此溶液進(jìn)行除菌后，避光放置在4℃中備用。③進(jìn)行MIC檢測(cè)的方法為：按照WHO推薦的比例法對(duì)這178株結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，接種量為10-104。將這三種氟喹諾酮類藥物的藥物濃度設(shè)定為：氧氟沙星的濃度為0.125～32μg/ml，左氧氟沙星的濃度為0.125～32μg/ml，莫西沙星的濃度為0.063～4μg/ml。④進(jìn)行MGIT960藥敏檢測(cè)的方法為：按照柳正衛(wèi)等人[1]的試驗(yàn)方法對(duì)這178株結(jié)核分枝桿菌對(duì)氧氟沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐藥性進(jìn)行檢測(cè)。將H37Rv作為每次試驗(yàn)的質(zhì)控菌株。

2 結(jié)果

2.1 進(jìn)行MGIT960藥敏檢測(cè)的結(jié)果

在這178株結(jié)核分枝桿菌中，對(duì)氧氟沙星敏感的菌株有119株，對(duì)該藥耐藥的菌株有59株（占33.1%），有82株菌株對(duì)一線抗結(jié)核藥和兩種二線抗結(jié)核藥全敏，其中對(duì)氧氟沙星耐藥的菌株有2株，其MIC值分別為2μg/ml和0.5μg/ml。在這82株菌株中，有80株對(duì)氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星均敏感，其中氧氟沙星對(duì)這些菌株的MIC值為2μg/ml，左氧氟沙星對(duì)這些菌株的MIC值為1μg/ml，莫西沙星對(duì)這些菌株的MIC值為0.25μg/ml。在這178株結(jié)核分枝桿菌中，有86株菌株對(duì)一線抗結(jié)核藥物全敏，其中氧氟沙星對(duì)這些菌株的MIC值為4μg/ml，左氧氟沙星對(duì)這些菌株的MIC值為2μg/ml，莫西沙星對(duì)這些菌株的MIC值為0.5μg/ml。上述結(jié)果顯示，這178株結(jié)核分枝桿菌對(duì)氧氟沙星的耐藥性最高，對(duì)左氧氟沙星的耐藥性次之，對(duì)莫西沙星的耐藥性最低。

2.2 對(duì)三種氟喹諾酮類藥物對(duì)耐多藥結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行MIC檢測(cè)的結(jié)果

在這178株結(jié)核分枝桿菌中，耐多藥結(jié)核分枝桿菌有74株。這74株結(jié)核分枝桿菌對(duì)莫西沙星的的MIC值均≤1μg/ml。對(duì)這三種藥物進(jìn)行兩兩秩和檢驗(yàn)的結(jié)果顯示，其P值均小于0.05。詳情見(jiàn)表1。

表1 這74株耐多藥結(jié)核分枝桿菌在不同藥物濃度下其MIC值的分布

2.3 對(duì)廣泛耐藥結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行MIC檢測(cè)的結(jié)果

在這178株結(jié)核分枝桿菌中，廣泛耐藥的菌株有28株，占15.7%。對(duì)這28株廣泛耐藥的菌株對(duì)這三種氟喹諾酮類藥進(jìn)行MIC檢測(cè)的結(jié)果為：氧氟沙星對(duì)這些菌株的MIC值≥8μg/ml的菌株有15株（占53.6%），左氧氟沙星對(duì)這些菌株的MIC值≥4μg/ml的菌株有18株（占64.3%）。對(duì)這兩種藥物進(jìn)行比較秩和檢驗(yàn)的P值均小于0.05。這說(shuō)明，這28株菌株對(duì)氧氟沙星和左氧氟沙星均具有耐藥性。

3 討論

目前，在臨床上結(jié)核分枝桿菌對(duì)常用的氟喹諾酮類藥物中的氧氟沙星的耐藥性最為嚴(yán)峻，對(duì)左氧氟沙星的耐藥性次之[2]。在6種一線和二線抗結(jié)核病藥物中，結(jié)核分枝桿菌對(duì)氧氟沙星的耐藥性最高[3]。因此，在使用氟喹諾酮類藥物對(duì)結(jié)核病患者進(jìn)行治療時(shí)，應(yīng)充分重視其所攜帶的結(jié)核分枝桿菌對(duì)氧氟沙星和左氧氟沙星的耐藥性，需根據(jù)其進(jìn)行藥敏檢測(cè)的結(jié)果，為其合理用藥。

[1] 柳正衛(wèi),何海波,繆梓萍等.984株結(jié)核分枝桿菌耐藥情況分析.中國(guó)防疥雜志,2007,29(2):167-170.

[2] 吳小林.結(jié)核病藥物研發(fā)的進(jìn)展、挑戰(zhàn)和展望[J].國(guó)外醫(yī)藥抗生素分冊(cè),2010,31(3):119-123.

[3] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.全國(guó)結(jié)核病耐藥性基線調(diào)查報(bào)告(2007-2008年).人民衛(wèi)生出版社,2010:25-52.