冠心蘇合咀嚼片中冰片含量測定方法研究

馬千華

(黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司，黑龍江 虎林158400)

摘要：目的：建立冠心蘇合咀嚼片中冰片——龍腦、異龍腦的含量測定方法。方法：采用GC法，聚乙二醇(PEG-20M)為固定相，涂布濃度為10%；柱溫140℃。理論板數(shù)按正十五烷峰計(jì)算應(yīng)不低于1200。結(jié)果：龍腦、異龍腦在0.68～3.494mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=0.9999)，平均加樣回收率99.72%(RSD=0.6%，n=6)。結(jié)論：本法靈敏、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、精密度高、專屬性強(qiáng)?？捎糜诠谛奶K合咀嚼片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：冠心蘇合咀嚼片；龍腦;異龍腦；GC

作者簡介：馬千華，黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司。

文章編號(hào)：1672-6758(2015)01-0150-4

中圖分類號(hào)：R917

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Abstract：The goal is to establish the determination method of borneol and isoborneol in Guanxin suhe chewable Tablets .And the determination was carried out by GC with polyethylene glycol(PEG-20M)as the stationary phase，coating concentration was 10%；Column temperature was 140℃. Theoretical plate number calculated on pentadecane peak should be not less than 1200. Borneol and isoborneol showed a good linear relationship at the range of0.68～3.494μg(r=0.9999),The average recovery was99.72%,(RSD=0.6%，n=6). The conclusion is that method adopted is insensitive, accurate, reproducible, high precision, specificity and can be used for quality control of Guanxin suhe chewable Tablets.

冠心蘇合咀嚼片為局頒標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)《中國藥典》2010年版附錄VI E中的要求，并參照中國藥典2010年版一部《冠心蘇合丸》中冰片的含量測定方法改進(jìn)了本品冰片含量測定方法，將原來只測冰片中龍腦的含量改為以龍腦、異龍腦峰面積和來計(jì)算冰片含量，并對(duì)此方法進(jìn)行了方法學(xué)考察，從而使檢測指標(biāo)更科學(xué)合理。

1含量測定方法

冰片照氣相色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI E)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以聚乙二醇(PEG-20M)為固定相，涂布濃度為10%；HP-5彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，柱溫140℃，F(xiàn)ID檢測器。理論板數(shù)按正十五烷峰計(jì)算應(yīng)不低于1200。

校正因子測定取正十五烷適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1ml含7mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取冰片對(duì)照品10mg精密稱定，置5ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，吸取1ul，注入氣相色譜儀，測定，計(jì)算校正因子。

測定法取本品10片，精密稱定，研細(xì)，取適量(約相當(dāng)于冰片12mg)，精密稱定，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml與乙酸乙酯4ml，密塞，振搖使冰片溶解，濾過，吸取續(xù)濾液1ul，注入氣相色譜儀，測定，以龍腦、異龍腦峰面積之和計(jì)算，即得。

本品每片含冰片(C10H18O)應(yīng)為80.0～120.0mg。

2方法學(xué)考察

2.1色譜條件與儀器試劑。

2.1.1色譜條件。

固定液：填充柱，以聚乙二醇(PEG-20M)為固定相，涂布濃度為10%；HP-5彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，柱溫140℃，F(xiàn)ID檢測器。

2.1.2儀器。

氣相色譜儀：Agilent 6820。

2.1.3試劑試藥。

冰片對(duì)照品，購于中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110743-200504；正十五烷對(duì)照品，購于中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)：111677-200401；冠心蘇合咀嚼片，哈爾濱一洲制藥有限公司生產(chǎn)。

2.2試驗(yàn)溶液的制備。

2.2.1內(nèi)標(biāo)溶液。

參照冠心蘇合丸中冰片測定方法，確定為取正十五烷適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1ml含7mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。

2.2.2冰片對(duì)照品溶液。

參照冠心蘇合丸中冰片測定方法，確定為取冰片對(duì)照品10mg，精密稱定，置5ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，即得。

2.2.3供試品溶液。

參照冠心蘇合丸中冰片測定方法，初步確定為取本品10片，精密稱定，研細(xì)，取適量(約相當(dāng)于冰片12mg)，精密稱定，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml與乙酸乙酯4ml，密塞，振搖使冰片溶解，濾過，取續(xù)濾液即得。

2.3專屬性考察。

按本品處方工藝制備不含冰片的陰性樣品，按2.3項(xiàng)下制備陰性對(duì)照液。分別精密吸取內(nèi)標(biāo)溶液、冰片對(duì)照品溶液、供試品溶液與陰性對(duì)照液各1μl，注入氣相色譜儀(見色譜圖1-圖4)。

從色譜圖中可見，內(nèi)標(biāo)峰與冰片峰相距適中，分離度好，冰片中龍腦與異龍腦色譜峰分離亦良好，且陰性樣品在冰片峰保留時(shí)間處無色譜峰，表明陰性無干擾，此方法專屬性好。

2.4 線性試驗(yàn)。

分別精密稱取冰片對(duì)照品3.40mg、6.68mg、10.05mg、13.17mg、17.47mg，置5 ml量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，即得各濃度對(duì)照液。分別吸取1ul注入氣相色譜儀,記錄峰面積，以CR/CS-AR/AS求回歸方程，計(jì)算相關(guān)系數(shù)，結(jié)果見表1。

CR為冰片對(duì)照品含量，CS為內(nèi)標(biāo)物的含量，AR為冰片峰面積，AS為內(nèi)標(biāo)峰面積，相關(guān)系數(shù)：r=0.9999，線性方程為y=0.854922x-0.04316。

表1　冰片的線性試驗(yàn)

結(jié)果表明冰片在0.68~3.494mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖見下圖：

2.5樣品供試液制備方法考察。

參照冠心蘇合丸中冰片測定方法，選擇乙酸乙酯直接溶解提取樣品，同時(shí)比較了超聲提取的方法，具體如下：

(1)直接溶解：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，取適量(約相當(dāng)于冰片12mg)，精密稱定，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml與乙酸乙酯4ml，密塞，振搖使冰片溶解，濾過，取續(xù)濾液即得。

(2)超聲提取5分鐘：精密稱取上述研細(xì)的粉末適量(約相當(dāng)于冰片12mg)，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml與乙酸乙酯4ml，密塞，稱定重量，超聲5分鐘，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。

(3)超聲提取10分鐘：精密稱取上述研細(xì)的粉末適量(約相當(dāng)于冰片12mg)，置具塞試管中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml與乙酸乙酯4ml，密塞，稱定重量，超聲10分鐘，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。

(4)測定：分別吸取上述溶液各1ul注入氣相色譜儀,記錄峰面積，計(jì)算冰片的含量，結(jié)果見下表。

表2　樣品提取方法考察結(jié)果

結(jié)果：三種提取方式結(jié)果基本一致，所以選擇簡單省時(shí)的直接提取方法。

2.6重復(fù)性試驗(yàn)。

取同一批樣品(110201)按2.2.3項(xiàng)供試品溶液制備方法制備6份樣品溶液，測定峰面積，計(jì)算冰片的含量，結(jié)果見表3。

表3　重復(fù)性試驗(yàn)

結(jié)果：測定6份樣品的RSD為 0.5% ，此方法重復(fù)性好。

2.7回收率試驗(yàn)。

取同一批(110201)已知含量的樣品(冰片含量108.24mg/g)6份，每份取正常取樣量的一半，精密稱定，分別精密加入冰片對(duì)照品6mg，按2.2.3項(xiàng)供試品溶液制備方法制備6份樣品溶液，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，分別注入氣相色譜儀測定含量，結(jié)果見表4。

表4　冰片回收率試驗(yàn)測定結(jié)果

結(jié)果：此方法回收率好，說明準(zhǔn)確度良好。

2.8溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)。

取供試品(110201)溶液，分別在放置0小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)后，注入氣相色譜儀，記錄峰面積。結(jié)果見表5。

表5　溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

結(jié)果：供試品溶液室溫放置8小時(shí)，冰片峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值無顯著變化，表明供試品溶液在8小時(shí)內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。

2.9中間精密度試驗(yàn)。

取同一樣品，由不同分析人員在不同時(shí)間按樣品含量測定方法進(jìn)行測定；測定結(jié)果見表6。

結(jié)論：此方法的中間精密度良好。

2.10 樣品含量限度的確定。

表6　中間精密度試驗(yàn)

按照以上方法測定6批成品中冰片的含量，并以其為依據(jù)制定含量限度。結(jié)果見表7。

結(jié)果測定6批樣品冰片的含量均在80.0～120.0mg/片范圍內(nèi)，并參考冠心蘇合丸中冰片的含量限度，所以暫定本品每片含冰片(C10H18O)應(yīng)為80.0～120.0mg。

3結(jié)論

通過以上冰片含量測定方法學(xué)試驗(yàn)，可以證明此法專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好，中間精密度好，耐用性強(qiáng)，線性試驗(yàn)顯示冰片在0.68～3.494mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，所以此法可準(zhǔn)確有效測定冠心蘇合咀嚼片中冰片的含量，從而更科學(xué)合理地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

[1]中國藥典[S].中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

Study of Guanxinsuhe Chewing Borneol Contents Determination Method

Ma Qianhua

(Heilongjiang Chenpao Island Pharmaceutical Company Ltd, Hulin, Heilongjiang 158400，China)

Key words：Guanxin suhe chewable Tablets; borneol; isoborneol; GC

Class No.:R917Document Mark：A

(責(zé)任編輯：宋瑞斌)