謝秋南

( 海南省臨高縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 海南 臨高 571800)

可使人類發(fā)生感染的支原體(Mycoplasma)有十余種。從泌尿生殖道分離出的解脲支原體(Uu) 和人型支原體(Mh)感染在臨床上較為常見(jiàn)。支原體感染可引發(fā)非特異性尿道炎、輸卵管炎等泌尿生殖系統(tǒng)感染性疾病，甚至可導(dǎo)致女性患者發(fā)生流產(chǎn)或不孕不育等嚴(yán)重的疾病[1]。近年來(lái)，泌尿生殖系統(tǒng)感染性疾病的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，具有多重耐藥性的支原體菌株在臨床上也不斷增多。在這種情況下，很多支原體感染患者出現(xiàn)了病情反復(fù)發(fā)作或久治不愈的情況，其進(jìn)行治療的難度明顯增高。深入探究此病患者感染支原體的情況及相關(guān)支原體對(duì)抗生素的敏感性、耐藥性及耐藥譜在為其進(jìn)行合理的藥物治療、提高其臨床療效方面具有重要的臨床意義。為了分析我院患者發(fā)生泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染的類型及支原體的耐藥情況，我們對(duì)我院收治的1844例患者的泌尿生殖系統(tǒng)標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)及相關(guān)的藥敏試驗(yàn)，然后分析其試驗(yàn)結(jié)果及支原體的耐藥譜，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究中的1844例患者均為2013年7～2014年12月我院婦科、泌尿外科、皮膚性病科收治的患者。在這些患者中，有男性患者332例，女性患者1512例，其年齡為16～64歲，平均年齡為（35.7±14.5）歲。這些患者均經(jīng)臨床病理學(xué)檢查被確診患有泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染，在進(jìn)行本次研究前均未應(yīng)用抗生素進(jìn)行治療，且均非來(lái)我院進(jìn)行泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染復(fù)查的患者。

1.2 標(biāo)本采集

為男性患者采集標(biāo)本的方法是：在清潔其尿道口后，用無(wú)菌小棉拭子插入其尿道口內(nèi)約2cm處，獲取其分泌物。若患者尿道的癥狀不明顯或尿道口的分泌物過(guò)少，可對(duì)其進(jìn)行前列腺按摩，并留取其前列腺液。為女性患者采集標(biāo)本的方法是：在清潔其陰道口后，用無(wú)菌小棉拭子獲取其宮頸的分泌物或陰道的分泌物。在獲取患者的標(biāo)本后將其標(biāo)本置于無(wú)菌管中立即送檢。

1.3 進(jìn)行支原體培養(yǎng)的方法與結(jié)果判讀方法

采用支原體培養(yǎng)鑒定計(jì)數(shù)藥敏試劑盒（鄭州安圖綠科生物工程有限公司生產(chǎn)）對(duì)本組患者的標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)，并對(duì)檢出的支原體進(jìn)行以下12種抗生素的藥敏試驗(yàn)：美滿霉素(MIN) 、強(qiáng)力霉素(DOX)、紅霉素(ERY)、阿齊霉素 (AZl) 、交沙霉素 (JOS)、甲砜霉素 (THI)、克林霉素 (CLI)、克拉霉素(CLA) 、羅紅毒素（ROX）、司帕沙星（SPA）、左氧氟沙星(LEV)、加替沙星(GAT)。嚴(yán)格按照支原體培養(yǎng)鑒定計(jì)數(shù)藥敏試劑盒的操作說(shuō)明書(shū)對(duì)患者的標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定、藥敏試驗(yàn)及結(jié)果判讀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（±S）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，進(jìn)行X2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)本組患者的標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)鑒定結(jié)果的分析

在本組1844例患者的標(biāo)本中共有998例標(biāo)本被檢出支原體感染，其支原體感染的檢出率為54.1%。在本組998例檢出支原體感染的標(biāo)本中，有654例標(biāo)本發(fā)生Uu感染，占65.5%；有312例標(biāo)本發(fā)生了Uu+Mh混合感染，占31.3%；有32例標(biāo)本發(fā)生Mh感染，占3.2%。在本組患者的標(biāo)本中，男性患者、女性患者的標(biāo)本支原體感染的檢出率分別為34.9%和58.3%。與男性患者的標(biāo)本相比，女性患者的標(biāo)本支原體感染的檢出率較高，差異顯著（P＜0.05）。詳情見(jiàn)表1。

2.2 對(duì)本組患者的標(biāo)本中檢出的支原體進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的結(jié)果分析

本組患者標(biāo)本中檢出的支原體對(duì)交沙霉素、加替沙星、強(qiáng)力霉素和美滿霉素較敏感，對(duì)這些抗生素的耐藥率均＜30%。解脲支原體對(duì)甲砜霉素、克林霉素、羅紅霉素、司帕沙星和左氧氟沙星的耐藥率較高，對(duì)紅霉素、阿奇霉素、交沙霉素、克拉霉素、加替沙星和四環(huán)素類藥物的耐藥率較低。人型支原體對(duì)交沙霉素、加替沙星和四環(huán)素類抗生素的耐藥率較低，對(duì)其他大環(huán)內(nèi)酯類抗生索和喹諾酮類抗生素的耐藥率均較高。詳情見(jiàn)表2。

2.3 對(duì)本組患者的標(biāo)本中檢出支原體的耐藥譜分析

本組標(biāo)本中檢出的支原體其耐藥譜涉及的藥物為美滿霉素(M) 、強(qiáng)力霉素(D)、紅霉素(E)、阿齊霉素(A) 、交沙霉素(J)、甲砜霉素(T)、克林霉素(Ci)、克拉霉素(Ca) 、羅紅毒素（R）、司帕沙星（S）、左氧氟沙星(L)、加替沙星(G)。本組患者的標(biāo)本中檢出的解脲支原體有三種主要的耐藥譜，即 -TCi-（25.7%）、-TCi-SL-（22.9% ）、-TCi-S-（14.4%）。本組標(biāo)本中檢出的解脲支原體+人型支原體（混合感染）有4種主要的耐藥譜，即-EA-TCiCaRSLG（20.5%）、-EA-TCiCaRSL-（19.2 %）、-EA-TCiCaRS-（15.4%）、-EA-TCiCaR-（11.5%）。本組標(biāo)本中檢出的人型支原體有3種主要的耐藥譜，即-EA-CaR- （25.0%）、 -EA-TCaR-（25.0%）、-EA-T-CaRSLG（12.5%）。支原體對(duì)四環(huán)素類抗生素的耐藥率最低。美滿霉素、強(qiáng)力霉素、交沙霉素、加替沙星可作為治療支原體感染的首選藥物。詳情見(jiàn)表3：

表1 對(duì)本組患者的標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)鑒定的結(jié)果分析［n（%）］

表2 對(duì)本組患者的標(biāo)本中檢出支原體的耐藥率分析 （%）

表3 對(duì)本組患者標(biāo)本檢出支原體（主要為前五種）的耐藥譜分析

3 討論

支原體是一種無(wú)細(xì)胞壁、大小介于細(xì)菌和病毒之間的微生物，常寄生在泌尿生殖道的黏膜表面。臨床上常見(jiàn)的支原體感染包括Uu感染和Mh感染等。此類支原體感染的傳播途徑主要是母嬰傳播和性傳播。本研究的結(jié)果顯示，在本組998例檢出支原體感染的標(biāo)本中，有654例標(biāo)本發(fā)生Uu感染，占65.5%；有312例標(biāo)本發(fā)生Uu+Mh混合感染，占31.3%；有32例標(biāo)本發(fā)生Mh感染，占3.2%。這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)的報(bào)道相似[2-3]?？梢?jiàn)，Mh感染在臨床上多以混合感染的形式發(fā)生[2-4],這可能與Uu感染可使人體內(nèi)的局部環(huán)境趨于堿性，進(jìn)而增加Mh感染的發(fā)生率有關(guān)[5]。與男性患者的標(biāo)本相比，本研究中女性患者的標(biāo)本支原體感染的檢出率較高，差異顯著（P＜0.05）。這可能是因?yàn)?，男性與女性的泌尿生殖系統(tǒng)具有較大的差別，女性泌尿生殖系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及血液循環(huán)的狀況更適合支原體依附與繁殖[2]。根據(jù)支原體無(wú)細(xì)胞壁的特點(diǎn)，臨床上在治療支原體感染時(shí)主要應(yīng)用四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素等可干擾支原體蛋白質(zhì)合成的抗生素或喹諾酮類藥物等能阻止支原體DNA復(fù)制的抗生素。近年來(lái)的研究表明：Uu和Mh發(fā)生耐藥的主要原因是其具有獲得性teM耐藥基因[6]。支原體染色體上旋轉(zhuǎn)酶的基因發(fā)生改變可導(dǎo)致DNA旋轉(zhuǎn)酶靶位的改變，進(jìn)而產(chǎn)生耐藥性。在本研究中，Uu對(duì)甲砜霉素、克林霉素、羅紅霉素、司帕沙星和左氧氟沙星的耐藥率較高，對(duì)紅霉素、阿奇霉素、交沙霉素、克拉霉素、加替沙星和四環(huán)素類藥物的耐藥率較低。人型支原體對(duì)交沙霉素、加替沙星和四環(huán)素類抗生素的耐藥率較低，對(duì)其他大環(huán)內(nèi)酯類抗生索和喹諾酮類抗生素的耐藥率均較高[7]。這可能與喹諾酮類抗生素和大環(huán)內(nèi)酯類抗生素在治療泌尿生殖道感染方面的使用率較高有關(guān)。從本研究中表2的數(shù)據(jù)可以看出，支原體對(duì)在臨床上應(yīng)用較早的喹諾酮類抗生素存在不同程度的耐藥性，對(duì)十六環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素中的JOS和喹諾酮類抗生素中的GAT較敏感，這可能與JOS、GAT在臨床上應(yīng)用較少有關(guān)。從本研究中表3的數(shù)據(jù)可以看出，本組患者的標(biāo)本中檢出的解脲支原體有3種主要的耐藥譜， 即 -TCi-(25.7%)、 -TCi-SL- (22.9%)、 -TCi-S-(14.4%)。本組患者的標(biāo)本中檢出的解脲支原體混合感染有4種主要的耐藥譜，即 -EA-TCiCaRSLG(20.5%) 、-EA-TCiCaRSL-(19.2%) 、-EA-TCiCaRS-(15.4%)、 -EA-TCiCaR-（11.5%）。本組患者的標(biāo)本中檢出的人型支原體有3種主要的耐藥譜， 即 -EA-CaR-(25.0%)、-EA-T-CaR-(25.0%) 、-EAT-CaRSLG (12.5%)。在這些耐藥譜中，發(fā)生混合感染的支原體表現(xiàn)出多重耐藥的特點(diǎn)。Mh具有多種耐藥基因，其結(jié)構(gòu)特殊。有研究表明，Mh對(duì)十四元環(huán)、十五元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素具有天然的耐藥性[8]。在發(fā)生Uu和Mh混合感染時(shí)，多種耐藥機(jī)制可同時(shí)發(fā)揮作用而導(dǎo)致交叉耐藥，使耐藥譜擴(kuò)大。臨床研究發(fā)現(xiàn)，gyrA基因突變可引起Mh對(duì)喹諾酮類藥物交叉耐藥，攜帶鏈球菌耐四環(huán)素基因tet M的Uu和Mh可能對(duì)四環(huán)素耐藥[9]。另外，濫用抗生素可使低敏感或不敏感的抗生素或低濃度的抗生素長(zhǎng)期和Mh接觸，誘導(dǎo)Mh產(chǎn)生耐藥基因。易發(fā)生耐藥是導(dǎo)致混合支原體感染難以治愈和易復(fù)發(fā)的主要原因之一。

綜上所述，本研究中患者發(fā)生的支原體感染主要為解脲支原體感染及解脲支原體與人型支原體混合感染，解脲支原體的耐藥譜較為集中,在發(fā)生混合感染時(shí)解脲支原體與人型支原體可存在多重耐藥。人型支原體對(duì)四環(huán)素類藥物和交沙霉素、加替沙星耐藥率較低。在對(duì)支原體感染患者進(jìn)行治療時(shí)應(yīng)進(jìn)行支原體培養(yǎng)及相關(guān)的藥敏試驗(yàn)，并根據(jù)對(duì)其進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的結(jié)果為其有針對(duì)性的選用藥物，或?qū)ζ溥M(jìn)行聯(lián)合用藥治療，以降低其感染的支原體發(fā)生耐藥的幾率。若不能對(duì)此病患者進(jìn)行支原體培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)，可首選交沙霉素、加替沙星、強(qiáng)力霉素和美滿霉素對(duì)其進(jìn)行治療。

[1] 陶冶．解脲脲原體感染與輸卵管性不孕的相關(guān)性探討【J】．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(2)：1308-1309．

[2] 鄧享．泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染情況及藥敏趨勢(shì)分析【J】．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32(1)：29—32．

[3] 張鳳．泌尿生殖道支源體感染現(xiàn)狀及藥物敏感性分析【J】．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27(3)：225-226．

[4] 張正國(guó)，賀慶偉，胡玥．泌尿生殖道支源體屬感染特點(diǎn)及耐藥性分析【J】．中國(guó)感染與化療雜志，2014，14(1)：18-21．

[5] Zhu C，Liu J，Ling Y，et al．Prevalence and antimicrob ial susceptibility of Ureaplasma urealyticum and Mycopl asma hominins in Chinese women with genital infectious diseases 【J】．Indian J Dermatol Venereol Leprol，2012，78(3)：406-407．

[6] 蘇忠龍，黃義山，廖濤，等．青壯年泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染及藥物敏感性【J】．臨床與實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9(18)：1395

[7] 匡芳梅，蔣翠萍．泌尿生殖系統(tǒng)支原體感染與藥物敏感性分析【J】．吉林醫(yī)學(xué)， 2013，34(33)：6969．

[8] Beeton ML，Chalker VJ，Maxwell NC，et al．Concurrent titration and determination of antibiotic resistance in ureaplasma species with identification of nover point mutations in genes associater with resistance【J】．Anti microb Agents Chemother，2009，53(5)：2020-2027．

[9] 孟冬婭，王璐，馬均，等．人型支源體對(duì)喹諾酮類藥物耐藥機(jī)制的初步研究【J】．中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2010，24(11)：997-999．2015－08－03.