黃秀云

【摘要】 目的 對(duì)比化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法（CLEIA）與酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)乙型肝炎（乙肝）病毒標(biāo)志物的效果。方法 200例疑似乙型肝炎患者， 空腹靜脈采血， 分離血清。對(duì)200份血清分別進(jìn)行化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)5種乙肝病毒標(biāo)志物， 比較兩種方法乙肝病毒標(biāo)志物檢出率及靈敏度。結(jié)果 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法對(duì)乙肝表面抗原（HBsAg）及乙肝e抗體（HBeAb）的檢出率明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；但兩種方法對(duì)乙肝病毒e抗原（HBeAg）、 乙肝核心抗體（HBcAb）、乙肝表面抗體（HBsAb）的檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法的檢測(cè)靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附法。結(jié)論 相比于酶聯(lián)免疫吸附法， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法靈敏度高， 特異性強(qiáng)， 用于乙肝病毒標(biāo)志物的檢測(cè)準(zhǔn)確率高。

【關(guān)鍵詞】 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法；酶聯(lián)免疫吸附法；乙型肝炎病毒標(biāo)志物；效果

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.01.011

我國(guó)是乙肝病毒感染疫情嚴(yán)重的國(guó)家， 我國(guó)人口中約有1/10為乙肝病毒攜帶者[1]。乙肝病毒標(biāo)志物是檢測(cè)乙肝病毒感染的直接證據(jù)， 同時(shí)， 可通過(guò)監(jiān)測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物觀察患者病情、評(píng)價(jià)藥物治療效果。目前， 臨床常用的乙肝病毒標(biāo)志物監(jiān)測(cè)的方法為酶聯(lián)免疫吸附法， 隨著化學(xué)發(fā)光酶免疫分析技術(shù)的不斷發(fā)展， 其在檢測(cè)上的應(yīng)用也逐漸為人們所重視， 且在乙肝病毒標(biāo)志物的檢測(cè)中應(yīng)用效果良好。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院傳染科2013年1月～2014年1月門診疑似乙型肝炎患者200例作為本次的研究對(duì)象。其中， 男108例， 女92例， 年齡19～68歲， 平均年齡（38.1±12.8）歲， 患者經(jīng)基礎(chǔ)檢查， 無(wú)其他傳染性疾病及肝臟器質(zhì)性病變。

1. 2 方法 所有患者均空腹采用靜脈采血方式， 抽取適量血液。室溫下離心分離15 min， 分離血清以備檢測(cè)。

1. 2. 1 儀器及試劑選擇 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法選擇實(shí)驗(yàn)儀器為鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的LUMO半自動(dòng)分析儀， 乙肝病毒標(biāo)志物定量檢測(cè)試劑為鄭州安圖生物工程有限公司試劑盒；酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物試劑為上海科華生物工程股份有限公司試劑盒， 選擇實(shí)驗(yàn)儀器為芬蘭生產(chǎn)的W-k3酶標(biāo)儀。

1. 2. 2 檢測(cè)方法 對(duì)采集的200份血清標(biāo)本分別采用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)， 每次以定值參比血清作為質(zhì)控， 檢測(cè)方法嚴(yán)格按照儀器及試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。酶聯(lián)免疫吸附法采用手工添加樣品， 檢測(cè)結(jié)果根據(jù)酶標(biāo)儀結(jié)果顯示判定為陽(yáng)性或陰性；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法采用全自動(dòng)加樣器添加樣品， 用LUMO半自動(dòng)分析儀定量檢測(cè)結(jié)果。

另取1.0 ng/ml HBsAg定值參比血清， 兩倍稀釋后分別采用以上兩種檢測(cè)方法檢驗(yàn)， 測(cè)定兩種檢驗(yàn)方法的最低濃度。

1. 3 判定標(biāo)準(zhǔn)[2] 檢測(cè)結(jié)果大于參考值的上限為陽(yáng)性， 5項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的上限標(biāo)準(zhǔn)分別為HBsAg：0.2 ng/ml， HBeAg：0.05 NCU/ml， HBeAb：2.0 NCU/ml， HBcAb：1.5 NCU/ml， HBsAb：10.0 mIU/ml。對(duì)單獨(dú)一項(xiàng)為陽(yáng)性或弱陽(yáng)性或雙陽(yáng)性標(biāo)本設(shè)置雙空復(fù)查， 結(jié)果仍為陽(yáng)性的則判定為陽(yáng)性。分別統(tǒng)計(jì)各檢測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性、陰性的例數(shù)。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩種方法檢測(cè)5種乙肝標(biāo)志物陽(yáng)性結(jié)果比較 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法對(duì)HBsAg及HBeAb的檢出率明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法（P<0.05）；兩種方法對(duì)HBeAg、 HBcAb、HBsAb的檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。

2. 2 靈敏度檢測(cè) 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)的最低濃度為0.12 ng/ml， 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)的最低濃度為0.4 ng/ml。化學(xué)免疫酶免疫分析法的檢測(cè)靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附法。

3 討論

乙肝病毒血清標(biāo)志物[2]是乙型病毒性肝炎的主要病原標(biāo)志， 基于我國(guó)嚴(yán)峻的乙型肝炎疫情與不斷增加的乙型肝炎患者， 采用有效的病原標(biāo)志物檢測(cè)方法對(duì)乙肝的早期防治與乙肝藥物治療效果的評(píng)定具有重要意義。

酶聯(lián)免疫吸附法[3]是檢測(cè)乙肝標(biāo)志物的目前應(yīng)用最廣泛的方法， 采用人工加樣， 具有操作簡(jiǎn)單、快捷的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)。但通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)[4]， 乙肝病毒測(cè)定結(jié)果為弱陽(yáng)性患者在復(fù)查中也容易出現(xiàn)時(shí)陰時(shí)陽(yáng)的情況， 采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行復(fù)查， 結(jié)果的重復(fù)性較差， 說(shuō)明酶聯(lián)免疫吸附法靈敏性不高， 對(duì)臨界結(jié)果的檢測(cè)效率低。同時(shí)， 酶聯(lián)免疫吸附法容易受試劑盒質(zhì)量、儀器校準(zhǔn)、工藝差別等眾多原因的影響， 其檢測(cè)結(jié)果可能存在較大差別， 穩(wěn)定性較差。隨著化學(xué)發(fā)光酶免疫分析技術(shù)的不斷發(fā)展， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒標(biāo)志物的檢測(cè)中逐步展現(xiàn)了其較高的應(yīng)用價(jià)值?；瘜W(xué)發(fā)光酶免疫分析法是借助發(fā)光底物自身的發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)定的分析技術(shù)， 相比于酶聯(lián)免疫吸附法靈敏度較高。本次調(diào)查結(jié)果對(duì)200份血清樣本分別進(jìn)行化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物， 結(jié)果顯示， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析對(duì)HBsAg的檢出率為60.0%， 對(duì)HBeAb的檢出率為24.0%， 明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法的54.5%、17.5%（P<0.05）；另經(jīng)靈敏度檢測(cè)， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)的最低濃度為0.12 ng/ml， 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)的最低濃度為0.4 ng/ml， 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法的檢測(cè)靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附法。

綜上所述， 酶聯(lián)免疫吸附法具有操作簡(jiǎn)單、方便快捷的優(yōu)勢(shì)， 但化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法可有效檢測(cè)出病毒標(biāo)志物中的假陰性情況， 檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性高、重復(fù)率高， 對(duì)準(zhǔn)確顯示乙肝病毒的感染進(jìn)程、評(píng)價(jià)抗病毒治療效果具有重要意義。為保證測(cè)定效果， 臨床采用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確， 可有效減少漏檢、誤檢的發(fā)生率。

參考文獻(xiàn)

[1] 廖奕.化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物的比較. 大家健康（學(xué)術(shù)版）， 2014（10）：48-49.

[2] 郭輝. 化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙肝病毒標(biāo)志物的相關(guān)性分析. 中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué)， 2013， 2（5）：270-272.

[3] 安靜娜， 李冬冬， 陳其霞， 等. 電化學(xué)發(fā)光免疫法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物的結(jié)果分析. 中國(guó)輸血雜志， 2015， 10（4）：374-376.

[4] 張曉紅， 張倩， 周學(xué)紅， 等. 化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物模式分析. 標(biāo)記免疫分析與臨床， 2014， 11（4）：455-457.

[收稿日期：2015-08-11]