維生素D3對稽留流產(chǎn)患者血清CD4、CD8、IFN-γ和IL-4的影響

李慶

(莞城醫(yī)院婦產(chǎn)科，東莞523000)

摘要：目的 探討維生素D3對稽留流產(chǎn)患者血清中CD4、CD8、IFN-γ和IL-4的影響。方法 選取2011年1月～2014年1月在我院產(chǎn)科治療的早期稽留流產(chǎn)患者30例作為試驗組對象，同時選取正常妊娠早期婦女30例作為對照組，利用流式細胞儀和酶聯(lián)免疫吸附法，分別測定維生素D3干預(yù)受試者血清中的CD4、CD8、干擾素-γ (IFN-γ)和白介素-4(IL-4)的質(zhì)量濃度。結(jié)果 干預(yù)前，實驗組的CD4細胞百分率(41.01%±8.46%)明顯高于對照組，而CD8細胞百分率(25.05%±5.86%)明顯低于對照組，試驗組IFN-γ質(zhì)量濃度(28.96±10.76 ng·L-1)明顯高于對照組，IL-4質(zhì)量濃度(13.16±8.37 ng·L-1)顯著低于對照組，各組統(tǒng)計結(jié)果具有明顯差異，而經(jīng)過維生素D3干預(yù)治療后，試驗組各指標(biāo)與干預(yù)前有明顯變化，CD4細胞百分率、IFN-γ明顯降低，而CD8、IL-4明顯升高，具有明顯差異(P<0.05)。結(jié)論 稽留流產(chǎn)患者血清中CD4、CD8、IFN-γ和IL-4比例較正常孕婦會有失調(diào)，在經(jīng)過維生素D3的干預(yù)治療后，稽留流產(chǎn)產(chǎn)婦血清中指標(biāo)各比例會有所緩解，具有一定的治療作用。

關(guān)鍵詞：維生素D3；稽留流產(chǎn)；CD4；CD8；IFN-γ；IL-4

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2015.06.023

中圖分類號：R984文獻標(biāo)志碼：A

收稿日期：(2015-03-23)

Influence of vitamin D3on the serum CD4,CD8,IFN-γ and IL-4 levels in the missed abortion patients

LI Qing(Obstetrics and Gynecology Department of the Hospital of Guan City，Dongguan 523000，China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the influence of vitamin D3 on the serum CD4,CD8,IFN-γ,IL-4 levels in the missed abortion patients. Methods20 early missed abortion patients treated in the obstetric department of our hospital from January 2011 to January 2011 were selected as the experimental research objects. 20 cases normal early pregnancy women were selected as the control group. The serum CD4,CD8,IFN-γ,IL-4 levels of the missed abortion patients were measured by flow cytometry instrument and enzyme-linked immunosorbent method before and after vitamin D3 intervention. The serum CD4,CD8,IFN-γ,IL-4 levels were measured. Results Before the intervention，the CD8 cells percentage of the experimental group was (41.01%±8.46%)，higher than that of the control group(P<0.05).The CD8 cells percentage of the experimental group was (25.05%±5.86%)，lower than that of the control group(P<0.05).The IFN-γ level of the experimental group was (28.96±10.76)ng·L-1，higher than that of the control group(P<0.05). The IL-4 level of the experimental group was (13.16±8.37)ng·L-1，lower than that of the control group(P<0.05). And after vitamin D3 intervention therapy，the experimental group have obviously changed，there was significant difference before the intervention in each index (P<0.05). ConclusionsThe serum CD4，CD8， IFN-γ，IL-4 ratio of the missed abortion patients showed disorder comparing with the normal pregnant women.For the missed abortion patients, the maternal serum index would be eased after vitamin D3 intervention treatment.

Key words: vitamin D3；missed abortion patients；CD4；CD8；IFN-γ；IL-4

在人類胎盤和蛻膜中存在著VDR和各種酶包括維生素D羥化酶，目前有越來越多的研究表明，維生素D3復(fù)合物作為母胎免疫調(diào)節(jié)活動中的一個潛在的免疫調(diào)節(jié)分子的行為，在孕婦生殖功能中發(fā)揮著重要作用[1-2]?；袅鳟a(chǎn)又稱為過期流產(chǎn)或死胎不下，胚胎死亡后仍稽留于宮腔內(nèi)者，且孕產(chǎn)物一般多在癥狀產(chǎn)生后1～2個月內(nèi)排出，屬于自然流產(chǎn)中一種較為特殊的類型，發(fā)病機制較為復(fù)雜[3-4]。目前已有研究資料表明，稽留流產(chǎn)的發(fā)病機制與孕婦母體的免疫機制有關(guān)，而維生素D3又可以為母體起到一定的調(diào)節(jié)作用。為了探究稽留流產(chǎn)患者的發(fā)病免疫機制，我院嘗試對維生素D3是否可以影響稽留流產(chǎn)患者血清中CD4、CD8、IFN-γ、IL-4的含量及質(zhì)量濃度進行研究，已取得理想效果。

1資料與方法

1.1一般資料選取2011年1月～2014年1月在我院產(chǎn)科治療的早期稽留流產(chǎn)患者30例作為試驗組研究對象，經(jīng)過婦科、超聲等檢查，試驗組夫婦腹中胚胎染色體均正常，排除患者器質(zhì)性病變和生殖器官解剖畸形癥狀；所有入組孕婦的月經(jīng)周期、體溫、血糖、甲狀腺功能以及內(nèi)分泌功能正常。試驗組年齡為21～33歲，平均年齡25.03±2.43歲，停經(jīng)時間范圍為63～75 d，平均70.13±5.32 d，經(jīng)過對體質(zhì)量體數(shù)評估，試驗組體質(zhì)量指數(shù)范圍為20.67～24.93 kg·m-2，平均22.01±2.51 kg·m-2。對照組年齡為23～35歲，平均26.32±2.71歲，體質(zhì)量指數(shù)范圍為20.56～24.99 kg·m-2，平均21.31±2.22 kg·m-2。經(jīng)檢驗，所有患者均無1例為精液、感染、病毒等引起的稽留流產(chǎn)。經(jīng)統(tǒng)計，2組孕婦在年齡、學(xué)歷以及體質(zhì)量指數(shù)等一般資料方面均無明顯差異(P>0.05)，資料具有可比性。

1.2方法

1.2.1CD4和CD8的檢測取稽留流產(chǎn)婦女肝素外周血100 μL為研究樣本，加入熒光標(biāo)記的抗CD4和CD8的單克隆抗體15 μL，避光放置，約15 min，經(jīng)過離心處理后，棄上清液，加入質(zhì)量濃度為0.1 mol·L-1的多聚甲醛進行檢測，采用CellQest分析。

1.2.2細胞因子的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)( EA1571-9601G(ELISA IgG) )，檢測稽留流產(chǎn)孕婦細胞因子IFN-γ和IL-4質(zhì)量濃度，具體操作按照試劑盒說明書進行。

1.2.3維生素D3的使用根據(jù)患者病情，肌內(nèi)注射，每次7.5～15 mg(30～60萬單位)，病情嚴(yán)重者可于2～4周后重復(fù)注射1次。定期為患者進行血清尿素氮、肌酐和肌酐清除率、血清堿性磷酸酶、血磷、24 h尿鈣、尿鈣與肌酐的比值、血鈣(用治療量維生素D3時應(yīng)定期作監(jiān)測，維持血鈣濃度2.00～2.50 mmol·L-1)，并進行骨X線檢查等。

1.3研究方式首先對實驗組及對照組CD4、CD8、IFN-γ和IL-4進行檢測、比較，之后對試驗組進行維生素D3治療，再次測量試驗組患者治療前后各項指標(biāo)值。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，2組患者血清CD4、CD8、IFN-γ和IL-4水平以(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，計量資料進行t檢驗。

2.12組研究對象各項治療值對比結(jié)果證明，2組的CD4、CD8、IFN-γ和IL-4水平均具有明顯差異(P<0.05)，如表1所示。

表12組研究對象各項治療值對比

Tab.1Comparison of the two groups of various therapeutic values

組別例數(shù)CD4/%CD8/%IFN-γ/ng·L-1IL-4/ng·L-1實驗組3041.02±8.5125.07±5.7128.98±9.7313.15±8.33對照組3031.32±7.6927.43±6.1118.09±7.1025.89±9.83t-13.243.7614.5416.38P-<0.05<0.05<0.05<0.05

2.2維生素D3治療后試驗組患者各指標(biāo)比較對試驗組進行維生素D3治療后，各指標(biāo)較治療前有所緩解，與治療前有明顯差異(P<0.05)，如表2所示。

表2維生素D3治療后實驗組患者各指標(biāo)比較

Tab.2 Comparison of the index before and after vitamin D3treatment

組別例數(shù)CD4/%CD8/%IFN-γ/ng·L-1IL-4/ng·L-1治療前3041.02±8.5125.07±5.7128.98±9.7313.15±8.33治療后3035.41±6.7126.51±5.0923.90±6.6618.81±6.90t-7.889.356.877.94P-<0.05<0.05<0.05<0.05

3討論

稽留流產(chǎn)是一種較為特殊的流產(chǎn)形式，屬于自然流產(chǎn)。近年來發(fā)現(xiàn)，稽留流產(chǎn)與以下因素有關(guān)：①精神壓力:過度緊張、焦慮、恐懼、憂傷等；②遺傳基因缺陷:如染色體異常、夫妻一方染色體變異、夫妻血型不合；③不良習(xí)慣：如過量吸煙、酗酒、過量飲咖啡、吸食海洛因等；④環(huán)境因素:如經(jīng)常接觸砷、鉛、甲醛、苯、氯丁二烯、氧化乙烯等化學(xué)物質(zhì)或放射因素；⑤母體疾病:如生殖器官異常和子宮腫瘤，單純皰疹病毒，巨細胞病毒感染等；⑥分泌異常：如嚴(yán)重糖尿病未能控制，黃體功能不足，甲狀腺功能減退癥等。然而，越來越多研究表明，稽留流產(chǎn)患者的免疫功能較正常人會出現(xiàn)異常，妊娠類似同種異體移植，胚胎與母體間存在著復(fù)雜而特殊的免疫學(xué)關(guān)系，使胚胎不被排斥.若母子雙方免疫不適應(yīng)，則可引起母體對胚胎排斥而致流產(chǎn)。因此，如何改善和緩解稽留流產(chǎn)癥狀，洞悉稽留流產(chǎn)患者的血清免疫指標(biāo)的特點，逐漸會成為醫(yī)療界研究的熱點[5-7]。

在此次研究中發(fā)現(xiàn)，稽留流產(chǎn)患者與正常妊娠早期婦女之間存在較大差異(P<0.05)，如表1所示，CD4的含量明顯高于正常妊娠婦女，CD4、CD8作為人體免疫T細胞的較大的亞群，與人體的免疫功能存在直接關(guān)系，尤其是CD8，可以殺傷患者體內(nèi)靶細胞和抑制有機體的免疫應(yīng)答，而稽留流產(chǎn)極易導(dǎo)致CD8細胞下降，也有學(xué)者經(jīng)過對稽留流產(chǎn)患者的淋巴細胞研究發(fā)現(xiàn)，CD4細胞顯著增加，CD8細胞明顯減少，與本次研究結(jié)果相印證。對試驗組患者進行維生素D3治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗組患者的CD4、CD8含量較治療前有明顯變化，含量更趨近于正常婦女的這兩項指標(biāo)。

其次，在血清中IFN-γ和IL-4的質(zhì)量濃度方面，IFN-γ值明顯高于對照組，而IL-4值明顯低于對照組，說明稽留流產(chǎn)患者的IFN-γ和IL-4 2項指標(biāo)與正常妊娠婦女有明顯性差異(P<0.05)，接受維生素D3治療后，各項指標(biāo)異常程度有所緩解，結(jié)合其對CD4和CD8的治療效果，可以推測，維生素D3對患者的CD4、CD8、IFN-γ和IL-4各項指標(biāo)的異常有一定程度的緩解。

在此次研究中，由研究結(jié)果進行推斷，維生素D3對稽留流產(chǎn)患者的免疫功能有一定的調(diào)節(jié)作用，可以抑制CD4、CD8、IFN-γ和IL-4等各指標(biāo)的異常程度[8-10]。綜上所述，維生素D3可以明顯緩解稽留流產(chǎn)患者血清中的CD4、CD8、IFN-γ和IL-4的異常程度，有可能為稽留流產(chǎn)患者的治療提供一種新思路。

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