摘要：目的 探討兩種不同型號(hào)生化儀測(cè)定總蛋白和白蛋白結(jié)果的可比性。方法 按照NCCLS EP9-A2文件的要求，以日立7600生化分析儀為實(shí)驗(yàn)儀器（Y），貝克曼AU5800生化儀為比對(duì)儀器（X），收集住院及門診患者高、中、低濃度血清分別在兩臺(tái)生化儀上測(cè)定，對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行分析比對(duì)及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果 兩種不同型號(hào)生化儀間檢測(cè)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），檢測(cè)結(jié)果明顯相關(guān)（r2>0.95），總蛋白和白蛋白的相關(guān)系數(shù)分別為0.991和0.995，兩臺(tái)儀器間不同醫(yī)學(xué)決定水平測(cè)定結(jié)果的相對(duì)偏差均在允許誤差范圍內(nèi)。結(jié)論 兩臺(tái)儀器測(cè)定總蛋白和白蛋白結(jié)果有較好的可比性。

關(guān)鍵詞：可比性；總蛋白；白蛋白；生化分析儀

目前，由于檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，許多醫(yī)院檢驗(yàn)科都配備多臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀，同一檢測(cè)項(xiàng)目在不同生化儀檢測(cè)已相當(dāng)普遍[1]，而不同的儀器測(cè)定結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確度等會(huì)存在差異，那么判斷不同儀器檢測(cè)結(jié)果的可比性顯得尤為重要[2]。目前我科使用的大型儀器有日立7600和貝克曼AU5800生化分析儀。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)ISO/IEC17025（檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的專用要求）[3]和ISO/15189（醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一質(zhì)量和能力的專用要求）[4]，參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法案CLIA’88和EP9-A2文件[5]中有關(guān)質(zhì)量評(píng)估的要求，本研究對(duì)兩種檢測(cè)系統(tǒng)的總蛋白和白蛋白測(cè)定結(jié)果進(jìn)行方法比對(duì)和偏倚評(píng)估，并判斷其臨床可接受性。

1資料與方法

1.1一般資料 來自本院住院及門診患者，收集剔除溶血、黃疸和脂濁等影響因素的新鮮血清標(biāo)本。包括總蛋白和白蛋白高、中、低濃度血清。

1.2檢測(cè)系統(tǒng)的組成 比對(duì)儀器（X）：日立7600全自動(dòng)生化分析儀以及與之配套的同一批號(hào)的中生北控試劑，cfas校準(zhǔn)品和BIO-RAD質(zhì)控品組成；試驗(yàn)儀器（Y）：貝克曼AU5800全自動(dòng)生化分析儀以及配套的原裝試劑，校準(zhǔn)品和BIO-RAD質(zhì)控品組成；嚴(yán)格按照儀器操作說明書進(jìn)行操作，并保證儀器使用良好和室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下檢測(cè)標(biāo)本。

1.3方法

1.3.1試驗(yàn)標(biāo)本的測(cè)定 每日選出不同濃度的8個(gè)新鮮標(biāo)本，每個(gè)標(biāo)本分為2份分別置于各檢測(cè)系統(tǒng)常規(guī)工作中測(cè)定，2份樣品順向反向排列各1次，第1次測(cè)定順序?yàn)?、2、3、4、5、6、7、8；第2次測(cè)定順序?yàn)?、7、6、5、4、3、2、1，所有標(biāo)本在各檢測(cè)系統(tǒng)上的測(cè)定均在2 h內(nèi)完成。

1.3.2數(shù)據(jù)收集與處理

1.3.2.1不同檢測(cè)系統(tǒng)間測(cè)定結(jié)果比較 采用配對(duì)t檢驗(yàn)對(duì)比對(duì)系統(tǒng)和試驗(yàn)系統(tǒng)上同一項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。所有數(shù)據(jù)處理均在Excel 2013和 SPSS 22.0軟件上進(jìn)行。

1.3.2.2按照EP9-A2文件要求進(jìn)行離群值篩查并判斷 通過計(jì)算每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測(cè)定值間的均值、差值及兩種方法測(cè)定結(jié)果均值問的差值，超過均值的4倍為離群值，繪制散點(diǎn)圖粗略進(jìn)行組間離群值檢查。若離群值大于1應(yīng)調(diào)查標(biāo)本。

1.3.2.3用Excel 2013計(jì)算相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析并求線性回歸方程：y=bx+a根據(jù)兩種儀器分別檢測(cè)總蛋白和白蛋白的結(jié)果，AU5800生化儀為實(shí)驗(yàn)儀器（Y），日立7600生化儀為比對(duì)儀器（X），用EXCEL軟件確定直線回歸方程。

1.3.2.4檢測(cè)系統(tǒng)（X）測(cè)定范圍的檢驗(yàn) X的分布范圍是否合適可用它與比較檢測(cè)系統(tǒng)之間的相關(guān)系數(shù)（r）來粗略估計(jì)，若r≥0.975或r2≥0.95，則認(rèn)為X范圍合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠；如r<0.975，則說明實(shí)驗(yàn)方法的精密度較差或X的范圍不合適，直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距不可靠，需改善方法的精密度、重新選取實(shí)驗(yàn)標(biāo)本或擴(kuò)大標(biāo)本量后重新試驗(yàn)。

1.3.2.5檢測(cè)系統(tǒng)問的系統(tǒng)誤差分析 根據(jù)臨床要求，將給定的總蛋白和白蛋白的3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平濃度Xc代人回歸方程，計(jì)算檢測(cè)系統(tǒng)（Y）與檢測(cè)系統(tǒng)（X）之間的系統(tǒng)誤差（SE）。計(jì)算實(shí)驗(yàn)方法（Y）與比較方法（X）之間的系統(tǒng)誤差SE，SE=|Yc-Xc|，系統(tǒng)誤差率（SE%）=SE/Xc×100%。

1.3.2.6檢測(cè)結(jié)果的臨床可接受性能判斷 以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法案（CLIA' 88）規(guī)定的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的1/2為臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)，各個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)間系統(tǒng)誤差是否可以接受以醫(yī)學(xué)決定水平處的系統(tǒng)誤差來判斷。

2結(jié)果

2.1新鮮血清總蛋白和白蛋白在兩臺(tái)儀器上測(cè)定結(jié)果間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2新鮮血清標(biāo)本總蛋白和白蛋白在兩臺(tái)儀器上測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析 以AU5800生化儀為實(shí)驗(yàn)儀器（Y），日立7600生化儀為比對(duì)儀器（X）進(jìn)行相關(guān)與回歸分析，見表2?？偟鞍缀桶椎鞍自趦煞N儀器上的相關(guān)系數(shù)均>0.975，說明回歸統(tǒng)計(jì)斜率和截距可靠，X取值范圍合適，可以用于估計(jì)不同檢測(cè)系統(tǒng)間的系統(tǒng)誤差，并以醫(yī)學(xué)決定水平處的系統(tǒng)誤差來判斷不同檢測(cè)系統(tǒng)間是否具有可比性。

2.3各組不同醫(yī)學(xué)決定水平測(cè)定的偏差 兩臺(tái)儀器預(yù)估的系統(tǒng)偏差及1/2 Ea，見表3。從表中可看出各種水平均在允許誤差范圍內(nèi)。說明2臺(tái)儀器測(cè)定白蛋白、總蛋白結(jié)果具有較好的可比性。

3討論

總蛋白和白蛋白是臨床上反應(yīng)肝功能狀況的常用指標(biāo)，兩者的變化情況對(duì)臨床診斷和療效都有非常重要的意義。隨著實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化程度的不斷提高，使用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)項(xiàng)目也日益增多，同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)多種檢測(cè)系統(tǒng)的情況越來越普遍，保證各個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)間的檢測(cè)結(jié)果具有可比性，對(duì)臨床及時(shí)提供快速準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果具有重要作用。

本研究采用了日立7600和貝克曼AU5800兩種檢測(cè)系統(tǒng)，其中日立7600使用的試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品可溯源，且性能穩(wěn)定，參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)成績(jī)優(yōu)秀，定期定標(biāo)，每天質(zhì)控在控，而且總蛋白和白蛋白結(jié)果重復(fù)性好，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，因此可作為實(shí)驗(yàn)儀器。從統(tǒng)計(jì)結(jié)果可以看到，兩種檢測(cè)系統(tǒng)間的總蛋白和白蛋白測(cè)定結(jié)果的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，相關(guān)和回歸分析表明，兩種檢測(cè)系統(tǒng)間的相關(guān)系統(tǒng)都>0.975，說明X取值范圍合適，直線回歸的斜率和截距可靠，可以用回歸統(tǒng)計(jì)的方法分析兩種檢測(cè)系統(tǒng)之間的系統(tǒng)誤差。兩種生化檢測(cè)系統(tǒng)的相關(guān)系數(shù)r2>0.95，表明兩種檢測(cè)系統(tǒng)的相關(guān)性比較好。由表3可見大部分檢測(cè)項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)結(jié)果在各自的醫(yī)學(xué)決定水平的相對(duì)偏差均<1/2 CLIA'88，表明兩種檢測(cè)系統(tǒng)間的系統(tǒng)誤差能夠?yàn)榕R床接受，具有可比性。

綜上所述，日立7600和貝克曼AU5800生化分析儀檢測(cè)總蛋白和白蛋白的結(jié)果具有可比性，不影響為臨床提供相應(yīng)準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。

參考文獻(xiàn)：

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[5]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples. Approved Guideline， second edition， EP9-A2 [M].Wayne，PA， USA： NCCLS，2002.

編輯/肖慧