摘要：目的 觀察芪榆油紗布對(duì)創(chuàng)面肉芽組織中bFGF表達(dá)的影響。方法 選取48只雄性3月齡SD大鼠背部全層皮膚切除建立大鼠模型，將其隨機(jī)分為三組，分別予凡士林、龍珠軟膏、芪榆油；分別對(duì)用藥3、7、12d后創(chuàng)面肉芽組織中bFGF 的表達(dá)情況、毛細(xì)血管的含量及創(chuàng)面愈合的時(shí)間進(jìn)行檢測(cè)和觀察。結(jié)果 用藥第3d芪榆油紗布與龍珠軟膏組明顯差異，均明顯優(yōu)于凡士林組，用藥第7d、12d時(shí)，芪榆油紗布組在bFGF的表達(dá)、毛細(xì)血管的含量及創(chuàng)面愈合情況略優(yōu)于龍珠軟膏組，明顯優(yōu)于凡士林組。結(jié)論 說(shuō)明芪榆油紗布對(duì)bFGF的表達(dá)有顯著性的影響，換而言之即是芪榆油紗布通過(guò)bFGF為媒介對(duì)創(chuàng)面肉芽組織進(jìn)行修復(fù)。

關(guān)鍵詞：芪榆油紗布；bFGF；創(chuàng)面愈合；RT-PCR；毛細(xì)血管；大鼠

1資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 使用SD大鼠48只，體重180～200g，隨機(jī)分成三組，每組12只。

1.2造創(chuàng)模型 在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室行皮膚切開(kāi)造創(chuàng)手術(shù)：常規(guī)手術(shù)消毒，在大鼠背部近臀部側(cè)以脊柱為中心，分別向左右兩側(cè)旁開(kāi)1cm處，作一與脊柱平行的切口，長(zhǎng)2cm，深達(dá)肌層。創(chuàng)面自然止血，不包扎，不用藥，于無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室內(nèi)單籠飼養(yǎng)，保持創(chuàng)口干燥，給予消毒食物及飲水。

1.3藥品 芪榆油紗布，龍珠軟膏，凡士林紗布。

1.4試劑 10%福爾馬林溶液，蘇木素-伊紅試劑盒， bFGF抗體試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，超純RNA提取試劑盒、DNase 1、5x RNA Loading Buffe等。

1.5主要儀器 QL-902型渦旋振蕩儀， Centrifuge 5415D離心機(jī)， ABI7500熒光定量PCR儀，PCR儀等。

1.6常規(guī)病理組織學(xué)切片染色 4% 中性多聚甲醛緩沖固定液固定標(biāo)本，常規(guī)脫水，包埋，切成5 m切片，HE染色，光鏡觀察。

1.7 bFGF表達(dá)的檢查方法 取1.0×1.0mm的新鮮肉芽組織放入盛有裂解液的專用epp試管中，放于4℃恒溫冰箱中保存，放到-80℃低溫冰箱中速凍，以防蛋白酶分解，待測(cè)分子生物學(xué)指標(biāo)。運(yùn)用RT-PCR方法來(lái)檢測(cè)三組病例用藥第7d創(chuàng)面肉芽組織中bFGF的表達(dá)水平。

1.8創(chuàng)面愈合時(shí)間檢查方法 創(chuàng)面愈合標(biāo)準(zhǔn)：即為創(chuàng)面完全上皮化所需時(shí)間；計(jì)算出每組創(chuàng)面愈合時(shí)間的均值，予SPSS19軟件對(duì)三組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果

2.1 bFGFmRNA的表達(dá)比值統(tǒng)計(jì) 各組病例中bFGF經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增后產(chǎn)物比值，芪榆油組略高于龍珠軟膏組，無(wú)明顯差異；芪榆油組明顯高于凡士林組，有顯著性差異，見(jiàn)表1。

3討論

bFGF為內(nèi)源性生長(zhǎng)因子，其對(duì)創(chuàng)面的愈合起到非常重要的調(diào)節(jié)作用。本文研究的結(jié)果表明，通過(guò)以上對(duì)用藥后肉芽組織中bFGF表達(dá)的測(cè)定，可以看出bFGF的高表達(dá)能夠使創(chuàng)面氧自由基的量減少、活性減弱，同時(shí)加速創(chuàng)面細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)的合成、毛細(xì)血管生成、結(jié)締組織的形成，從而使機(jī)體和創(chuàng)面的抗感染能力提高來(lái)加速創(chuàng)面組織的恢復(fù)。創(chuàng)面肉芽組織缺血缺氧是限制創(chuàng)面修復(fù)的關(guān)鍵因素之一[1]；慢性難愈合創(chuàng)面往往都伴有血管的異常[2]。因?yàn)樾律苣軌蛱峁┏渥愕难鹾蜖I(yíng)養(yǎng)，有助于細(xì)胞的增殖，肉芽組織是膠原沉積、改建的場(chǎng)所。因此，血管新生是創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中重要的一環(huán)。

研究證明方中黃芪能加速毛細(xì)血管的再生，補(bǔ)給創(chuàng)面修復(fù)必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提供相關(guān)的微量元素，促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖，激活巨噬細(xì)胞的再生等功能[3]。丹參外用可加快創(chuàng)面壞死組織清除，減輕組織水腫和炎癥反應(yīng)，同時(shí)能促進(jìn)成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞生長(zhǎng)。紫草與白芨通過(guò)刺激bFGF 表達(dá)使細(xì)胞分裂和增殖，加速上皮細(xì)胞增殖和創(chuàng)面上皮化， 提高成纖維細(xì)胞功能以促進(jìn)彈性纖維和膠原纖維的合成， 并促進(jìn)新生毛細(xì)血管的形成，加速新陳代謝和創(chuàng)面愈合。

大鼠用藥后肉芽組織中bFGF的表達(dá)均高于對(duì)照組，說(shuō)明芪榆油膏能誘導(dǎo)加速內(nèi)源性bFGF基因表達(dá)，芪榆油膏可以通過(guò)啟動(dòng)長(zhǎng)因子的分泌和刺激生長(zhǎng)因子的增多而使這一過(guò)程增強(qiáng)，使愈合的速度和質(zhì)量發(fā)生明顯變化，進(jìn)而加速修復(fù)進(jìn)程使創(chuàng)面愈合，可見(jiàn)芪榆油膏影響創(chuàng)面修復(fù)機(jī)制之一是通過(guò)bFGF介導(dǎo)的。

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編輯/孫杰