胃炎飲對(duì)胃潰瘍大鼠血清內(nèi)皮素-1和一氧化氮含量的影響

于文濤鄧國(guó)興楊牧祥方朝義王少賢

(河北中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北石家莊050091)

摘要〔〕目的探討胃炎飲對(duì)胃潰瘍模型大鼠血清內(nèi)皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量的影響。方法采用冰醋酸腐蝕法建立實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠模型，以?shī)W美拉唑?yàn)閷?duì)照，觀察胃炎飲對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠胃粘膜潰瘍面積和血清ET-1、NO含量的影響。結(jié)果與假手術(shù)組相比，模型組的血清ET-1含量明顯升高，NO含量明顯降低(P<0.01)；與模型組相比，各用藥組潰瘍面積均明顯縮小(P<0.01或P<0.05)，血清ET-1含量明顯下降(P<0.01)，胃炎飲高、低劑量組的血清NO含量明顯升高(P<0.01或P<0.05)。結(jié)論胃炎飲可調(diào)節(jié)血管舒縮因子，改善胃黏膜循環(huán)，從而促進(jìn)潰瘍愈合。

關(guān)鍵詞〔〕胃炎飲；實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍；內(nèi)皮素-1；一氧化氮

中圖分類(lèi)號(hào)〔〕R256.33〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：國(guó)家中醫(yī)藥管理局全國(guó)名老中醫(yī)傳承工作室建設(shè)項(xiàng)目〔國(guó)中醫(yī)藥人教發(fā)(2011)41號(hào)〕；河北省中醫(yī)藥管理局科研計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.2011008)

通訊作者：鄧國(guó)興(1971-)，男，醫(yī)學(xué)碩士，教授，主要從事消化系統(tǒng)疾病的中醫(yī)證治研究。

第一作者：于文濤(1971-)，男，醫(yī)學(xué)博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事消化系統(tǒng)疾病的中醫(yī)證治研究。

胃潰瘍是由于胃酸分泌過(guò)多、幽門(mén)螺桿菌感染和胃黏膜保護(hù)作用減弱等多種因素導(dǎo)致胃酸和胃蛋白酶消化自身的胃壁，致使黏膜組織受損的疾病。課題組前期研究表明，該方藥治療多種慢性胃病均取得了理想療效〔1，2〕。為進(jìn)一步探討其治療胃潰瘍的作用機(jī)制，本文觀察該藥對(duì)胃潰瘍大鼠血清內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量的影響。

1材料與方法

1.1 動(dòng)物、藥物及儀器、試劑選取清潔級(jí)雄性Wistar大鼠50只，體重200～220 g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物合格證編號(hào)：1205094。胃炎飲方：由柴胡、香附、川楝子、元胡、炒白術(shù)、茯苓、炙甘草、川連、陳皮、枳殼、姜半夏、姜竹茹等藥物組成，使用前水煎分別濃縮成含量為2.14 g生藥/ml(高劑量組)和1.07 g生藥/ml(低劑量組)的藥液。奧美拉唑腸溶膠囊：由哈藥集團(tuán)三精制藥諾捷有限責(zé)任公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：1111304，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20064032，規(guī)格：每粒20 mg。使用前用蒸餾水配制成濃度為0.368 mg/ml的藥液。HM-200電子天平(日本生產(chǎn))；1-15K高速冷凍離心機(jī)：美國(guó)Sigma公司；FJ-2021γ-放射免疫計(jì)數(shù)器：西安二六二廠。ET-1、NO試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2方法

1.2.1 模型建立50只大鼠隨機(jī)抽取8只作為假手術(shù)組，其余參與正式造模。造模參照文獻(xiàn)〔3〕。大鼠術(shù)前禁食24 h，10%水合氯醛按每3 ml/kg體重腹腔注射麻醉，待大鼠失去意識(shí)后，于劍突下腹中線(xiàn)打開(kāi)腹腔，暴露出胃，在胃前壁近幽門(mén)處，用浸有100%冰醋酸、直徑為5 mm的圓形濾紙接觸2次(注意避開(kāi)血管)，每次30 s，棉簽吸干，生理鹽水沖洗，逐層縫合切口，手術(shù)過(guò)程按無(wú)菌操作。假手術(shù)組麻醉開(kāi)腹，暴露胃壁，用生理鹽水代替冰醋酸浸濕濾紙接觸2次，每次30 s，縫合切口。

1.2.2 分組及給藥在造模術(shù)后第3天，剔除死亡大鼠，將造模成功存活大鼠隨機(jī)抽取32只，分為模型組、胃炎飲高劑量組、胃炎飲低劑量組、奧美拉唑組，每組8只。各藥物治療組按體重分別灌胃給藥，胃炎飲高劑量組灌服濃度為2.14 g生藥/ml的胃炎飲方藥液10 ml/kg(相當(dāng)于21.4 g生藥/kg體重)，胃炎飲低劑量組灌服濃度為1.07 g生藥/ml胃炎飲方藥液10 ml/kg(相當(dāng)于10.7 g生藥/kg體重)，奧美拉唑組灌服濃度為0.368 mg/ml(相當(dāng)于3.68 mg/kg體重)。各用藥組從造模術(shù)后第3天開(kāi)始治療，假手術(shù)組、模型組灌胃等容積的生理鹽水，1次/d，治療天數(shù)為14 d。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.3.1 潰瘍面積檢測(cè)最后1次灌胃給藥后禁食24 h，斷頭處死，無(wú)菌操作剖腹取胃，沿胃大彎剪開(kāi)，冰生理鹽水漂洗胃內(nèi)容物，把胃黏膜展平于平板上，濾紙吸干，肉眼觀察胃前壁近幽門(mén)的冰醋酸腐蝕處大體形態(tài)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量潰瘍的最大長(zhǎng)徑和垂直最大寬徑，計(jì)算潰瘍面積和潰瘍抑制率。

1.3.2 血清ET-1和NO檢測(cè)大鼠斷頭取血3 ml，加入消炎痛EDTA-Na2液0.2 ml，顛倒混勻，3 500 r/min離心5 min提取上清。用于放射免疫法測(cè)定血清ET-1的含量，采用硝酸還原酶法測(cè)定NO含量。

2結(jié)果

2.1 大體形態(tài)觀察模型組大鼠胃黏膜潰瘍處呈圓形或橢圓形凹陷，狀若火山口，邊緣整齊，潰瘍底部覆蓋有灰白色炎性滲出物和壞死物，潰瘍周?chē)つそM織皺襞變粗，部分潰瘍組織與周?chē)M織存在粘連。各治療組大鼠潰瘍形態(tài)與模型組相似，但面積較小，滲出物和壞死物較少。假手術(shù)組大鼠胃黏膜未見(jiàn)異常。

2.2 各組大鼠潰瘍面積及潰瘍抑制率比較與模型組比較，各用藥組潰瘍面積均明顯縮小(P<0.01或P<0.05)；與奧美拉唑組比較，胃炎飲高劑量組潰瘍面積明顯縮小(P<0.05)；與胃炎飲低劑量組比較，胃炎飲高劑量組潰瘍面積明顯縮小(P<0.05)；胃炎飲高劑量組潰瘍抑制率為62.7%，高于胃炎飲低劑量組和奧美拉唑組，說(shuō)明高劑量胃炎飲對(duì)潰瘍療效優(yōu)于低劑量組和奧美拉唑。見(jiàn)表1。

組別大鼠潰瘍面積(mm2)潰瘍抑制率(%)假手術(shù)組--模型組26.8±9.99-胃炎飲高劑量組10.0±4.622)3)62.7胃炎飲低劑量組19.5±6.022)4)27.2奧美拉唑組17.5±6.181)34.7

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與奧美拉唑組比較：3)P<0.05；與胃炎飲高劑量組比較：4)P<0.05

2.3 各組大鼠血清ET-1、NO含量比較與假手術(shù)組相比，模型組的血清ET-1含量明顯升高，NO含量明顯降低(P<0.01)。而與模型組相比，各給藥組的血清ET-1含量明顯減少(P<0.01)；胃炎飲高、低劑量組的血清NO含量明顯升高(P<0.01，P<0.05)。與奧美拉唑組相比，胃炎飲高劑量組的NO含量有明顯升高(P<0.05)。見(jiàn)表2。

組別ET-1(pg/ml)NO(μmol/ml)假手術(shù)組64.58±9.102)26.83±4.832)模型組78.57±13.4118.56±3.31胃炎飲高劑量組67.59±17.412)26.23±5.202)3)胃炎飲低劑量組67.73±15.852)23.64±3.691)奧美拉唑組66.91±15.012)22.13±2.18

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與奧美拉唑組比較：3)P<0.05

3討論

胃潰瘍，按照其臨床表現(xiàn)屬于中醫(yī)“胃痛”病癥范疇。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，本病多由于飲食所傷，情志不遂，外邪侵襲，脾胃虛弱等因素所致。胃潰瘍的病位在胃，與肝脾等臟腑功能失調(diào)密切相關(guān)，主要病機(jī)為肝郁脾虛，胃失和降，故以疏肝健脾，和胃降逆為主要治法?！拔秆罪嫛庇刹窈⑾愀?、川楝子、元胡、炒白術(shù)、茯苓、炙甘草、川連、陳皮、枳殼、姜半夏、姜竹茹等藥物組成。方中柴胡疏肝解郁，理氣止痛，為君藥；香附、川楝子、元胡行氣止痛，并增強(qiáng)柴胡疏肝解郁作用，為臣藥；炒白術(shù)、茯苓、炙甘草健脾益氣，扶土抑木，川連善清胃火，兼清肝火，并佐制香附辛烈太過(guò)，四藥共為佐藥；枳殼、陳皮理氣和中，姜竹茹、姜半夏和胃降逆，四藥共為使藥。諸藥合用，共奏疏肝健脾，和胃降逆等功效。

ET-1是一種具有強(qiáng)烈、持久的縮血管和促血管平滑肌增殖的作用的活性多肽。ET-1的縮血管作用可導(dǎo)致胃黏膜血流量下降，具有強(qiáng)烈的致潰瘍性〔4〕。該作用可被血管內(nèi)皮分泌的舒血管小分子活性物質(zhì)NO拮抗。NO舒血管作用與ET的縮血管作用構(gòu)成了胃腸黏膜局部血流動(dòng)力學(xué)重要的平衡機(jī)制。臨床研究表明，老年活動(dòng)性胃潰瘍患者血清NO水平明顯低于健康體檢者，提示在潰瘍的形成和愈合過(guò)程中存在NO的黏膜保護(hù)作用不足〔5〕。劉俊平等〔6〕報(bào)道，胃潰瘍患者血清ET-1水平高于無(wú)潰瘍患者，運(yùn)用星狀神經(jīng)節(jié)阻滯技術(shù)能使胃潰瘍患者的ET-1降低，使其血清水平接近無(wú)消化潰瘍者，同時(shí)胃潰瘍的臨床治愈率、總有效率顯著增加，說(shuō)明ET-1水平異常升高在胃潰瘍的形成和復(fù)發(fā)機(jī)制中占據(jù)重要作用。

本研究表明血管舒縮因子ET-1和NO的失衡參與了胃潰瘍的形成；與模型組比較，胃炎飲高、低劑量組均能升高NO含量，降低血清ET-1含量，說(shuō)明該藥可調(diào)節(jié)血管舒縮因子，改善胃黏膜循環(huán)，從而促進(jìn)潰瘍愈合。

4參考文獻(xiàn)

1楊牧祥，于文濤，王秉岳，等.胃炎飲治療膽汁反流性胃炎116例臨床療效觀察〔J〕.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2009;3(15)：73-4.

2田元祥.楊牧祥教授對(duì)胃脘痛的認(rèn)識(shí)及診治經(jīng)驗(yàn)〔J〕.河北中醫(yī)，2007;29(4)：293-6.

3鄢順琴. 胃痛靈保護(hù)胃黏膜作用及對(duì)胃潰瘍愈合質(zhì)量的影響〔J〕.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，1998；15(10)：612-4.

4馮好彬.中醫(yī)藥對(duì)胃黏膜細(xì)胞因子調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展〔J〕.白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009;7(3):175-6.

5尹會(huì)格，孟惠茹，黃一茜，等.大黃對(duì)老年胃潰瘍患者血清一氧化氮的影響〔J〕.中國(guó)藥業(yè)，2012;21(8)：27-8.

6劉俊平，王巖英，郭青梅，等.星狀神經(jīng)節(jié)阻滯對(duì)胃潰瘍患者血漿ET-1、CGRP水平的影響〔J〕.山東醫(yī)藥，2009;49(40)：77-9.

〔2013-09-03修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢(mèng)園)