子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中Wilms基因、 磷酸酶及張力蛋白同源蛋白和原癌基因C-MYC的表達(dá)及意義

張愛東焦健于海

(承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院臨床2教研室，河北承德067000)

摘要〔〕目的檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中定位于X染色體上的Wilms基因(WTX)、磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)和原癌基因C-MYC表達(dá)及其臨床意義。方法107例子宮內(nèi)膜癌患者作為觀察組，留取臨床資料及術(shù)后的蠟塊組織。78例復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，78例增生期子宮內(nèi)膜組織作為正常對(duì)照組。三組均行免疫組化檢測(cè)，檢測(cè)WTX、PTEN和C-MYC的表達(dá)。結(jié)果三組中WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)的陽性率差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)的陽性率與腫瘤最大徑、肌層浸潤深度和Ki67的表達(dá)密切相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中WTX、PTEN和C-MYC的表達(dá)均未見明顯相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織WTX、PTEN低表達(dá)、C-MYC高表達(dá)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。三者間無明顯協(xié)同作用。

關(guān)鍵詞〔〕子宮內(nèi)膜癌；Wilms基因；磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)；C-MYC

中圖分類號(hào)〔〕R737.33〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

第一作者：張愛東(1979-)，女，碩士，講師，主要從事婦產(chǎn)科疾病研究。

子宮內(nèi)膜癌病變呈漸進(jìn)性進(jìn)展〔1〕。定位于X染色體上的Wilms基因(WTX)是近年來發(fā)現(xiàn)的首個(gè)定位在X染色體的抑癌基因，可以在一定程度上抑制腫瘤形成〔2，3〕。磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)是具有磷酸酯酶活性的抑癌基因，通過脫磷酸化作用調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，從而有效調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和發(fā)育〔4〕。原癌基因C-MYC對(duì)腫瘤進(jìn)展有促進(jìn)作用〔5〕。本研究觀察子宮內(nèi)膜癌WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)特征。

1資料與方法

1.1一般資料2011年6月至2013年12月我院診斷并行手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜樣腺癌的患者，均經(jīng)病理學(xué)確診，并符合WHO中的標(biāo)準(zhǔn)，共107例，年齡52～78歲，平均(63.7±5.8)歲。78例復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，年齡45～64歲，平均(54.3±5.2)歲。78例增生期子宮內(nèi)膜組織作為正常對(duì)照組，年齡34～52歲，平均(40.1±5.1)歲。

1.2WTX、PTEN和C-MYC檢測(cè)方法檢測(cè)用的WTX、PTEN和C-MYC蛋白均為濃縮液，抗體按不同比例稀釋后應(yīng)用免疫組化SP法行預(yù)實(shí)驗(yàn)，均經(jīng)病理學(xué)醫(yī)師觀察并選擇最理想的濃度用于正式實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)WTX、PTEN和C-MYC的表達(dá)、DAB顯色，嚴(yán)格按說明書規(guī)定的步驟操作。

1.3WTX、PTEN和C-MYC結(jié)果判讀WTX和PTEN均以細(xì)胞質(zhì)中染成棕黃色且染色強(qiáng)度為中-強(qiáng)度為陽性。計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野，以陽性細(xì)胞<25%為陰性，以≥25%為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1三組WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)的比較正常對(duì)照組、對(duì)照組和觀察組中WTX、PTEN的表達(dá)有下降趨勢(shì)，C-MYC的表達(dá)具有升高趨勢(shì)。見表1。

2.2觀察組WTX、PTEN和C-MYC在不同臨床特征中的表達(dá)WTX、PTEN和C-MYC表達(dá)陽性率與腫瘤最大徑、肌層浸潤深度、Ki67的表達(dá)密切相關(guān)。見表2。

2.3觀察組中WTX、PTEN和C-MYC的相關(guān)性WTX、PTEN和C-MYC之間均未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。

表1三組WTX、PTEN和C-MYC陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

組別nWTXPTENC-MYC觀察組10731(28.97)40(37.38)41(38.32)對(duì)照組7840(51.28)56(71.79)15(19.23)正常對(duì)照組7875(96.15)77(98.72)6(7.69)χ2值85.252677.177624.6463P值<0.0001<0.0001<0.0001

表2觀察組WTX、PTEN和C-MYC在不同臨床特征的陽性表達(dá)〔n(%)〕

臨床特征nWTXPTENC-MYC腫瘤最大徑 <5cm5125(49.02)32(62.75)9(17.65) ≥5cm566(10.71)8(14.29)32(69.57) χ2值19.032026.777126.7157 P值<0.0001<0.0001<0.0001肌層浸潤 <1/26726(38.81)33(49.25)11(16.42) ≥1/2405(12.50)7(17.50)30(75.00) χ2值8.422710.788836.3681 P值0.00370.0010<0.0001Ki67的表達(dá) <25%3724(64.86)28(75.68)5(13.51) ≥25%707(10.00)12(17.14)36(51.43) χ2值35.407635.428114.7224 P值<0.0001<0.00010.0001

3討論

子宮內(nèi)膜癌是由子宮內(nèi)膜發(fā)生的原發(fā)上皮性惡性腫瘤，通常伴有腺體分化、具有浸潤子宮肌壁及遠(yuǎn)處擴(kuò)散的潛能〔6〕。雌激素依賴性腫瘤占80%～85%，非雌激素依賴型占15%～20%。雌激素依賴性腫瘤級(jí)別低，主要是子宮內(nèi)膜樣腺癌。臨床特征為向腺體異型增生，形成背靠背、共壁及迷路樣結(jié)構(gòu)〔7〕。腫瘤進(jìn)展時(shí)具有明顯侵襲性，并且伴隨著較高的增殖活性。而病變進(jìn)展與多種癌相關(guān)基因和抑癌相關(guān)基因表達(dá)失調(diào)密切相關(guān)〔8〕。WTX單基因突變或失活可以引起有活性的X染色體異?！?〕。WTX可以通過改變?chǔ)?catenin蛋白的穩(wěn)定性，促進(jìn)β-catenin泛素化與降解，負(fù)向調(diào)節(jié)WNT信號(hào)通路，發(fā)揮腫瘤抑制的作用〔10〕。也有研究認(rèn)為WTX可以與WNT信號(hào)通路中其他蛋白形成復(fù)合物，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的分化〔11〕。朱水山等〔12〕研究認(rèn)為WTX不像多數(shù)染色體易位的腫瘤一樣，通過致癌融合基因發(fā)揮作用，而是通過X染色體和18號(hào)染色體之間的平衡而發(fā)揮抑癌作用。PTEN是首個(gè)發(fā)現(xiàn)的具有磷酸酯酶活性的腫瘤抑制基因〔13，14〕，其相關(guān)產(chǎn)物可以發(fā)揮磷酸酶活性，引起細(xì)胞內(nèi)第二信使去磷酸化，引起細(xì)胞凋亡的進(jìn)程改變，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖過程〔15〕。C-MYC是信號(hào)傳導(dǎo)通路的下游基因，可以與DNA結(jié)合，促進(jìn)腫瘤發(fā)生和進(jìn)展〔16〕。也有研究認(rèn)為C-MYC在生理狀態(tài)下無轉(zhuǎn)錄活性，并表現(xiàn)出低水平或丟失的表達(dá)，當(dāng)C-MYC被異?；罨笸ㄟ^與相關(guān)的其他癌基因的協(xié)同作用，引起腫瘤細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化〔17〕。當(dāng)C-MYC過表達(dá)時(shí)，一些保護(hù)性通路的異常改變引起腫瘤細(xì)胞惡變及異型增生〔18〕。

本研究結(jié)果提示W(wǎng)TX、PTEN在子宮內(nèi)膜癌中呈抑癌基因的作用，C-MYC發(fā)揮癌基因的作用。WTX、PTEN和C-MYC的異常表達(dá)參與腫瘤的失控性增生、侵襲性生長及細(xì)胞的增殖過程。WTX、PTEN的丟失或下降使子宮內(nèi)膜的腺上皮細(xì)胞形成惡性轉(zhuǎn)變，此時(shí)細(xì)胞異型程度明顯增加，細(xì)胞增生活躍，腫瘤體積增加，對(duì)局部組織的破壞力增強(qiáng)。由于腫瘤的最大徑、肌層浸潤深度、Ki67的表達(dá)三種臨床特征均是臨床判斷腫瘤生物學(xué)行為和預(yù)后的重要指標(biāo)，因此WTX、PTEN和C-MYC異常表達(dá)在一定程度上可以反映腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后，即WTX和PTEN低表達(dá)、C-MYC高表達(dá)患者的預(yù)后差。WTX、PTEN和C-MYC三者的作用通路可能不相同。有觀點(diǎn)認(rèn)為WTX可以通過與WT1相結(jié)合或具有協(xié)同作用，來促進(jìn)WT1介導(dǎo)的內(nèi)源性靶基因雙調(diào)蛋白轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞分化的核轉(zhuǎn)錄調(diào)控通路中起核心作用〔19〕。PTEN與改變腫瘤細(xì)胞的黏附性及調(diào)節(jié)腫瘤的血管生成有關(guān)，同時(shí)對(duì)細(xì)胞增殖起到重要抑制作用〔20〕。也有學(xué)者認(rèn)為PTEN在作用過程中可能與多種中介蛋白產(chǎn)生協(xié)同調(diào)節(jié)作用〔21，22〕。

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〔2014-07-09修回〕

(編輯苑云杰)