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PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年結(jié)直腸癌的表達及其對預后的判斷價值

馬靖靖劉付寶

(安徽醫(yī)科大學，安徽合肥230000)

摘要〔〕目的探討PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年結(jié)直腸癌的表達及其對預后的判斷價值。方法選取80例健康對照者為對照組，80例結(jié)直腸癌患者為觀察組，應用流式細胞術檢測結(jié)腸黏膜組織PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白的表達。比較各組PTEN、Kindlin-2和DcR3表達情況及其與結(jié)直腸癌患者不同臨床特征的關系，PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白表達量與患者生存的關系。結(jié)果相比于對照組，觀察組PTEN蛋白表達量明顯下降(P<0.05)；觀察組Kindlin-2蛋白表達量明顯上升(P<0.05)；觀察組DcR3蛋白表達量明顯上升(P<0.05)。PTEN、Kindlin-2和DcR3的表達與結(jié)直腸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期及增殖細胞核抗原(PCNA)的表達密切相關(P<0.05)。結(jié)直腸癌患者PTEN(χ2=12.23，P=0.031)，Kindlin-2(χ2=7.23，P=0.042)與DcR3(χ2=14.35，P=0.021)與生存密切相關，PTEN蛋白表達陰性、Kindlin-2蛋白表達陽性、DcR3蛋白表達陽性的患者預后較差。結(jié)論結(jié)直腸癌中PTEN、Kindlin-2和DcR3異常表達對腫瘤的進展有重要意義，聯(lián)合檢測三者表達可能有助于預后判斷。

關鍵詞〔〕結(jié)直腸癌；PTEN；Kindlin-2；DcR3

中圖分類號〔〕R969.4〔文獻標識碼〕A〔

基金項目：安徽省自然科學

通訊作者：劉付寶(1968-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事普外科疾病研究。

第一作者：馬靖靖(1983-)，女，住院醫(yī)師，主要從事結(jié)腸癌研究。

全世界每年新增結(jié)直腸癌病例數(shù)多為94萬，每年死亡人數(shù)可達50萬人〔1〕。PTEN是新近發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因，可通過對細胞的多種調(diào)控途徑，如生長、增殖、信號轉(zhuǎn)導等方式來實現(xiàn)；Kindlin-2是黏著斑蛋白家族的一員，在多種腫瘤上均高表達，具有調(diào)節(jié)整合素的作用，可改變細胞間黏附；DcR3作為新近發(fā)現(xiàn)的基因，在抗凋亡及免疫功能上都起著重要作用，可通過多種途徑影響腫瘤的發(fā)生與進展〔2～4〕。本研究觀察PTEN、Kindlin-2和DcR3的表達在結(jié)直腸癌疾病發(fā)生發(fā)展的意義，并對預后評估做出判斷。

1資料與方法

1.1一般資料①觀察組選取2011年3月至2014年5月我院結(jié)直腸癌患者80例，其中男50例，女30例；年齡62～75，平均(69.5±7.9)歲。納入標準：病情符合WHO關于結(jié)直腸癌的診斷標準，經(jīng)影像學檢查及臨床醫(yī)師診斷確診，且隨訪資料完整。排除術前有放療及化療的患者。②對照組選取健康志愿者80例，其中男48例，女32例;年齡63～77歲，平均(68.6±6.9)歲。納入標準:不存在胃腸道癥狀并且影像學檢查未見異常，心肝腎功能基本正常。兩組性別、年齡差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。程序符合本單位的倫理學標準并得到批準，且已得到患者與家屬的知情同意。

1.2檢測方法PTEN、Kindlin-2和DcR3的檢測應用流式細胞術技術。結(jié)腸黏膜組織剪碎后制成單細胞懸液，調(diào)整細胞濃度為1×106/ml，分別取1 ml，加入PTEN、Kindlin-2和DcR3一抗，避光4℃下孵育30 min。然后加入適量的PBS洗滌，1 500 r/min 4℃ 離心，棄上清，加入一定濃度的PE-IgG二抗100 μl，避光4℃下孵育30 min，然后加入適量的PBS洗滌，1 500 r/min 4℃ 離心，棄上清，每管加入300 μl的PBS重懸，應用美國BC公司的流式細胞儀檢測，應用Flowjo軟件進行分析處理數(shù)據(jù)。熒光指數(shù)(FI)=(樣本蛋白的平均熒光強度-對照樣本的平均熒光強度)/ 對照樣本的平均熒光強度。

1.3統(tǒng)計學方法應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗。

2結(jié)果

2.1各組PTEN、Kindlin-2和DcR3表達的比較相比于對照組，觀察組PTEN蛋白表達量明顯下降(P<0.05)；Kindlin-2、DcR3蛋白表達量明顯上升(P<0.05)；見表1。

2.2PTEN、Kindlin-2和DcR3 與結(jié)直腸癌患者不同臨床特征的關系PTEN、Kindlin-2和DcR3的表達與結(jié)直腸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，Dukes分期及增殖細胞核抗原(PCNA)表達密切相關(P<0.05)；見表2。

2.3PTEN、Kindlin-2和DcR3的表達與生存的關系結(jié)直腸癌患者隨訪8～60個月，經(jīng)生存分析顯示，結(jié)直腸癌中PTEN(χ2=12.23，P=0.031)，Kindlin-2(χ2=7.23，P=0.042)，DcR3(χ2=14.35，P=0.021)表達量與結(jié)直腸癌患者的生存密切相關，PTEN蛋白表達陰性、Kindlin-2蛋白表達陽性、DcR3蛋白表達陽性的患者預后較差。

組別PTENKindlin-2DcR3觀察組0.46±1.091)2.01±1.231)2.09±1.651)對照組1.00±1.211.03±0.981.02±1.71

與對照組比較：1)P<0.05

nPTENKindlin-2DcR3淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無451.75±0.211.13±0.511.26±0.23有351.02±0.161)1.96±0.611)1.99±0.221)Dukes分期A+B481.79±1.211.02±0.981.15±0.55C+D321.11±1.191)1.88±0.651)1.68±0.661)PCNA表達〔5〕<25%401.56±0.211.16±0.641.24±0.23≥25%401.02±0.231)1.86±0.681)1.88±0.211)

與不同的臨床特征比較:1)P<0.05

3討論

結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展是一個涉及多過程、多基因、多原因累加的繁瑣過程，其致病機制至今不明，分子生物系統(tǒng)在結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展中存在著重要作用〔6，7〕。PTEN可通過多種途徑抑制腫瘤的發(fā)生，如①調(diào)節(jié)脂質(zhì)磷酸化酶的活性，使PIP3去磷酸化，從而加快腫瘤的凋亡，抑制腫瘤的生長；②抑制絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信號傳導途徑，從而抑制腫瘤細胞的生長分化；③對局部黏著斑激酶及Shc酶的去磷酸化，從而降低腫瘤細胞的遷移，降低腫瘤的浸潤、增殖和轉(zhuǎn)移〔8，9〕。Kindlin-2是黏著斑蛋白家族功能最為廣泛的一員，其可通過多種途徑來影響細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導、遷移、黏附及增殖，其可通過整合素及轉(zhuǎn)化因子的作用位點，影響細胞之間的鏈接，減弱細胞間的黏附能力〔10〕。DcR3可通過與死亡因子Fas-L特異性結(jié)合，從而減弱由線粒體引起的細胞凋亡，促進腫瘤細胞逃避免疫細胞的攻擊〔11〕。本研究提示PTEN蛋白表達陰性、Kindlin-2蛋白表達陽性、DcR3蛋白表達陽性的患者預后較差，與相關研究基本吻合〔1，12〕，均提示PTEN、Kindlin-2和DcR3與結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展密切相關，并影響著疾病的轉(zhuǎn)歸預后。

4參考文獻

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〔2014-07-11修回〕

(編輯苑云杰)