普拉克索對(duì)帕金森病模型大鼠神經(jīng)行為學(xué)的影響

王進(jìn)殷立新霍穎浩1

(河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院藥學(xué)部，河北石家莊050000)

摘要〔〕目的探討普拉克索對(duì)帕金森病(PD)大鼠神經(jīng)行為學(xué)的影響效果。方法選取體重范圍185～210 g的SPF級(jí)雄性SD大鼠68只，均復(fù)制為PD大鼠模型，隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組34只。對(duì)照組大鼠給予左旋多巴治療，觀察組大鼠給予左旋多巴聯(lián)合普拉克索治療。比較兩組大鼠治療1、3、5、7 w神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)、旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間、旋轉(zhuǎn)持續(xù)時(shí)間、劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)及AIM評(píng)分變化。結(jié)果兩組大鼠給藥后均出現(xiàn)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)，且隨著給藥時(shí)間延長對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)逐漸增加，其中給藥5 w時(shí)大鼠達(dá)到峰值。兩組大鼠隨著給藥時(shí)間延長，旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間逐漸降低，旋轉(zhuǎn)持續(xù)時(shí)間呈增加趨勢，劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)也呈逐漸增加趨勢，而AIM評(píng)分也隨治療時(shí)間逐漸增加。同一觀測時(shí)間點(diǎn)，觀察組對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)、大鼠旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間、旋轉(zhuǎn)持續(xù)時(shí)間、劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)、AIM評(píng)分都低于對(duì)照組(P<0.01或P<0.05)。結(jié)論普拉克索能夠有效緩解高劑量左旋多巴對(duì)PD大鼠神經(jīng)行為造成的不利影響，改善AIM評(píng)分，并有利于促進(jìn)左旋多巴治療PD的療效。

關(guān)鍵詞〔〕帕金森?。黄绽怂?；左旋多巴；神經(jīng)行為學(xué)

中圖分類號(hào)〔〕R588〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：河北省衛(wèi)計(jì)委青年科技課題(No.20110368)

1河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

第一作者：王進(jìn)(1978-)，女，主管藥師，主要從事臨床藥學(xué)研究。

帕金森病(PD)是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病〔1〕，臨床表現(xiàn)以靜止性震顫、動(dòng)作遲緩、肌肉強(qiáng)直等癥狀為主〔2〕。目前，PD尚無有效治愈措施，目前采用左旋多巴等藥物為主、手術(shù)治療為輔的綜合治療措施，但是多數(shù)情況下還是無法控制病情進(jìn)展〔3〕；且左旋多巴等藥物的毒性作用強(qiáng)度，隨劑量增加而更加明顯〔4〕。因此，有效減輕左旋多巴毒性作用，對(duì)提高PD治療效果具有重要意義。普拉克索是一種非麥角類多巴胺激動(dòng)劑〔5〕，但是其治療PD的確切機(jī)制尚不清楚。本研究探討普拉克索對(duì)PD大鼠神經(jīng)行為學(xué)的影響。

1材料與方法

1.1動(dòng)物及試劑選取體重185～210 g的SPF級(jí)雄性SD大鼠68只〔河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXX(冀)2013-1-003〕，飼養(yǎng)條件為自由飲水、進(jìn)食。人工控制日光燈照射模擬晝夜交替。普拉克索(Booehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG，批準(zhǔn)文號(hào)：0H1553102)；左旋多巴注射液(廣西河豐藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H45021481)；注射用異戊巴比妥鈉(上海新亞藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H31021725);鹽酸芐絲肼(上海益生源藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H31021397);抗壞血酸、阿撲嗎啡均購自美國sigma公司。

1.2儀器SR-5R大鼠立體定位儀，北京拜安吉科技有限公司。微量進(jìn)樣器(1、5 μl)，北京華儀三譜儀器有限責(zé)任公司。

1.3方法(1)復(fù)制PD大鼠模型：SPF級(jí)雄性SD大鼠麻醉給藥異戊巴比妥鈉25 mg/kg，腹腔注射。麻醉完成后固定于立體定位儀上。根據(jù)大鼠立體定位儀圖譜說明書，并參考文獻(xiàn)〔6〕的方法，為PD大鼠造模，記錄大鼠開始出現(xiàn)一側(cè)旋轉(zhuǎn)至30 min內(nèi)發(fā)生的旋轉(zhuǎn)圈數(shù)，平均每分鐘旋轉(zhuǎn)圈數(shù)超過7圈即為PD大鼠造模成功。(2)藥物治療：對(duì)照組大鼠給予左旋多巴40 mg/kg(即40 mg/kg左旋多巴與10 mg/kg芐絲肼溶解在濃度為0.01%的抗壞血酸及0.05%的乙醇)，腹腔注射給藥。觀察組大鼠在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予普拉克索0.05 mg/kg，灌胃給藥。兩組大鼠療程均為7 w。

1.4觀察指標(biāo)PD大鼠模型自給藥開始30 min內(nèi)的對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)〔6〕。給藥左旋多巴和普拉克索后5 min內(nèi)，兩組PD大鼠模型旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間、持續(xù)時(shí)間及劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)〔6〕。兩組大鼠異常不自主(AIM)評(píng)分方法〔6〕：PD大鼠模型出現(xiàn)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)、反復(fù)吐舌或咀嚼，頭部、軀體向破壞側(cè)屈曲或進(jìn)行軸性旋轉(zhuǎn)、損傷對(duì)側(cè)肢體運(yùn)動(dòng)障礙現(xiàn)象。每次給藥后間隔30 min進(jìn)行1次AIM評(píng)分，連續(xù)測評(píng)4次，最終AIM評(píng)分為4次評(píng)分總和。觀測時(shí)間點(diǎn)為給藥1、3、5、7 w。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS13.0軟件，計(jì)量資料運(yùn)用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1側(cè)旋轉(zhuǎn)行為兩組大鼠給藥后均出現(xiàn)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)，且隨著給藥時(shí)間延長對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)逐漸增加，其中給藥5 w時(shí)大鼠達(dá)到峰值。同一觀測時(shí)間點(diǎn)，觀察組大鼠對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)都低于對(duì)照組(P<0.01)。見表1。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對(duì)照組368.15±104.32490.58±251.93579.36±231.62542.65±251.46觀察組297.46±109.71308.62±130.29319.25±125.74223.81±107.24t/P值2.723/<0.013.741/<0.014.835/<0.014.364/<0.01

2.2旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間兩組大鼠隨著給藥時(shí)間延長，旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間逐漸降低。同一觀測時(shí)間點(diǎn)，觀察組大鼠旋轉(zhuǎn)啟動(dòng)時(shí)間都低于對(duì)照組(P<0.01或P<0.05)。見表2。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對(duì)照組442.23±61.47431.86±60.58420.62±69.61411.37±100.14觀察組402.61±67.53389.37±64.25367.49±68.32302.54±145.81t/P值2.530/<0.052.806/<0.012.669/<0.053.698/<0.01

2.3旋轉(zhuǎn)持續(xù)時(shí)間兩組大鼠隨著給藥時(shí)間延長，旋轉(zhuǎn)持續(xù)時(shí)間呈增加趨勢。同一觀測時(shí)間點(diǎn)，觀察組大鼠旋轉(zhuǎn)持續(xù)時(shí)間都少于對(duì)照組(P<0.01或P<0.05)。見表3。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對(duì)照組143.42±28.51159.74±38.82167.91±29.57172.16±18.26觀察組128.79±21.63137.95±35.17145.42±26.28155.73±14.21t/P值2.384/<0.052.426/<0.052.785/<0.012.657/<0.01

2.4劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)兩組大鼠隨著給藥時(shí)間延長，劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)逐漸增加。同一觀測時(shí)間點(diǎn)，觀察組大鼠劑峰旋轉(zhuǎn)圈數(shù)都少于對(duì)照組(P<0.01或P<0.05)。見表4。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對(duì)照組79.41±31.27102.73±43.52109.24±48.61112.37±25.39觀察組63.28±29.5372.21±30.4381.96±30.8590.23±25.95t/P值2.187/<0.053.351/<0.012.321/<0.052.282/<0.05

2.5AIM評(píng)分兩組大鼠AIM評(píng)分隨治療時(shí)間逐漸增加。同一觀測時(shí)間點(diǎn)，觀察組大鼠AIM評(píng)分都低于對(duì)照組(P<0.01或P<0.05)。見表5。

組別1w(n=34)3w(n=34)5w(n=24)7w(n=14)對(duì)照組21.57±3.6824.94±7.1326.45±4.8430.72±5.42觀察組19.26±3.8520.51±6.2622.89±3.8125.15±5.13t/P值2.529/<0.052.723/<0.012.831/<0.012.793/<0.01

3討論

PD是高齡人群最常見的錐體外系疾病〔7〕，發(fā)病確切病因尚不清楚。藥物治療是PD治療的最主要手段〔8〕。左旋多巴為多巴胺前體，對(duì)黑質(zhì)內(nèi)變性壞死多巴胺神經(jīng)元引起的多巴胺減少起到一定補(bǔ)充作用，可以緩解PD臨床癥狀〔9〕，但也會(huì)產(chǎn)生毒性作用〔10〕。普拉克索為多巴胺受體激動(dòng)劑〔11〕，能夠興奮黑質(zhì)紋狀體內(nèi)的多巴胺受體，減輕PD引起的運(yùn)動(dòng)障礙〔12〕。普拉克索與左旋多巴聯(lián)用時(shí)，可減少左旋多巴給藥量，降低高濃度左旋多巴可能產(chǎn)生的毒性作用〔13〕。大鼠攝入左旋多巴治療PD，使細(xì)胞外左旋多巴濃度增加，刺激黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元，致使大鼠出現(xiàn)對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)行為。而觀察組大鼠給予普拉克索治療后，大鼠對(duì)側(cè)旋轉(zhuǎn)程度較對(duì)照組明顯改善。由此可以認(rèn)為普拉克索能夠緩解黑質(zhì)內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元對(duì)左旋多巴敏感程度，減輕左旋多巴毒性作用。PD不僅可以影響患者的運(yùn)動(dòng)功能，而且可以對(duì)患者的感覺及認(rèn)知也產(chǎn)生嚴(yán)重影響〔14〕。本研究結(jié)果表明普拉克索治療PD大鼠，能夠有效改善左旋多巴治療產(chǎn)生的異常不自主運(yùn)動(dòng)，大鼠攝入左旋多巴后發(fā)生肢體運(yùn)動(dòng)障礙、反復(fù)咀嚼及軀體軸性旋轉(zhuǎn)等異?；顒?dòng)發(fā)生程度明顯減輕。

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〔2015-07-16修回〕

(編輯曲莉)