阿侖膦酸鈉聯(lián)合辛伐他汀對雌性去勢大鼠骨質(zhì)疏松的影響

許大勇

(河南省中醫(yī)院脊柱科，河南鄭州450002)

摘要〔〕目的觀察阿侖膦酸鈉聯(lián)合辛伐他汀對雌性去勢大鼠骨質(zhì)疏松(OP)的影響。方法50只雌性SD大鼠隨機(jī)分為模型組(n=40)與假手術(shù)組(n=10)，模型組完整摘除雙側(cè)卵巢組織，假手術(shù)組僅切除卵巢周圍部分脂肪組織，建模成功后，將模型組再隨機(jī)分為對照組，阿侖膦酸鈉組，辛伐他汀組和聯(lián)合用藥組。假手術(shù)組和對照組給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1灌胃，阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1灌胃，辛伐他汀組給予辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，聯(lián)合用藥組給予阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1+辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，療程均為8 w。比較各組血漿堿性磷酸酶(ALP)、鈣離子(Ca2+)、血清無機(jī)磷(P3+)水平以及骨密度和應(yīng)力試驗(yàn)。結(jié)果①各組大鼠血清Ca2+、P3+比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，與假手術(shù)組相比對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯(lián)合用藥組血清ALP均顯著提高(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組和聯(lián)合用藥組血清ALP顯著低于對照組和辛伐他汀組(P<0.05)；②與假手術(shù)組相比，對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯(lián)合用藥組股骨密度均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯(lián)合用藥組股骨密度較對照組顯著增加(P<0.05)，辛伐他汀組股骨密度與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；③與假手術(shù)組相比，對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯(lián)合用藥組應(yīng)力試驗(yàn)均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯(lián)合用藥組應(yīng)力試驗(yàn)較對照組顯著增加(P>0.05)，辛伐他汀組應(yīng)力試驗(yàn)與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 結(jié)論辛伐他汀抗OP需在阿侖膦酸鈉應(yīng)用的前提下充分發(fā)揮，但他汀類藥物不能起到很好的抗OP作用。

關(guān)鍵詞〔〕骨質(zhì)疏松；阿侖膦酸鈉；辛伐他??；去勢

中圖分類號〔〕R56〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

第一作者：許大勇(1973-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事脊柱外科方面的研究。

骨質(zhì)疏松(OP)好發(fā)于絕經(jīng)后婦女及老年人〔1〕。阿侖膦酸鈉是骨代謝調(diào)節(jié)劑，具有抑制破骨細(xì)胞活性，抑制骨吸收的作用，被臨床上用于絕經(jīng)后婦女OP的治療〔2〕。研究發(fā)現(xiàn)〔3〕，他汀類藥物除具有調(diào)節(jié)血脂功能外，還具有促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖及分化的作用，為OP治療提供了新的方向。本研究觀察阿侖膦酸鈉聯(lián)合辛伐他汀對雌性去勢大鼠OP的影響，旨在為OP的治療提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料 雌性SD大鼠50只，8～10周齡，體重220～240 g，平均(232±5)g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；常溫低速離心機(jī)；全自動(dòng)生化分析儀(Sysmex Chemix-180型)；雙能X線骨密度儀(DEXA，Discovery-Wi型，美國Hologic公司生產(chǎn))；萬能材料試驗(yàn)機(jī)(太原理工大學(xué)生物力學(xué)研究所提供)；阿侖膦酸鈉(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司)，辛伐他汀(杭州默沙東制藥有限公司)，青霉素鈉。

1.2動(dòng)物模型的復(fù)制與實(shí)驗(yàn)分組50只SD雌性大鼠隨機(jī)分為模型組(n=40)與假手術(shù)組(n=10)，在適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w后建模，模型組給予2%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉，經(jīng)背部中線第二腰椎水平做縱行切口，充分顯露卵巢，完整摘除雙側(cè)卵巢組織，假手術(shù)組僅切除卵巢周圍部分脂肪組織。喂養(yǎng)8 w后將模型組隨機(jī)分為對照組，阿侖膦酸鈉組，辛伐他汀組和聯(lián)合用藥組，每組10只，各組隨機(jī)選取2只大鼠，處死后進(jìn)行左側(cè)股骨密度測定，確定是否造模成功。確定成功后剩余大鼠腹腔麻醉，左側(cè)大腿外側(cè)行2～3 cm縱行切口，分離股骨中段，小鋼鋸鋸斷后應(yīng)用克氏針?biāo)鑳?nèi)固定，術(shù)后常規(guī)應(yīng)用青霉素預(yù)防感染。假手術(shù)組和對照組給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1灌胃，阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1灌胃，辛伐他汀組給予辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，聯(lián)合用藥組給予阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1+ 辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，療程均為8 w。

1.3觀察指標(biāo)用藥治療8 w后2%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉，快速心臟取血8 ml，3 000 r/min離心10 min，分離上清液，應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀測定血漿堿性磷酸酶(ALP)、鈣離子(Ca2+)、血清無機(jī)磷(P3+)。拔除克氏針，取左側(cè)股骨，應(yīng)用雙能X線骨密度儀測定股骨中段骨折部位上下3 mm區(qū)域骨密度。將股骨置于萬能材料試驗(yàn)機(jī)，進(jìn)行三點(diǎn)彎曲，最大破壞負(fù)荷試驗(yàn)，加載速度2 mm/min。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析和SNK法。

2結(jié)果

2.1各組大鼠血清ALP、Ca2+、P3+比較表1可見，各組大鼠血清Ca2+、P3+比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，與假手術(shù)組相比，對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯(lián)合用藥組血清ALP均顯著提高(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組和聯(lián)合用藥組血清ALP顯著低于對照組和辛伐他汀組(P<0.05)。

表1　各組大鼠血清ALP、Ca 2+、P 3+比較

與假手術(shù)組比較：1)P<0.05；與對照組比較：2)P<0.05；與辛伐他汀組比較：3)P<0.05

2.2各組大鼠股骨密度比較與假手術(shù)組〔(0.197±0.006)g/cm2〕相比，對照組〔(0.144±0.008)g/cm2〕、阿侖膦酸鈉組〔(0.158±0.007)g/cm2〕、辛伐他汀組〔(0.149±0.006)g/cm2〕、聯(lián)合用藥組〔(0.170±0.010)g/cm2〕股骨密度均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯(lián)合用藥組較對照組顯著增加(P<0.05)，辛伐他汀組與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.3各組大鼠股骨生物力學(xué)比較與假手術(shù)組〔(183.17±8.28)N〕相比，對照組〔(153.28±7.45)N〕、阿侖膦酸鈉組〔(166.23±7.07)N〕、辛伐他汀組〔(156.16±6.67)N〕、聯(lián)合用藥組〔(174.45±8.01)N〕應(yīng)力試驗(yàn)均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯(lián)合用藥組較對照組顯著增加(P<0.05)，辛伐他汀組與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

3討論

阿侖膦酸鈉是一種穩(wěn)定的無機(jī)焦磷酸鹽類似物，與骨內(nèi)羥磷灰石有強(qiáng)親和力。能進(jìn)入骨基質(zhì)羥磷灰石晶體中，當(dāng)破骨細(xì)胞溶解晶體，藥物被釋放，能抑制破骨細(xì)胞活性，并通過成骨細(xì)胞間接起抑制骨吸收作用，從而使骨密度增加〔4〕。但由于在骨轉(zhuǎn)換過程中阿侖膦酸鈉也同時(shí)抑制了成骨細(xì)胞活性，可能影響骨折愈合〔5〕。另有研究表明〔6〕，阿侖膦酸鈉口服吸收后主要在小腸內(nèi)吸收，但吸收程度很差，生物利用度約為0.7%，且食物和礦物質(zhì)等可顯著減少其吸收，故臨床效果有限。

近年來有研究顯示，他汀類藥物能夠促進(jìn)嚙齒類動(dòng)物骨痂形成，提高骨密度，在OP防治上具有廣闊的應(yīng)用前景〔7，8〕。一項(xiàng)英國的研究報(bào)道〔9〕，長期應(yīng)用他汀類藥物可以使骨折危險(xiǎn)性顯著降低。美國新澤西州的一項(xiàng)病例對照研究顯示〔10〕，他汀類藥物可以使使用者髖部骨折發(fā)生率降低0.37。但Nakashima等〔11〕研究發(fā)現(xiàn)他汀類藥物并不能阻止去勢大鼠骨量的丟失，只對骨轉(zhuǎn)換和骨代謝有刺激作用。本研究結(jié)果支持Nakashima等〔11〕的研究報(bào)道，表明辛伐他汀對去勢大鼠骨量的丟失的阻止作用有限，但聯(lián)合阿侖膦酸鈉則對骨轉(zhuǎn)換和骨代謝有刺激作用。從各組大鼠股骨密度和應(yīng)力試驗(yàn)結(jié)果比較來看，也支持上述觀點(diǎn)。筆者認(rèn)為他汀類藥物具有促進(jìn)骨形態(tài)蛋白2基因表達(dá)的作用，通過促進(jìn)骨細(xì)胞分化影響骨的形成，而這種作用可能在阿侖膦酸鈉應(yīng)用的前提下充分發(fā)揮，僅他汀類藥物不能起到很好的抗OP作用〔12，13〕。另外，阿侖膦酸鈉聯(lián)合辛伐他汀抗骨質(zhì)疏松作用較單獨(dú)應(yīng)用阿侖膦酸鈉更佳，這可能與兩種藥物的協(xié)同機(jī)制有關(guān)，對OP的臨床治療具有一定意義〔14〕。

4參考文獻(xiàn)

1張勇，李宏艷，王秋平，等.肝腎不足型骨質(zhì)疏松癥患者體液免疫水平的變化及骨愈靈的療效觀察〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013;13(22):4252-5.

2薛增奇，陳金春，丁曉凱.阿侖膦酸鈉治療血透骨質(zhì)疏松癥甲狀旁腺激素變化的臨床研究〔J〕.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2014;26(5):570-2.

3白莉萍.阿侖膦酸鈉對糖尿病合并骨質(zhì)疏松骨密度的作用〔J〕.中國藥物與臨床，2014;14(7):991-3.

4余選鋒.阿侖膦酸鈉與降鈣素聯(lián)合治療骨質(zhì)疏松癥的臨床效果觀察〔J〕.中國當(dāng)代醫(yī)藥，2014;21(21):89-91.

5薛江義，張晶晶.阿侖膦酸鈉聯(lián)合辛伐他汀對骨質(zhì)疏松骨折的影響〔J〕.中國醫(yī)藥科學(xué)，2014;4(10):20-3.

6趙春芝.胰島素、阿侖膦酸鈉治療新診斷老年糖尿病骨質(zhì)疏松癥患者骨密度及骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)的研究〔J〕.中國骨質(zhì)疏松雜志，2014;20(4):392-5.

7卜建龍，徐亮，張品一，等.不同用藥方案阿侖磷酸鈉治療老年性骨質(zhì)疏松癥的臨床療效分析〔J〕.中國骨質(zhì)疏松雜志，2014;20(2):181-4.

8溫志剛，梁志繁.阿侖膦酸鈉與阿法骨化醇治療老年性骨質(zhì)疏松癥的療效比較〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)院，2014;14(1):38-40.

9Seferos N，Pantopoulou A，Kotsiou A，etal.The influence of simvastatin in rats mandible and femur bone mass under Freund's adjuvant arthritis〔J〕.Stomatologija，2012;14(2):46-52.

10Brandt NJ，Stefanacci RG.Discontinuation of unnecessary medications in older adults〔J〕.Consult Pharm，2011;26(11):845-54.

11Nakashima Y，Haneji T.Stimulation of osteoclast formation by RANKL requires interferon regulatory factor-4 and is inhibited by simvastatin in a mouse model of bone loss〔J〕.PLoS One，2013;8(9):e72033.

12劉茗露，王光輝，尹華.阿侖膦酸鈉治療老年骨質(zhì)疏松的臨床療效〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2014;34(4):917-8.

13李德梅，蔡莉莉，徐劍剛.阿侖膦酸鈉聯(lián)合阿法骨化醇治療老年慢性阻塞性肺疾病患者骨質(zhì)疏松癥〔J〕.實(shí)用老年醫(yī)學(xué)，2014;28(3):226-9.

14權(quán)朋勃，王明禮.注射型唑來膦酸與阿侖膦酸鈉治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的臨床比較〔J〕.中國婦幼保健，2014;29(8):1283-5.

〔2015-01-19修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

《中國老年學(xué)雜志》被國內(nèi)數(shù)家數(shù)據(jù)庫、檢索性期刊檢索機(jī)構(gòu)收錄情況

《中國老年學(xué)雜志》被評為第二屆北方期刊優(yōu)秀期刊，吉林省雙十佳期刊，以國家重大課題和省部級課題研究成果為主要報(bào)道內(nèi)容的基礎(chǔ)研究欄目被評為吉林省學(xué)術(shù)期刊名欄，被中國自然科學(xué)核心期刊研究課題組列為中國自然科學(xué)核心期刊、北大圖書館·北京高校圖書館期刊工作研究會列為中文核心期刊，并被中國科學(xué)引文數(shù)據(jù)庫、中國生物學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國學(xué)術(shù)期刊綜合評價(jià)數(shù)據(jù)庫、中文科技期刊數(shù)據(jù)庫、中國核心期刊(遴選)數(shù)據(jù)庫、解放軍醫(yī)學(xué)圖書館數(shù)據(jù)庫及中國數(shù)字圖書館示范工程超星數(shù)字圖書館收錄及列為統(tǒng)計(jì)源期刊，并被《中國醫(yī)學(xué)文摘·老年學(xué)分冊》、《中國醫(yī)學(xué)文摘·皮膚科學(xué)分冊》、《中國生物學(xué)文摘》、《中文科技資料目錄》(中草藥)、《中文科技資料目錄》(醫(yī)藥衛(wèi)生)等檢索性期刊摘錄。