腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1/CD82和整合素β1在子宮內(nèi)膜腺癌中表達及臨床意義

張曉勇魏琳琳

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧錦州121000)

摘要〔〕目的研究KAI1/CD82與整合素β1亞基在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達以及與臨床病理特征之間的關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)S-P法檢測46例子宮內(nèi)膜腺癌患者中KAI1/CD82蛋白和整合素β1亞基的表達。結(jié)果KAI1/CD82蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌中的陽性表達率較正常子宮內(nèi)膜組織降低明顯(P<0.01)。KAI1/CD82在子宮內(nèi)膜腺癌中的陽性表達率與手術(shù)-病理分期(P=0.008)、組織學(xué)分級(P=0.001)、肌層浸潤深度(P=0.017)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.005)密切相關(guān)。整合素β1蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌中的陽性表達率明顯高于正常子宮內(nèi)膜組織(P<0.001)。整合素β1在子宮內(nèi)膜腺癌組中的陽性表達率與組織學(xué)分級(P=0.013)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.003)密切相關(guān)。 KAI1/CD82與整合素β1的表達呈負相關(guān)。結(jié)論KAI1/CD82表達下調(diào)，同時伴整合素β1的異常表達增高，促進子宮內(nèi)膜腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。檢測其表達異常，對判斷子宮內(nèi)膜腺癌轉(zhuǎn)移趨勢、評估預(yù)后及指導(dǎo)治療意義重大。

關(guān)鍵詞〔〕KAI1/CD82；整合素β1；免疫組織化學(xué)法；子宮內(nèi)膜腺癌

中圖分類號〔〕R737.33〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：張曉勇(1971-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤研究。

大多數(shù)子宮內(nèi)膜癌患者死于腫瘤后期癌細胞的擴散及轉(zhuǎn)移。CD82蛋白作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAI1的一種基因產(chǎn)物，屬于跨膜4超家族(TM4SF)成員。研究發(fā)現(xiàn)TM4SF分子可與整合素形成復(fù)合體，通過介導(dǎo)細胞的黏附來達到抑制腫瘤細胞侵襲及轉(zhuǎn)移的目的。本文檢測KAI1/CD82和整合素β1在子宮內(nèi)膜腺癌患者中的水平變化及與臨床病理特征間的關(guān)聯(lián)性。

1資料與方法

1.1一般資料2012年6月至2014年6月在天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院行手術(shù)切除治療的子宮內(nèi)膜腺癌患者的石蠟標本46例，不典型增生子宮內(nèi)膜(EIN)14例，因子宮肌瘤手術(shù)切除的正常增生期子宮內(nèi)膜標本13例進行檢測，病理診斷均經(jīng)HE染色及兩位病理專家確診。子宮內(nèi)膜腺癌的手術(shù)-病理分期參考國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2000年)的標準。年齡33～72歲，中位年齡56.5歲，排除標準：術(shù)前行放化療或激素治療者；合并妊娠、子宮內(nèi)膜增殖癥或婦科以外的其他腫瘤的患者。

1.2方法采用免疫組化SP法檢測KAI1和整合素β1蛋白的表達。鼠抗人單克隆抗體KAI1(sc-17752)購自上海新肽生物科技有限公司，鼠抗人單克隆抗體Integrinβ1(sc-9970)購自上海天呈醫(yī)流科技股份有限公司，SP免疫組織化學(xué)染色試劑盒購自北京綠源大德生物科技有限公司。陽性對照選擇已確定的陽性組織切片，陰性對照選擇以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗進行。

1.3指標判斷依據(jù)①KAI1與整合素β1表達陽性判定標準：以細胞膜和(或)細胞質(zhì)中出現(xiàn)清晰棕黃色細顆粒為依據(jù)〔1〕。②綜合評分的判定：綜合評分=陽性細胞數(shù)評分+染色強度評分，綜合評分≥4分者為“+”表達，<4分為“-”表達。其中陽性細胞數(shù)以陽性細胞數(shù)的百分率為參考，>50%計3分，>25%且≤50%計2分，>5%且≤25%計1分，≤5%計0分。染色強度評分以細胞染色強度的分級為參考，棕褐色計3分，棕黃色計2分，淺黃色計1分，無著色計0分。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法利用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行χ2檢驗或Fisher確切概率檢驗和Spearman等級相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1KAI1、整合素β1在不同組織中的表達情況KAI1主要在細胞膜和(或)細胞質(zhì)中表達，表達產(chǎn)物為棕黃色顆粒。KAI1蛋白、整合素β1在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的陽性表達率較子宮內(nèi)膜不典型增生組和正常子宮內(nèi)膜組顯著降低、升高(P<0.05)。見表1和圖1。整合素β1主要在細胞膜、細胞質(zhì)中表達，表達產(chǎn)物呈棕黃色或棕褐色。

表1　 KAI1/CD82、整合素β1在不同組織中的陽性表達

1)與子宮內(nèi)膜腺癌相比

2.2KAI1、整合素β1的蛋白表達與子宮內(nèi)膜腺癌臨床病理特征的相關(guān)性分析隨著子宮內(nèi)膜腺癌手術(shù)病理分期、組織學(xué)分級、肌層浸潤深度的增加及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，KAI1蛋白的陽性表達率呈遞減趨勢，呈負相關(guān)(P<0.05)。在子宮內(nèi)膜腺癌組織中，隨著組織學(xué)分級的增加及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，整合素β1蛋白陽性表達率呈增高趨勢，呈正相關(guān)(P<0.05)。見表2。

2.3KAI1與整合素β1在子宮內(nèi)膜癌組織中表達的相關(guān)性分析列聯(lián)系數(shù)r=-0.433(χ2=8.626，P=0.003)。

正常子宮內(nèi)膜KAI1/CD82陽性表達

子宮內(nèi)膜腺癌KAI1/CD82陰性表達

正常子宮內(nèi)膜整合素β1陰性表達

子宮內(nèi)膜腺癌整合素β1陽性表達

臨床資料nKAI1/CD82χ2值P值整合素β1χ2值P值年齡(歲) <50116(54.5)1.8850.1703(27.3)3.5930.058 ≥503515(42.9)21(60.0)組織學(xué)分級 G11311(84.6)12.0650.0025(38.5)8.7130.013 G2228(36.4)9(40.9) G3112(18.2)10(90.9)手術(shù)-病理分期 Ⅰ期2315(65.2)7.0970.00810(43.5)1.3940.238 Ⅱ～Ⅲ期236(26.1)14(60.9)肌層浸潤深度 無或≤1/22415(62.5)5.7410.01711(45.8)0.8090.369 >1/2226(27.3)13(59.1)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 有3519(54.3)7.7890.00514(40.0)8.6930.003 無112(18.2)10(90.9)

3討論

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率占女性生殖器惡性腫瘤的一半以上。隨著醫(yī)療技術(shù)及分子生物學(xué)的不斷進步及發(fā)展，關(guān)于子宮內(nèi)膜癌的基因治療、分子靶向治療等新的治療手段不斷涌現(xiàn)。但其5年生存率仍處于癌癥生存的較低水平，其主要的死亡原因為癌細胞的侵襲及轉(zhuǎn)移。該過程涉及轉(zhuǎn)移抑制基因的缺失及失活、轉(zhuǎn)移促進基因的激活及腫瘤細胞、機體、靶細胞間的關(guān)系。

KAI1作為新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的一個，在人染色體11p11.2上有表達〔2〕。KAI1基因參與腫瘤的作用過程尚無明確定論，推測可能的原因為KAI1基因介導(dǎo)了細胞與環(huán)境間的信號傳遞，進而參與細胞的運動及分化，達到抑制腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移的目的〔3〕。近年研究發(fā)現(xiàn)KAI1和其他TM4SF分子可與整合素β1亞基組成四分子交聯(lián)網(wǎng)，對細胞表面的蛋白進行準確的定位，調(diào)節(jié)整合素家族依賴性細胞外基質(zhì)(ECM)的黏附作用〔4〕。

Guo等〔5〕進一步的研究表明KAI1在膀胱癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、卵巢癌〔6〕和宮頸癌〔7〕患者中的表達明顯降低。White等〔8〕利用Western印跡方法對8種子宮內(nèi)膜癌細胞株進行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)KAI1在其中7種癌細胞株中均表現(xiàn)為低表達，提示KAI1可能參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展過程。Liu等〔9〕研究表明，在早期子宮內(nèi)膜癌患者發(fā)展至轉(zhuǎn)移的過程中，KAI1的表達丟失在28%～71%，與本文結(jié)果基本一致。

整合素作為跨膜糖蛋白的一種，存在兩個亞單位α、β，并在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮功效。整合素β1家族是介導(dǎo)ECM信號的最主要的細胞表面受體，介導(dǎo)細胞與細胞、細胞與基質(zhì)、細胞-基質(zhì)-細胞之間的反應(yīng)〔10〕。整合素β1亞基在腫瘤的發(fā)生及轉(zhuǎn)移過程中可能發(fā)揮介導(dǎo)細胞黏附的功效。整合素β1、KAI1/CD82可能利用彼此間的信號網(wǎng)絡(luò)來進行信號傳導(dǎo)間級聯(lián)反應(yīng)的調(diào)節(jié)，進而改變細胞的行為，發(fā)揮其協(xié)同作用。綜上，KAI1/CD82與整合素β1的聯(lián)合檢測能更好地對子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)行為、轉(zhuǎn)移趨勢做出合理的判定，指導(dǎo)患者的預(yù)后評估及綜合治療等。

4參考文獻

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7Liu FS，Chen JT，Dong JT，etal.KAI1 metastasis suppressor gene is frequently down-regulated in cervical carcinoma〔J〕.Am J Pathol，2001；159(5)：1629-34.

8White A，Lamb PW，Barrett JC，etal.Frequent downregulation of the KAI1(CD82)metastasis suppressor protein in human cancer cell lines〔J〕.Oncogene，1998；16(24)：3143-9.

9Liu FS，Dong JT，Chen JT，etal.KAI1 metastasis suppressor protein is down-regulated during the progression of human endometrial cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2003；9(4)：1393-8.

10Riemenschneider MJ，Mueller W，Betensky RA，etal.In situ analysis of integrin and growth factor receptor signaling pathways in human glioblastomas suggests overlapping relationships with focal adhesion kinase activation〔J〕.Am J Pathol，2005；167(5)：1379-87.

〔2014-01-11修回〕

(編輯苑云杰)